На сегодняшний день заболевание острый лейкоз волнует всех, встречается и в развивающихся, и в развитых странах и выявляется у людей всех рас, как среди взрослого населения, так и среди детей.
Острый лейкоз – это острое злокачественное заболевание системы крови, с поражением на уровне детерминированных родоначальных - стволовых клеток или ранних клеточных предшественников, характеризующимся наличием опухолевых (бластных) клеток в костномозговом пунктате или в периферической крови от 20% и более.
Как отмечают авторы [1], при постановке диагноза «острый лейкоз» цитогенетические, цитохимические, морфологические исследования остаются мощным инструментом в клинической практике, но для подробного изучения клеток костного мозга метод проточной цитофлуометрии и при правильном сборе материала имеет, несомненно, большие преимущества.
В обосновании иммунофенотипического диагноза при острых лейкозах c помощью метода проточной цитофлуориметрии необходимо оценить особенности иммунофенотипических характеристик опухолевых клеток и определить вариант направленности Т и В, и исключить миелоидную и редкие варианты неясной линейности.
При В-лимфобластном лейкозе к В-клеточным маркерам относят CD19, CD79a, (cyCD79a), CD22(cyCD22), CD10,CD20. Фенотипы CD19+CD10+ при остром В- лимфобластном лейкозе являются наиболее распространенными.
При острых лимфобластных лейкозах (Т-лимфобластный лейкоз/лимфома) опухолевые клетки имеют фенотип, сходный с Т-линейными предшественниками. К ранним маркерам при T-ОЛЛ относятся CD 99,CD34, CD1a, терминальная дезоксинуклеотидил трансфераза (TdТ), cyCD3, CD7.
При диагностике необходимо в первую очередь оценить цитоплазматическую экспрессию CD3, который является единственным линейно-специфическим антигеном Т-линии.
Для определения линейной принадлежности опухолевых клеток применяются наборы антител, по рекомендации консорциума Еврофлоу [2], Европейской сети лейкемии [3], а также иcпользуются для дифференциальной диагностики классификации Европейской группы иммунологической характеристики острых лейкозов (EGIL) [4] и Всемирной организации здравоохранения (WHO) [5].
Однако нам, клиницистам, после постановки диагноза и определения варианта клеточной линейности необходимо сделать правильный подбор терапии (ПХТ).
Для целенаправленного лечения при онкогематологических заболеваниях у больных детей и у взрослых и для достижения хорошего результата от проведенной полихимиотерапии необходимо проводить иммунофенотипирование по системе HLA - главного комплекса гистосовместимости. Проведение близкородственной, неродственной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток позволяется при наличии HLA – идентичного здорового донора или плацентарной крови [6].
На сегодняшний день трансплантация костного мозга дает лучшие результаты для увеличения выживаемости при лечении онкогематологических заболеваний.
Целью нашего исследования является определить частоту распространенности и провести ранний диагностический анализ иммунофенотипа опухолевой клеточной линейности при острых лимфобластных лейкозах у больных детей в Кыргызской Республике (Киргизии).
Материал и методы исследования
В группу исследования с ноября 2016 года по декабрь 2018 года вошли с острым лимфобластным лейкозом - 70 пациентов-детей (женского пола - 25, мужского пола - 45), все граждане Кыргызской Республики (Киргизии), в возрасте от 1,5 года до 16 лет, из них 52 кыргызской национальности и жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии) - 18 пациентов-детей (женского пола - 3, мужского пола - 15), проходившие обследование в отделении детской онкологии Национального центра онкологии и гематологии Министерства здравоохранения Кыргызской Республики и в отделении детской гематологии Ошской межобластной клинической детской больницы г. Ош; в г. Санкт-Петербург на базе Евразийского центра онкогематологии, иммунологии и терапии больные консультированы врачами-гематологами. Иммунофенотипирование с помощью проточной цитофлуориметрии проводилось в г. Бишкек, Кыргызская Республика (Киргизия) [1].
Иммунофенотипирование с помощью метода проточной цитофлуориметрии
Материалом для исследования был костный мозг. Больным произведена пункция грудины. При получении материала необходимо соблюдать технику сбора. И для информативного, качественного результата пункционный анализ не должен быть с примесью крови и механически в пробирках с ЭДТА не разрушать клетки во время пробоподготовки к иммунофенотипированию. Иммунофенотипирование лейкозных (бластных) клеток проводят на проточном цитофлуометре Cytomics FC500 (Beckman Coulter, США) с использованием моноклональных антител Beckman Coulter.
Статистическая обработка полученных результатов включала в себя анализ стандартных критериев. χ2 -квадрат использовали для оценки достоверности различий по встречаемости определенных признаков между исследуемой группой. Определение величины «р», соответствующей найденному значению χ2–квадрат, велось на компьютерной программе с учетом одной степени свободы. Все математические расчеты и общий статистический анализ полученных исследований проводили с помощью персонального компьютера с использованием пакета прикладных программ для электронных таблиц Microsoft - ExcelM Версия 7,0 для Windows 95, для Windows 2010, Statistica 5.
Результаты исследования и их обсуждение
При проведении нами исследований диагноз «острый лимфобластный лейкоз» устанавливался на основании общих клинических данных и комплексных лабораторно-диагностических показателей. Диагностирование иммунофенотипированием с помощью метода проточной цитофлуориметрии даёт возможность определить вариант Т- и В-линейной направленности.
Сравнительная характеристика частоты встречаемости варианта иммунофенотипа при
В-лимфобластном лейкозе/лимфоме (В-ОЛЛ) и Т-лимфобластном лейкозе/лимфоме (Т-ОЛЛ) в Кыргызской Республике (Киргизии) (по классификации Европейской группы иммунологической характеристики острых лейкозов) [4]
|
В-ОЛЛ п=58 |
Т-ОЛЛ п=12 |
||
|
pro В-ОЛЛ(ВI) |
5% |
pro Т-ОЛЛ(ТI) |
0% |
|
В-common (BII)* |
91% |
pre Т-ОЛЛ(ТII)* |
67% |
|
pre В-ОЛЛ(ВIII) |
0% |
кортикальный (ТIII) |
25% |
|
В-ОЛЛ(BIV) |
4% |
T-ОЛЛ(ТIV) |
8% |
Примечание:*p< 0,001.
Как видно из представленной таблицы, в Кыргызской Республике (Киргизии) по частоте распространенности выявляется В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ): про В-ОЛЛ (ВI) в 5% случаев, В-common (BII) в 91% случаев, прe В-ОЛЛ (ВIII) в 0% случаев, В-ОЛЛ (BIV) в 4% случаев и Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ): прo Т-ОЛЛ (ТI) в 0% случаев, пре Т-ОЛЛ (ТII) в 67% случаев, кортикальный (ТIII) в 25% случаев, T-ОЛЛ (ТIV) в 8% случаев.
По значимости отличий между встречаемостью В-лимфобластного лейкоза/лимфомы (В-ОЛЛ): В-common (BII), прe В-ОЛЛ (ВIII) и Т-лимфобластного лейкоза/лимфомы (Т-ОЛЛ): прo Т-ОЛЛ (ТI), пре Т-ОЛЛ (ТII), и имеются статистически высоко достоверные различия, где р< 0,001.
Рис. 1. Частота распространенности в Кыргызской Республике (Киргизии) среди больных детей острых лимфобластных лейкозов:
В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ/ лимфома), Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/лимфома), *р<0,0001
Как видно из представленного рисунка 1, при сравнительной характеристике частоты распространенности острых лимфобластных лейкозов в Кыргызской Республике (Киргизии) среди больных детей в 83% случаев выявляется В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ/лимфома) и в 17% случаев Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/лимфома).
По значимости отличий в Кыргызской Республике распространен В-лимфобластный лейкоз/лимфома по сравнению с контрольной группой (Т-лимфобластным лейкозом/ лимфомой) и имеет статистически достоверные различия, где *р<0,0001.
Рис. 2. Распространенность в Кыргызской Республике (Киргизии) острых лимфобластных лейкозов (В-лимфобластный лейкоз/лимфома и Т-лимфобластный лейкоз/лимфома) среди больных детей женского и мужского пола
По данным из представленного рисунка 2, в Кыргызской Республике (Киргизии) острый В-лимфобластный лейкоз/лимфома выявляется несколько чаще и среди женского и мужского пола по сравнению с острым Т-лимфобластным лейкозом/лимфомой. По распространенности выявляется среди детей женского пола в 12% случаев Т-лимфобластный лейкоз/лимфома и в 88% случаев В-лимфобластный лейкоз/лимфома, а у детей мужского пола Т-лимфобластный лейкоз/лимфома в 20% случаев и В-лимфобластный лейкоз/лимфома в 80% случаев.
По значимости отличий чаще выявляется у больных детей женского и мужского пола острый В-лимфобластный лейкоз/лимфома по сравнению с контрольной группой (острым Т-лимфобластным лейкозом/лимфомой) и имеет статистически достоверные различия, где р<0,0001.
Рис. 3. Сравнительная характеристика частоты распространенности
В-лимфобластного лейкоза/лимфомы (В-ОЛЛ/лимфома) и Т-лимфобластного лейкоза/лимфомы (Т-ОЛЛ/ лимфома) среди детей кыргызской национальности и жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии), *р<0,005
Как видно из представленного рисунка 3, выявляется Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/ лимфома) среди больных детей кыргызской национальности в 11% случаев и В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ/лимфома) в 63% случаев, а среди больных детей жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии) выявляется в 6% случаев Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/лимфома) и В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ/лимфома) в 20% случаев.
По значимости отличий острый В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ/лимфома) и острый Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/лимфома) чаще преобладают среди больных детей кыргызской национальности по сравнению с контрольной группой и имеют статистически достоверные различия, где р<0,005.
Рис. 4. Частота распространенности острых лимфобластных лейкозов среди больных детей женского и мужского пола кыргызской национальности и жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии)
По результатам из представленного рисунка 4, среди больных детей кыргызской национальности женского пола выявляется В-ОЛЛ/лимфома в 33% случаев и среди мужского пола в 67% случаев и Т-ОЛЛ/лимфома среди женского пола в 13% случаев и среди мужского пола в 87% случаев.
В сравнении: у больных детей женского пола жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии) выявляется В-ОЛЛ/лимфома в 6% случаев и среди мужского пола в 94% случаев и Т-ОЛЛ/лимфома среди женского пола в 12% случаев и среди мужского пола в 88% случаев.
По значимости отличий В-лимфобластный лейкоз/лимфома (В-ОЛЛ/лимфома) и Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/лимфома) выявляются чаще среди больных детей мужского пола кыргызской национальности и жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии) по сравнению с контрольной группой (больных детей женского пола кыргызской национальности и жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии), и имеются статистически достоверные различия р< 0,0001.
Заключение
Таким образом, при острых лимфобластных лейкозах (В-лимфобластный лейкоз/лимфома и Т-лимфобластный лейкоз/лимфома) основная роль иммунофенотипирования с помощью метода проточной цитофлуориметрии - выявить вариант Т- и В-линейной направленности опухолевых (бластных) клеток.
По данным наших результатов, в Кыргызской Республике (Киргизии) среди больных детей из острых лимфобластных лейкозов чаще выявляется В-лимфобластный лейкоз/лимфома по сравнению с Т-лимфобластным лейкозом/лимфомой. Выявляется В-лимфобластный лейкоз/ лимфома (В-ОЛЛ/лимфома) и Т-лимфобластный лейкоз/лимфома (Т-ОЛЛ/лимфома) среди детей и женского и мужского пола. По частоте распространенности В-ОЛЛ/лимфома и Т-ОЛЛ/лимфома выявляется реже среди больных детей женского пола кыргызской национальности, так и среди больных детей жителей русскоязычного населения Кыргызской Республики (Киргизии).
Для выявления особенностей течения и частоты распространенности острых лейкозов у детей в Кыргызской Республике (Киргизии) необходимо дальнейшее исследование, что даст возможность для своевременной постановки диагноза и варианта линейности, подбора терапии и целенаправленного лечения при планировании неродственной, близкородственной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток.
На сегодняшний день пересадка гемопоэтических стволовых клеток при острый лимфобластных лейкозах дает наилучшие результаты, в частности у детей.
Выводы
1. Необходимо исследовать костный мозг у больных детей при острых лимфобластных лейкозах с помощью метода проточной цитофлуометрии.
2. Скрининговое исследование опухолевых (бластных) клеток для определения линейной направленности.
3. Выявить иммунологический вариант при остром лимфобластном лейкозе.
4. Иммунофенотипирование с помощью метода проточной цитофлуориметрии дает возможность своевременно выявить характерный иммунофенотип опухолевой (бластной) клетки и подобрать эффективную программу химиотерапии.
Библиографическая ссылка
Баратова Д.А., Маматысаева У.А. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЯ И ЧАСТОТА РАСПРОСТРАНЕННОСТИ СРЕДИ БОЛЬНЫХ ДЕТЕЙ ОСТРОГО ЛИМФОБЛАСТНОГО ЛЕЙКОЗА // Современные проблемы науки и образования. – 2019. – № 3. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=28948 (дата обращения: 18.04.2024).