Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы

Коршукова О.А., Мотавкина Н.С.

У 110 женщин постменопаузального периода исследована состояния готовности к реакции апоптоза на основе учета клеток – участников CD16 (NK), CD25 – ИЛ2, CD95 (FAS-апоптоз) и основных цитокинов ИЛ-1β, ИФНγ, ФНОα в зависимости от временных параметров (возраста и продолжительности ПМП), наличия соматической и инфекционной патологии установлены колебания клеток в диапазоне нормы и преобладания многократного превышения уровня цитокинов, особенно выраженное у ФНОα.

Статья в формате PDF

116 KB

Апоптоз, по образному выражению А.Н. Маянского с соавт. (1995) является началом будущего, то есть прогнозирует предстоящие события в здоровье человека и, прежде всего, в его иммунной системе.

Апоптоз представляет собой весьма сложную комплексную систему, в процессе функциональной реализации которой, принимают участие многие клеточные факторы и механизмы (Ярилин А.А., 1997). Среди них наиболее важное значение имеют разные кластерные варианты лимфоцитов с их распознающими механизмами (NK или CD₁₆), активационным назначением (CD₂₅ и CD₈) и сигнальной системы (CD₉₅-FAS). Вспомогательную, а в ряде случаев основную роль играют некоторые цитокины ИЛ-1, ИЛ-2, ФНОα, ИНФγ.

Инициирующую функцию за счет распознания клеток-мишеней и их подготовки к апоптотическому финалу с помощью секретируемых ими порфиринов и энзимов с последующей активацией ферментов типа каспаз выполняют естественные или натуральные киллеры (NK или CD₁₆). Сигнальная функция на всем протяжении апоптотической реакции и, особенно, на ее заключительном этапе принадлежит CD95 (FAS-апоптоз) лимфоцитам.

Совокупность перечисленных клеток и цитокинов ответственна за рост и дифференцировку клеток организма, распознавание и уничтожение трансформированных и отживших клеток. Иными словами, апоптоз-одна из важнейших иммунологических реакций, ведущих к изъятию ненужных клеточных элементов и обновлению тканевого ресурса. Состояние последнего для стареющего увядающего организма женщин, в котором одна за другой выходят из строя различные реактивные системы (гормональная, иммунная и др.) имеет важное не только медицинское, но и социально-экономическое значение, поскольку женщина ПМП продолжает трудиться и на производстве, и в быту, а в силу большей на 10-15 лет, продолжительности жизни по сравнению с мужчинами является одной из главных состовляющих производственных трудовых ресурсов.

Цель сообщения заключается в анализе и оценке состояния участников апоптозного клеточного и цитокинового комплекса у женщин постменопаузального возраста с климактерическим синдромом.

Материалы и методы: Под нашим наблюдением находилось 110 женщин в возрасте от 40 до 65 лет, страдающих климактерическим синдромом (КС). У 51 из них постменопаузальный период продолжался 1-5 лет, у 33-6-10 лет, особую группу составили 26 женщин с хирургической менопаузой. Контрольная группа состояла из 20 здоровых женщин от 38 до 50 лет, без КС.

В клиническом аспекте у больных чаще отмечалась гипертензия и гипертоническая болезнь (29%), несколько реже- (20%) нейро-циркуляторная дистония (НЦД), еще реже хронический панкреатит (15%), язвенная болезнь желудка (11:%) и ИБС (11%), несколько чаще (13%) стенокардия. Сахарный диабет выявлен у 6% обследованных. В 38,8% у женщин с КС обнаружены урогенитальные инфекции группы ИППП.

Тяжесть клинического течения КС была неоднозначной: в 48% она была тяжелой, в 36% - средней тяжести, в 16% - легкой.

В качестве материала для исследования служила кровь женщин постменопаузального возраста. Из полученного отцентрифугированного субстрата готовили мазки в 2х экземплярах и после фиксации одни из них окрашивали по Романовскому - Гимза, второй - обрабатывали флюоресцированной моноклональной иммунной сывороткой к CD- рецепторам лимфоцитов производства ООО «Препарат» (Н. Новгород), после чего подвергали простому микроскопическому и иммуно-флюоресцентному анализу. Общее количество лимфоцитов определяли традиционно, цитокины в сыворотках крови - методом твердофазного ИФА с набором диагностических систем «Веста» производства СПб и Новосибирска.

В материале (лимфоциты, сыворотки крови) определяли клетки, причастные к апоптозу - CD₁₆ (NK), CD₂₅, CD₉₅ (FAS апоптоз), CD₈. Из цитокинов были избраны ИЛ-1β, ИНФ-γ, ФНОα. При этом все данные анализировались с учетом возраста, продолжительности ПМП, тяжести КС, клинической формы заболеваний, при инфекционных дополнительно-вид возбудителей болезни. Этиология последних устанавливалась в специализированных лабораториях ПКДЦ и «Асклепий» методами ИФА и ПЦР.

Результаты и их обсуждение

Проводимый анализ первоначально включал временные параметры - возраст обследуемых и продолжительность климактерического синдрома. Особое положение занимала хирургическая менопауза, которая устанавливалась оперативно и полностью исключала адаптивные периоды. Результаты исследования влияния фактора времени на клеточное обеспечение апоптоза и общая кластерная характеристика лимфоцитов, участвующих в нем либо опосредовано как источник цитокинов, либо в виде исполнителей, представленных в табл. 1

Так, уровень инициаторов апоптотических реакций-клеток CD₁₆ (NK) были во все возрастные периоды ближе к нижнему пределу нормы за исключением самого старшего возраста, в 60 и более лет, а так же в 50-55 лет. Этот контингент имел их в предельно низкой концентрации, правда, не выходящей за ее границу. Однако, в промежуток 55-60 лет этот показатель был довольно высоким, но верхней границы нормы не достигал.

Уровни клеток CD_25, активированные ИЛ-2, в возрасте 45-60 лет колебались в пределах нормы, а в самой старшей группе резко снизились, (9,8±4,0%), даже не достиг нижней границы нормы.

Наибольшее благополучие было отмечено в концентрации CD₉₅ (FAS-апоптоз). Она ни разу не опустилась ниже нормы, а у лиц 55-60 лет лишь несколько отставала от нее.

Подобная направленность в изменении уровня участников апоптоза, реализующих апоптозную реакцию организма, но с меньшей выраженностью обнаружены и при разной продолжительности ПМП. Однако этого следовало ожидать, так как временные параметры сдвигаются синхронно.

Более существенные сдвиги отмечены в зависимости от формы патологии - соматической и инфекционной. Это отражено в табл. 2.

Таблица 1. Клеточный спектр обеспечения общего иммунитета лимфоцитами - участниками апоптоза у женщин в ПМП с учетом временных параметров - возраста и длительности КС

Разница с нормой: *-р<0,05;**-р<0,01, ***р<0,05

Таблица 2. Клеточный спектр общего иммунитета и участников апоптоза у женщин в ПМП с разными видами патологии.

Разница с нормой: *-р<0,05;**-р<0,01

При соматической патологии в отношении CD₄-хелперов, уровень CD₁₆ лимфоцитов был в основном ближе к нижней границе нормы, а при нейро-циркуляторной дистонии - ниже ее. То же выявлено по отношению к уровню CD₂₅, но здесь добавился низкий уровень клеток этого типа при язвенной болезни. В отношении клеток CD₉₅ выявлено сравнительное благополучие, за исключением группы с НЦД и чуть лучше-с язвенной болезнью желудка.

При инфекционной патологии, передающийся половым путем, во всех случаях показатели содержания участников апоптоза за пределы нормы не выходили. Однако, уровень CD₁₆ предпочитал более высокое содержание при кандидозе и герпесе, CD₂₅ - только при герпесе и предельно низкий при гарднерелезе, CD₉₅ - высокий при герпесе, кандидозе, гарднерелезе.

Таким образом, обеспечение клеточным составов главных участников апоптоза было у обследованных женщин весьма благоприятным, что вселяет надежду и на своевременность очищения их организма от трансформированных и нежизнеспособных клеточных отходов, и на обновление клеточно-тканевого состава с его хорошей дифференцировкой.

Вместе с тем, как уже говорилось, апоптотический эффект зависит не только от самих исполнителей, но и от медиаторов межклеточного взаимодействия, в частности, цитокинов. В их числе нами были изучены ИЛ-1β, ИФНγ, ФНОα. Результаты исследования отражены в табл. 3.

Таблица 3. Уровень цитокинов-участников апоптоза у женщин разного возраста в ПМП с учетом временных параметров - возраста и длительности КС.

Различия с нормой: *р<0,05, **р<0,01

Анализ проведенных наблюдений с учетом временных параметров (табл. 3) показал значительное превышение уровня нормы цитокина ИЛ- 1β, причем, как в разных возрастных группах, так и при неодинаковой продолжительности ПМП. Исключением явилось самая старшая, более 61 года, где их уровень составил всего 9,15±3,1 нг/мл против 11,67±1,9 нг/мл в норме, и больные с длительностью КС >10 лет (всего 13,8±5,4 нг/мг).

Интерферон ИФНγ по своему содержанию мало отличался от средней возрастной величины во все периоды КС, кроме начального (45-49 лет) и самого старшего (61 год и старше), когда оно было наибольшим при продолжительности более 10 лет (44,4±5,5 нг/мл против 32,64±3,51 нг/мл).

Наиболее выраженными оказались преобразования ФНОα. Во всех обследованных группах этот цитокин-фактор некроза опухолей - превышал норму в 6-7 раз.

Таблица 4. Панорамный уровень цитокинов у женщин разного возраста в ПМП с разными видами патологии

Особенности концентрации цитокиноа при соматической и инфекционной патологии у женщин в ПМП повторили тенденции, представленные выше. Их уровни были намного, но не однозначно выше нормы.

Так, уровень ИЛ-1β при разных инфекциях оказался больше нормы, зарегистрированной у здоровых от 2 до 3 раз, при соматических болезнях - до 4-5 раз (соответственно при сахарном диабете и узловом зобе).

Уровень ИФНγ был также больше нормы, но превышал ее в меньшей степени.

Особенно высоким оказался уровень ФНОα. Он был выше от 2 до 6 раз.

Таким образом, из отмеченных закономерностей следует подчеркнуть наибольшее участие в апоптозе последнего вида цитокина - фактора некроза опухолей, ФНОα. Второе место следует отдать ИЛ-1β и третье - ИФНγ. Но при этом следует отметить, что при некоторых нозоформах болезней эти закономерности меняются. Например, при общем повышенном уровне ИЛ-1β у больных ИБС имело место заметное понижение этого цитокина. Очевидно, в определенной степени уровень цитокинов зависит от общей реактивности организма и от особенностей патогенеза их патологии.

Заключение

Для постменопаузального периода, сопровождающего климактерическим синдром, весьма характерна хорошая подготовленность организма женщин к удалению нежизнеспособных клеток, так и их обновлению, замене, дифференцировке в процессе апоптотической реакции. Последняя хорошо обеспечена клетками-участниками CD₁₆ (NK), CD₂₅ - ИЛ2, CD₉₅ и необходимыми цитокинами ИЛ-1β, ИФНγ, ФНОα.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Маянский А.Н. Апоптоз. Начало будущего. // А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.А. Абаджидн, М.И. Заславская/ Ж. микробиология, 1997, №2, с.88-94.
2. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунном процессе.// А.А. Ярилин./ Ж. иммунология, 1996, №6, с. 10-20.
3. Ярилин А.А. Основы иммунологии. - Москва, «Медицина», с. 308-315.

Библиографическая ссылка