Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,791

ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЛИПОФИЛЬНОЙ ФРАКЦИИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ СЕМЕЙСТВА ASTERACEAE

Северин А.П. 1 Яцюк В.Я. 1 Сипливый Г.В. 1 Сипливая Л.Е. 1 Ботов А.Ю. 1
1 ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Курск
Проведен хромато-масс-спектрометрический анализ сырья некоторых видов семейства Asteraceae: травы мелколепестника канадского, травы и шрота полыни горькой. Сырье изучаемых видов растений перед анализом обрабатывалось диэтиловым эфиром (мацерация) для извлечения липофильных соединений (сухие экстракты). Далее проводили кислый метанолиз, обрабатывая сухие экстракты изучаемых объектов раствором кислоты соляной в метаноле. Образовавшиеся в результате метанолиза липидные компоненты экстрагировали гексаном. Полученные экстракты силилировали, для ввода в инжектор газового хроматографа. Анализ дает состав суммарных жирных кислот, стеринов, спиртов, тяжелых терпеноидов. Примеси сахаров, аминокислот и части артефактов исключаются. В результате проведенных исследований в составе липофильной фракции травы мелколепестника канадского установлено наличие не менее 52 компонентов, в траве и шроте полыни горькой 62 и 53 компонента соответственно.
полынь горькая
мелколепестник канадский
хромато-масс-спепктрометрия
липофильная фракция
1. Ботов А.Ю. Перспективы использования мелколепестника канадского (Erigeron canadensis L.) как сырья для получения фитопрепаратов / А.Ю. Ботов, В.Я. Яцюк, Л.Е. Сипливая и др. // Науч. ведом. Белгородского гос. ун-та. – 2011. – № 4. – Вып. 13/2. – С. 129–134.
2. Кашутина М.В. Силилирование органических соединений / М.В. Кашутина, С.Л. Иоффе, В.А. Тартаковский // Успехи химии. – 1975. – Т. 44. – № 9 – С. 1620–1648.
3. Сафонова И.А. Изучение фенольных соединений листьев пузыреплодника калинолистного (Physocarpus opulifolius (L.) Maxim) методом ВЭЖХ / И.А. Сафонова, В.Я. Яцюк, А.В. Кузьминова // Курский науч.-практ. вестник «Человек и его здоровье». – 2009. – № 4. – С. 127–132.
4. Северин А.П. Перспективы использования полыни обыкновенной для получения фитопрепаратов / А.П. Северин, Л.Е. Сипливая, В.Я. Яцюк // Современные наукоемкие технологии. – 2010. – № 2. – С. 113–114.
5. Северин А.П. Растения рода полынь – источник получения полиенов / А.П. Северин, Л.Е. Сипливая, В.Я. Яцюк // Материалы 4-й Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование – 2010». – Воронеж, 2010. – С. 338–339.
6. Хмельницкий Р.А., Бродский Е.С. Хромато-масс-спектрометрия. – М. : Химия, 1984. – С. 150–178.
Введение

В настоящее время в медицинской практике важное место занимают растительные лекарственные средства в связи с тем, что они обладают широким спектром биологической активности в сочетании с низкой токсичностью, что позволяет использовать их для профилактики и лечения различных заболеваний. Поиск новых источников сырья для получения отечественных фитопрепаратов является актуальной задачей. Помимо внедрения новых, неприменяемых в официнальной медицине растений, необходимо ресурсосберегающее использование отходов промышленной переработки уже разрешенного к применению лекарственного растительного сырья, что требует совершенствования технологических схем производства как существующих, так и вновь разрабатываемых лекарственных препаратов [3].

Ранее нами были проведены исследования липофильной фракции мелколепестника канадского и полыни горькой. Качественный состав пигментов в сырье изучаемых видов растений определяли с помощью специфических химических тестов и восходящей тонкослойной хроматографии, для количественного определения пигментов использовали спектрофотометрическую методику, позволяющую определять каротиноиды и хлорофиллы при их совместном присутствии [1; 4; 5]. 

Целью данных исследований явилось продолжение изучения веществ первичного биосинтеза, а именно химического состава липофильной фракции некоторых растений семейства Asteraceae.

Материалы и методы исследования

В качестве материала для исследования использовали надземные органы мелколепестника канадского и полыни горькой, собранные в фазу вегетации: «конец цветения - начало плодоношения» на территории Курской и Белгородской областей в 2010-2011 гг., а также шрот полыни горькой, оставшийся после получения настойки.

Определение химического состава липофильной фракции проводили с помощью хромато-масс-спектрометрического метода анализа. Для этого получали извлечения методом мацерации в течение 24 часов (экстрагент - диэтиловый эфир, гидромодуль - 1:10); полученные извлечения фильтровали, упаривали под вакуумом досуха. Сухие экстракты (3-5 мг - точные навески) обрабатывали 0,4 мл 1 М раствора соляной кислоты в метаноле при 80 °С в течение 180 минут (кислый метанолиз). Образовавшиеся при метанолизе метиловые эфиры жирных кислот и другие липидные компоненты экстрагировали гексаном. Гексан упаривали, а сухой остаток силилировали в 20 мкл БСТФА (бис-(триметилсилил)трифторацетамид) в течение 15 минут при 80 °С и разбавляли гексаном до 100 мкл. Для анализа 1 мкл смеси вводили в инжектор системы хромато-масс-спектрометра, работающего в автоматическом режиме [2; 6].

Хромато-масс-спектрометрический анализ проводили на хромато-масс-спектрометре AT-5850/5973 Agillent Technologies (США). Масс-спектрометр квадрупольный с диапазоном масс 2-950 а.е.м. имеет разрешающую способность 0,5 а.е.м. во всем рабочем диапазоне. Ионизация электронами 70 эВ. Чувствительность прибора составляет 0,01 нг по метилстеарату. Для хроматографического разделения пробы использовали капиллярную колонку из плавленого кварца длиной 25 м и внутренним диаметром 0,25 мм. Неподвижная фаза НР-5ms Хьюлетт-Паккард с толщиной слоя 0,2 мкм. Хроматографирование проводили в режиме программирования температуры от 135 до 320 °C со скоростью 7 град./мин. Температура инжектора и интерфейса 280 °C. Обработку данных проводили с помощью штатных программ прибора. Вещества в хроматографических пиках идентифицировали с помощью библиотечных программ с базой данных масс-спектров NIST.

Результаты исследования и их обсуждение

В результате проведенного анализа в составе липофильной фракции травы мелколепестника канадского установлено наличие не менее 52 компонентов, в траве и шроте полыни горькой 62 и 53 соединения соответственно: суммарных жирных кислот, стеринов, спиртов, тяжелых терпеноидов (таблицы 1, 2).         

Таблица 1 - Результаты исследования состава липофильной фракции травы мелколепестника канадского методом хромато-масс-спектрометрии

Номер пика

Время удерживания, мин

Вещество (кислота)

Состав от суммы, %

1

9,475

миристиновая

2,260

2

9,489

бензол-1-[1,5-диметил-4-гексенил]-4-метил

2,090

3

10,906

пентадекановая

1,550

4

11,144

тетраметил-гексадеценол

1,960

5

11,252

тетраметил-гексадеценол

1,400

6

11,483

тетраметил-гексадеценол

1,270

7

11,557

терпен неизвестный

1,270

8

11,747

тетраметил-гексадеценол

1,610

9

12,059

гексадеценовая

1,780

10

12,344

гексадекановая

7,720

11

12,690

изо-капроновый ангидрид

1,200

12

13,029

капроновый ангидрид

1,760

13

13,327

антеизо-гептадекановая

0,290

14

13,409

гептадеценовая

0,270

15

13,551

терпенол неизвестный

0,420

16

13,687

гептадекановая

1,230

17

13,890

терпенол неизвестный

1,650

18

14,284

терпенол неизвестный

2,270

19

14,670

линолевая

8,170

20

14,738

олеиновая

4,100

21

15,023

стеариновая

4,120

22

15,742

6,10,14-триметил-пентадекан-2-ол

0,870

23

16,264

β-линоленовая кислота

1,060

24

17,031

октадекатриеновая, конъюгированная

0,670

25

17,078

октадекатриеновая, конъюгированная

0,860

26

17,254

октадекатриеновая, конъюгированная

0,530

27

17,309

октадекатриеновая, конъюгированная

0,370

28

17,533

эйкозановая кислота

1,650

29

18,360

нонадиенил-окси-ноненовая кислота

0,460

30

18,719

генэйкозановая кислота

0,690

31

19,520

н-гексакозан

0,800

32

19,872

докозановая кислота

2,020

33

20,971

трикозановая кислота

1,140

34

21,704

н-октакозан

0,870

35

21,907

2-гидрокси-докозановая кислота

1,420

36

22,056

тетракозановая кислота

2,070

37

22,918

2-гидрокси-трикозановая кислота

1,060

38

23,074

пентакозановая кислота

0,400

39

23,135

сквален

0,620

40

23,759

н-триаконтан

2,030

41

23,908

2-гидрокси-тетракозановая кислота

2,630

42

24,077

гексакозановая кислота

0,670

43

24,695

н-гентриаконтан

0,640

44

24,844

2-гидрокси-пентакозановая кислота

0,420

45

25,664

н-дотриаконтан

2,790

46

25,773

2-гидрокси-гексакозановая кислота

0,320

47

25,976

октакозановая кислота

0,330

48

26,322

моноглицерид

2,570

49

28,045

стигмастерол

6,780

50

28,771

стигмастерол (изомер)

6,360

51

29,035

амирин

3,330

52

29,510

амирин (изомер)

5,180

 

 

Сумма

100

Таблица 2 - Результаты исследования состава липофильной фракции травы и шрота полыни горькой методом хромато-масс-спектрометрии

Номер пика

Время удерживания, мин

Вещество (кислота)

Состав от суммы, %

Шрот

Трава

1

6,688

лауриновая

0,488

0,556

2

6,993

азелаиновая

-

0,122

3

7,169

элемицин (триметоксиаллилбензол)

-

0,427

4

9,475

миристиновая

1,209

1,834

5

10,384

изо-пентадекановая

0,062

0,121

6

10,520

антеизо-пентадекановая

0,220

0,232

7

10,906

пентадекановая

0,497

0,379

8

11,218

гексагидрофарнезол-ацетон

0,517

0,727

9

11,802

изо-гексадекановая

0,286

0,217

10

12,053

гексадеценовая кислота

0,722

1,480

11

12,337

гексадекановая

6,874

8,611

12

12,459

3-гидрокси-миристиновая

0,129

0,156

13

13,314

изо-гептадекановая

0,397

0,146

14

13,395

антеизо-гептадекановая

0,345

0,363

15

13,531

циклопропан-гептадекановая

0,243

0,191

16

13,687

гептадекановая

0,642

0,709

17

14,670

линолевая

6,943

12,326

18

14,738

олеиновая

5,980

5,846

19

15,023

стеариновая

2,664

3,931

20

15,091

2-гидрокси-пальмитиновая

0,074

0,103

21

15,396

октадеканол

0,289

0,196

22

16,922

октадекатриеновая, конъюгированная

-

0,169

23

17,031

октадекатриеновая, конъюгированная

-

0,277

24

17,078

октадекатриеновая, конъюгированная

-

0,202

25

17,166

н-триэйкозан

0,697

0,854

26

17,254

эйкозеновая кислота

-

0,137

27

17,533

эйкозановая кислота

1,559

1,944

28

17,824

эйкозанол

0,823

0,783

29

18,360

н-пентакозан

0,407

0,385

30

18,719

генэйкозановая кислота

0,357

0,256

31

18,991

генэйкозанол

-

0,145

32

19,520

н-гексакозан

2,225

3,394

33

19,764

3-гидрокси-эйкозановая кислота

-

0,143

34

19,872

докозановая кислота

2,706

2,320

35

20,096

докозанол

2,968

1,713

36

20,619

н-гептакозан

0,458

0,693

37

20,971

трикозановая кислота

0,892

0,652

38

21,161

трикозанол

0,480

0,300

39

21,704

н-октакозан

3,524

4,324

40

21,826

тетракозеновая кислота

-

0,191

41

21,907

2-гидрокси-докозановая кислота

1,169

1,056

42

22,050

тетракозановая кислота

4,103

2,650

43

22,212

тетракозанол

4,864

2,097

44

22,728

н-нонакозан

0,649

0,652

45

22,918

2-гидрокси-трикозановая кислота

0,641

0,588

46

23,074

пентакозановая кислота

0,505

0,428

47

23,203

пентакозанол

0,524

0,317

48

23,759

н-триаконтан

8,235

6,710

49

23,908

2-гидрокси-тетракозановая кислота

3,186

1,941

50

24,077

гексакозановая кислота

1,881

1,884

51

24,179

гексакозанол

1,497

0,773

52

24,695

н-гентриаконтан

1,018

0,612

53

24,844

2-гидрокси-пентакозановая кислота

0,424

0,428

54

25,041

гептакозановая кислота

0,272

0,410

55

25,664

н-дотриаконтан

7,974

4,350

56

25,773

2-гидрокси-гексакозановая кислота

0,749

0,386

57

25,976

октакозановая кислота

1,535

1,837

58

26,316

октакозанол

0,425

0,812

59

27,665

эргостенол

0,972

0,640

60

27,991

стигмастерол

2,827

3,219

61

28,689

ситостерол

8,875

8,315

62

29,463

ланостадиенол

1,998

2,340

 

 

Сумма

100

100

Заключение

В результате проведенных исследований установлено, что химический состав липофильной фракции исследуемых объектов представлен широким спектром биологически активных соединений, определяющих актуальность дальнейшего изучения их фармакологической активности.

Рецензенты

Шорманов В.К., д.фарм.н., профессор кафедры фармацевтической, токсикологической и аналитической химии ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет», г. Курск.

Новиков О.О., д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической химии и фармакогнозии, ГОУ ВПО «Белгородский государственный университет», г. Белгород.


Библиографическая ссылка

Северин А.П., Яцюк В.Я., Сипливый Г.В., Сипливая Л.Е., Ботов А.Ю. ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЛИПОФИЛЬНОЙ ФРАКЦИИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ СЕМЕЙСТВА ASTERACEAE // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 2.;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=5807 (дата обращения: 15.12.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074