Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Неродо Г.А. 1 Златник Е.Ю. 1 Закора Г.И. 1 Неродо Е.А. 1

---

1 ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздравсоцразвития России

Проведено изучение состояния иммунной системы у 191 больной раком вульвы I–IV стадии заболевания в возрасте от 31 до 80 лет. Проводили оценку Т- и В-клеточного звеньев иммунной системы, состояние NK-клеток, изучали показатели макрофагальной трансформации моноцитов и уровень ЦИК. Анализ состояния иммунной системы у больных с I стадией заболевания позволил установить, что основные показатели находились в пределах колебаний, характерных для здоровых женщин, однако общее количество Т-клеток (CD2+) снижено в два раза за счет достоверного уменьшения числа лимфоцитов в периферической крови. У больных со II стадией пролиферативная активность Т-клеток на ФГА достоверно снижалась как в процентах, так и в абсолютных цифрах. Для больных с III стадией выявлено снижение количества Т- и В-лимфоцитов, способных трансформироваться под действием митогенов на 30 и 20% соответственно. В IV-й стадии количество функционально активных Т- и В-лимфоцитов продолжает достоверно снижаться; уровень ЦИК в крови больных начиная с I стадии достоверно увеличивается и превышает в IV стадии уровень здоровых женщин в 2 раза. Обобщенные результаты представленных данных свидетельствуют, что по мере распространенности процесса нарастает количество статистически значимо измененных по сравнению с нормой показателей, которое достигает максимума у больных с IV стадией.

Статья в формате PDF

106 KB

рак вульвы I–IV стадий

состояние иммунной системы

количественный и качественный иммунодефицит

1. Бережная Н.М., Чехун В.Ф. Иммунология злокачественного роста. – Киев : Наука Думка, 2005. – 792 с.

2. Воробьева Л.И., Галахин В.А., Гриневич и соавт. Влияние противоопухолевой терапии на факторы клеточного и гуморального иммунитета у больных опухолями вульвы // Экспериментальная онкология. – 1992. – Т. 14. – № 4. – С. 70-73.

3. Воробьева Л.И. Шляхи пiдвищения еффективностi лiкувания злоякiсних новоутаорень вульви : автореф. дисс. … д-ра мед. наук. – Киев, 1993.

4. Демченко Т.А., Джагинян А.И. Метод количественной оценки макрофагов в клинической иммунологии // Иммунология. – 1981. – № 4. – С. 83-85.

5. Лакин Г.Ф. Биометрия. – М., Медицина, 1990. – 352 с.

6. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. – М., 1987. – 292 с.

7. Фримель Х. Иммунологические методы. – М., 1987. – 456 с.

8. Хаитов Р.М. и соавт. Иммунология. Медицина. – М., 2000. – 432 с.

9. Jondal M., Holm G., Wigzell H. Surface markers of human T- and B-lymphocytes. A large population of lymphocytes forming nonimmune rosettes with sheep red cells // J. exp. Med. – 1972. – V. 136. – P. 207-222.

10. Lindeque B.G., Nel A.E., du Toil G.P. Immune deficiency and invasive carcinoma of the vulva in a young woman: A case report // Gynecological Oncology. – 1987. – V. 26. – № 1. – Р. 112-118.

По мере прогрессирования злокачественного процесса наступает субкомпенсация и, наконец, декомпенсация коррелятивных связей, отдельных звеньев иммунной системы. Изучение иммунного статуса, отражающего весьма сложные и многообразные взаимоотношения организма и опухоли у больных с онкологической патологией приобретает все большее значение. По имеющимся в литературе данным состояние иммунной системы у больных раком вульвы к настоящему времени мало изучено. Имеется публикация B.L. Lindegue, A.E. Nel, L.P. Joit 1987 года, где авторы приводят описание наблюдения инвазивного рака вульвы у молодой женщины с наличием иммунодефицита.

Преклонный возраст больных раком вульвы, выраженная запущенность при первичном обращении, агрессивное клиническое течение заболевания, наличие целого ряда некомпенсированных сопутствующих заболеваний, трудность в выборе адекватного лечения, неудовлетворительные результаты лечения, недостаточность иммунитета при старении [3], все это вместе представляет определенный интерес для изучения иммунной системы у больных раком вульвы.

В 1992 г. Воробьевой Л.И. с соавт. опубликована работа о влиянии противоопухолевой терапии на факторы клеточного и гуморального иммунитета у больных злокачественными опухолями вульвы. Ими представлены некоторые показатели иммунной системы у 72 больных опухолями вульвы и отмечено, что у больных раком вульвы происходит нарушение состояния иммунной системы, которое характеризуется снижением относительного количества Т- и В-лимфоцитов, дисиммуноглобулинемией, повышением концентрации иммунных комплексов, появлением в крови факторов, блокирующих эффекторные функции лимфоцитов.

Материал и методы. Изучение состояния иммунной системы нами было проведено у 191 больной раком вульвы в возрасте от 31 до 80 лет. По стадиям заболевания больные распределились следующим образом: I стадия - 38; II - 52; III - 60; IV стадия - 41 больная. Контролем служили результаты обследования 30 практически здоровых женщин сравнимого возраста.

Для оценки состояния Т- и В-клеточного звеньев иммунной системы проводили выделение лимфоцитов из периферической крови в градиенте фиккол-верографина (плотность 1,077-1,078) с последующим трехкратным осаждением средой 199. Жизнеспособность лимфоцитов оценивали по проценту неокрашенных клеток после добавления к взвеси 0,2% раствора трипанового синего. Количество погибших клеток не превышало 2-3%.

Состояние Т-клеток изучали в ряде количественных и функциональных тестов. Общее содержание Т-лимфоцитов определяли в реакции спонтанного розеткообразования (РСРО) с эритроцитами барана [9]. Функциональную активность Т-лимфоцитов оценивали в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) после 48-72-часового культивирования при 37 °С в приcутствии 5% CO₂ в полной культуральной среде, содержащей среду RPMI-1640 с 10%-ной инактивированной эмбриональной телячьей сывороткой («Flow Lab.»), 5х10^-5М 2-меркаптоэтанола («Serva»), 2 мМ L-глютамина, 10 мМ буфера HEPES («Flow Lab.»), 50 мкг/мл гентамицина, с добавлением Т-митогена ФГА в дозе 5 мкг/мл [7]. Параллельно оценивали спонтанную бласттрансформацию, для чего вместо митогена в пробу добавляли равный объем культуральной среды.

Состояние В-клеточного звена иммунной системы определяли по содержанию В-лимфоцитов в крови в РСРО с эритроцитами мыши. Функциональную активность В-клеток изучали в РБТЛ с ЛПС, аналогом которого является пирогенал, в дозе 50 ЕД/мл при тех же условиях, что и РБТЛ с Т-клеточным митогеном.

Состояние NК-клеточного звена оценивали по содержанию в крови больших гранулярных лимфоцитов - БГЛ, которое подсчитывали в мазках крови, окрашенных по Паппенгейму. Состояние моноцитарно-макрофагального звена оценивали по показателю макрофагальной трансформации моноцитов (ПМТМ) [4]. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли по измерению оптической плотности сыворотки после инкубации с 3,5% ПЭГом [6; 7]. Результаты клеточных тестов выражали в процентных и абсолютных (х10⁹/л) значениях, ЦИК - в усл. ед. оптической плотности.

Для обработки полученных результатов применяли параметрические и непараметрические методы. При малой выборке использовали непараметрический критерий Вилкоксона-Манна-Уитни. Критерий достоверности определяли по Стьюденту [5].

Результаты. Результаты изучения исходных показателей иммунного статуса больных раком вульвы в зависимости от стадии заболевания представлены в таблицах 1 и 2 в относительных величинах (в %) и в абсолютных значениях к числу лейкоцитов (х 10⁹/л). Анализ состояния иммунной системы у больных с I стадией заболевания позволил установить, что основные показатели находились в пределах колебаний, характерных для здоровых женщин соответствующего возраста. Пролиферация лимфобластов на митоген ФГА соответствовала нормальным показателям: РБТЛ на ФГА - 48,0± 4,3%. Однако функциональная активность в абсолютных показателях Т-клеток снижена и составляла на митоген ФГА - 0,38±0,08 х10⁹/л (при сравнении со здоровыми (р < 0,05). По-видимому, иммунная система больных с I стадией заболевания еще способна к регуляции. При анализе относительных величин в периферической крови выявлено, что количество Т-лимфоцитов (CD2+) равно 66,0±3,2%, активность макрофагов при трансформации из моноцитов периферической крови равна 60,2±2,1%, и количество NK (БГЛ) также в пределах нормы - 13,0±3,2%. В то же время при рассмотрении этих показателей иммунной системы в абсолютных цифрах выявлено, что общее количество Т-клеток (CD2+)- 0,53±0,07х10⁹/л достоверно снижено в два раза за счет достоверного уменьшения числа лимфоцитов в периферической крови. У женщин с I стадией болезни имеет место напряженность иммунной системы, так как уровень рецепторно активных иммуноцитов составляет почти три четверти от всей массы Т-лимфоцитов. Следует отметить, что трансформация моноцитов в макрофаги угнетена - ПМТМ равен 0,48±0,05х10⁹/л (против 1,12±0,03 у здоровых, (р<0,05), что в какой-то мере определяет дальнейший рост опухоли (за счет угнетения первичной иммунной реакции и разрушения регуляции ингибицией или снижением уровня интерлейкинов). У больных с первой стадией заболевания имел место высокий уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) - 36,8±4,1 по сравнению с 25,0±3,3 у здоровых женщин.

Таблица 1 - Сравнительная характеристика показателей иммунного статуса у больных раком вульвы I-IV стадий (%)

* - статистически достоверные отличия от здоровых (Р<0,05);

▼ - отличия от I стадии;

 ■ - отличия от II стадии.

При анализе показателей иммунного статуса больных раком вульвы со II стадией заболевания оказалось, что пролиферативная активность на ФГА достоверно снижалась по сравнению как с показателями здоровых женщин, так и по сравнению с данными больных с I стадией заболевания. Так, РБТЛ на ФГА равно 34,0±2,6%, а данные, полученные при изучении показателей в абсолютных цифрах на ФГА - 0,28±0,05х10⁹/л, достоверно снижены по сравнению с таковыми у здоровых женщин (р < 0,05).

Низкие уровни регулирования обусловливали снижение активности трансформации макрофагов и В-лимфоцитов. Количество Т-лимфоцитов (CD 2 +) имело только тенденцию к снижению от 66,0± 3,2% при I стадии к 59,0± 1,8% во II стадии.

Таблица 2 - Сравнительная характеристика показателей иммунного статуса у больных раком вульвы I-IV стадий (х10⁹/л)

* - статистически достоверные отличия от здоровых (Р<0,05);

▼ - отличия от I стадии;

 ■ - отличия от II стадии.

По мере распространения опухолевого процесса неблагоприятные тенденции изменения иммунного статуса усиливаются, что проявляется при оценке относительных и абсолютных значений исследуемых параметров. У больных с III стадией рака вульвы отмечен более выраженный дисбаланс состояния иммунной системы. У них наблюдалось статистически достоверное повышение уровня ЦИК в крови по сравнению с начальными стадиями, и тем более с показателями здоровых женщин. Количество Т- и В-лимфоцитов, способных трансформироваться под действием митогенов, было снижено на 30 и 20% соответственно. Содержание моноцитов остается на уровне I стадии, однако их функциональная активность (ПМТМ) статистически достоверно снижается (табл. 1, 2).

У больных с IV стадией рака вульвы процентное содержание Т-лимфоцитов остается на уровне больных со II и III стадиями. При этом количество функционально активных Т-лимфоцитов статистически достоверно снижается с 48,0+4,3% до 27,5+2,4%; количество ЛПС-стимулированных В-лимфоцитов имеет тенденцию к снижению и уменьшается на 20% по сравнению с показателями больных, находящихся в I стадии. Функциональная активность моноцитов/макрофагов также оказалась ниже, чем у больных I и II стадий заболевания. Уровень ЦИК в крови больных с IV стадией в 2 раза выше, чем в сравниваемой группе здоровых женщин, и статистически достоверно превышает показатели больных с I и II стадиями рака вульвы (табл. 1).

Обобщенные результаты представленных данных в таблицах 1 и 2 свидетельствуют, что по мере распространенности процесса нарастает количество статистически значимо измененных по сравнению с нормой показателей, которое достигает максимума у больных с IV стадией. Следует отметить, что снижение функциональных показателей моноцитарно-макрофагального, Т-клеточного и В-клеточного звеньев наступает при более ранних стадиях, чем угнетение количественных параметров.

Выводы. Таким образом, изучение иммунного статуса больных раком вульвы показало наличие количественного и качественного иммунодефицита, степень которого характерна для каждой стадии заболевания. Высокая концентрация ЦИК блокирует активность иммунокомпетентных клеток, и прежде всего регуляторных лимфоцитов. По мере распространения опухолевого процесса нарастают нарушения в иммунной системе, которые требуют специальной коррекции.

Рецензенты

• Каймакчи О.Ю., д.м.н., ассистент кафедры онкологии Ростовского государственного медицинского университета, г. Ростов-на-Дону.
• Николаева Н.В., д.м.н., ассистент кафедры онкологии Ростовского государственного медицинского университета, врач-гематолог отделения гематологии ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт», г. Ростов-на-Дону.

Библиографическая ссылка