Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Выгодчикова Г.Ю. 1 Чехонацкий А.А. 1 Ульянов В.Ю. 2 Щуковский В.В. 2 Чехонацкий И.А. 1

---

1 ГБОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского» Минздрава России

2 ФГБУ «СарНИИТО» Минздрава России

В сыворотке крови 45 больных с контузионными очагами и внутричерепными гематомами малого объема на 1-е, 3-и, 7, 14 и 21-е сутки посттравматического периода методом иммуноферментного анализа определяли количественное содержание нейроспецифических белков – общего белка S-100 (αβ+ββ), глиального кислого фибриллярного белка (GFAP), основного белка миелина (MBP) и цилиарного нейротрофического фактора (CNTF). Установлено, что процесс ремоделирования нервной ткани у пациентов с очаговыми травматическими повреждениями головного мозга в посттравматическом периоде характеризовался развитием цитолиза белого вещества и глии, а также индукцией регенерации, выраженность которых определялась динамическими изменениями содержания нейроспецифических белков в сыворотке крови. Цитолиз белого вещества головного мозга сопровождался повышением концентрации MBP во все периоды наблюдения, астроглиальная реакция - повышением уровня общего белка S-100 (αβ+ββ) на 1-е сутки и GFAP на 1-3-и сутки с момента травмы, регенерация нервной ткани – повышением содержания CNTF во все сроки наблюдения.

Статья в формате PDF

122 KB

головной мозг

очаговые повреждения

нервная ткань

нейроспецифические белки

иммуноцитохимическая диагностика

1. Агаджанян В.В., Устьянцева И.М., Хохлова О.И. Патогенетические аспекты посттравматической иммуновоспалительной реакции // Политравма. – 2009. – №4. – С. 5-8.

2. Балабан П.М., Гуляева Н.В. Общность молекулярных механизмов нейропластичности и нейропатологии: интегративный подход // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. – 2006. – №2. – С. 145-152.

3. Гомазков О.А. Ростовые и нейротрофические факторы в регуляции трансформации стволовых клеток и нейрогенеза // Нейрохимия. – 2007. – №2. – С. 101-120.

4. Гусев Е.И., Коновалов А.Н. Клинические рекомендации. Неврология и нейрохирургия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 368 с.

5. Кондратьев, А.Н. Неотложная нейротравматология - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 192 с.

6. Конюченко Е.А., Ульянов В.Ю., Гладкова Е.В., Пучиньян Д.М. Иммунологические маркеры повреждения нервной ткани при осложненной травме верхнешейного отдела позвоночника / Вертебрология в России: итоги и перспективы развития // Сб. тезисов V съезда хирургов-вертебрологов России. – Саратов, 2014. – С. 86-87.

7. Крылов В.В., Петриков С.С. Нейрореанимация: Практическое рук-во. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 176 с.

8. Лебедев В.В. Гематоэнцефалический барьер в практической нейрохирургии // Нейрохирургия. – 2006. – №2. – С. 6-11.

9. Лихтерман Л.Б., Коновалов А.Н., Потапов А.А. Нейротравматология: Справочник. – М.: ВАЗАР-ФЕРРО, 1994. – С. 32-295.

10. Сидоркина А.Н., Сидоркин В.Г. Биохимические аспекты травматической болезни и ее осложнений. – Н. Новгород: ННИИТО, 2007. – 120 с.

В литературе приводятся сведения об изменениях содержания отдельных нейроспецифических белков при тяжелой черепно-мозговой травме, возможных иммуноцитохимических критериях прогноза тяжести полученной травмы [2, 6], однако отсутствует информация о роли определения содержания этих маркеров при очаговых травматических повреждениях головного мозга. Поэтому определение в динамике изменений содержания нейроспецифических белков в сыворотке крови является малоинвазивным и перспективным методом, позволяющим в комплексе с клинико-интраскопическими методами, достоверно оценивать состояние нервной ткани в процессе ее ремоделирования.

Цель: на основании количественной оценки содержания иммуноцитохимических маркеров в сыворотке крови определить состояние нервной ткани в процессе ее ремоделирования у пациентов с травматическими очаговыми повреждениями головного мозга.

Материал и методы исследования

Объектом исследования явились 45 пациентов (основная группа) обоего пола в возрасте 43±7,5 лет с травматическими очаговыми повреждениями головного мозга (основная группа), находившихся в клинике нейрохирургии ГУЗ «Саратовская городская клиническая больница №1 им. Ю.Я. Гордеева» и ГАУЗ «Энгельсская городская больница №1» в период с 2011 по 2013 гг. и 45 условно здоровых лиц, не имеющих в анамнезе указаний на повреждения и заболевания головного мозга, сопоставимых по полу и возрасту (контрольная группа). Критериями включения пациентов в основную группу были максимальный диаметр очаговых повреждений головного мозга, не превышающий 4 см, объем оболочечной гематомы менее 30 мл при височной локализации и не более 50 мл - при лобной или иной супратенториальной локализации.

В обеих группах обследуемых осуществляли взятие образцов периферической крови из кубитальных вен в объеме 5 мл, которые экспонировали при температуре 23°С и после образования сгустка центрифугировали при 200 об\мин в течение 10 мин для получения сыворотки.

Характер ответной реакции нервной ткани в посттравматическом периоде изучали на 1-е, 3-и, 7-е, 14-е и 21-е сутки путем оценки концентрации нейроспецифических белков в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа с помощью наборов для определения общего белка S-100 (αβ+ββ), глиального кислого фибриллярного белка (GFAP), основного белка миелина (MBP) и цилиарного нейротрофического фактора (CNTF) в соответствии с инструкциями к их применению.

Статистическую обработку полученных данных осуществляли при помощи пакета программ Statistical Package for the Social Science (IBM SPSS 20 Statistics). Проверяли гипотезы о виде распределений (критерий Шапиро-Уилкса). Большинство полученных нами данных не соответствовало закону нормального распределения, поэтому для сравнения значений использовали непараметрический U-критерий Манна-Уитни и показатель достоверности (р). Результаты считали статистически достоверными при р<0,05, что соответствует требованиям, предъявляемым к медико-биологическим исследованиям.

Результаты исследования

Уровень общего белка S-100 (αβ+ββ) на 1-е сутки с момента получения травмы увеличился в 27,05 раз по сравнению с контролем (р<0,001). В остальные периоды наблюдения концентрация изучаемого показателя постепенно снижалась (р_1-4<0,001), оставаясь, однако достоверно выше контрольного значения (р<0,001).

Содержание GFAP на 1-е сутки посттравматического периода увеличилось в 25,11 раз по сравнению со значением, полученным в группе контроля (р<0,001) и на 3-и сутки еще в 1,16 раз по сравнению с предыдущим периодом наблюдения (р₁<0,001). Затем происходило последовательное снижение концентрации исследуемого белка в 1,86 (р₂<0,001), 1,06 (р₃<0,001) и 1,61 (р₄<0,001) раз по сравнению с каждыми предыдущими сутками. Следует отметить, что уровень GFAP во все сроки исследования находился выше контрольного значения (р<0,001).

Концентрация МВР на 1-е сутки с момента травмы увеличивалась в 2,56 раза по сравнению с контролем (р<0,001) с последующим ростом значений на 3-и - 14-е сутки       (р_1-3<0,001). На 21-е сутки после травмы достоверных изменений уровня исследуемого белка обнаружено не было. При этом, также во все сроки наблюдения значения показателя превышали контрольное (р<0,001).

Уровень CNTF на 1-е сутки с момента получения травмы увеличился в 64,67 раза по сравнению с контрольным (р<0,001). На 3-и сутки фиксировали снижение количества изучаемого фактора в 1,11 раз (р₁<0,001), на 7-е сутки статистически значимых изменений выявлено не было (р=0,096), на 14-е сутки отмечали увеличение концентрации в 1,07 раз (р₃<0,001), на 21-е сутки статистически значимых изменений также не было (р₄=0,809). Во все сроки наблюдения значения CNTF превышали контрольное (р<0,001).

Таблица 1

Динамика содержания нейроспецифических белков в сыворотке крови пациентов с травматическими очаговыми повреждениями головного мозга

Обсуждение полученных результатов

Прогрессирующее увеличение концентрации МВР, обнаруженное нами во все сроки наблюдения, вероятно, было обусловлено массивной деструкцией (цитолизом) белого вещества головного мозга, которая сопровождалась повреждением мембран аксонов, выходом МВР из поврежденной нервной ткани и накоплением его в цереброспинальной жидкости и сыворотке крови. Это соответствует данным [5, 10] о том, что миелин является изолирующим покрытием, окружающим нейроны, повреждаемым в момент травмы белого вещества головного мозга.

Увеличение концентрации общего белка S-100 (αβ+ββ) на 1-е сутки и GFAP на 1-3-и сутки, по нашему мнению, свидетельствовало о развитии цитолиза нервной ткани и астроглиальной реакции (глиоза и/или глиоцитопении), что соответствовало сведениям [7] о возрастании концентраций данных маркеров в первые часы - сутки после получения травмы головного мозга.

Возрастание содержания CNTF, фиксируемое нами во все сроки наблюдения, свидетельствовало о развитии регенерации нервной ткани и соответствовало данным [9] о роли факторов роста нервной ткани в механизмах долговременной адаптации центральной нервной системы после ее повреждения через структурные изменения синапсов и сохранение нейронов.

Заключение:

Комплексное исследование уровней содержания нейроспецифических белков в сыворотке крови у больных с очаговыми травматическими повреждениями головного мозга позволяет селективно оценивать на биохимическом уровне отдельные механизмы процесса ремоделирования нервной ткани, повышая в совокупности чувствительность и специфичность используемых клинико-интраскопических методов диагностики данной патологии.

Рецензенты:

Чехонацкая М.Л., д.м.н., профессор, заведующая кафедрой лучевой диагностики и лучевой терапии ГБОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского» Минздрава России, г. Саратов;

Тахтамыш М.А., д.м.н., заведующий хирургическим отделением ГУЗ «Саратовская городская клиническая больница №2 им. В.И. Разумовского», г. Саратов.

Библиографическая ссылка