Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Стабровская Н.В. 1, 2 Иванов В.П. 1, 2 Трубникова Е.В. 1, 2 Брежнев А.Ю. 2 Кохтенко Е.В. 1 Белоус А.С. 1 Нескородова Н.Ю. 1 Храмцов А.В. 1 Винников В.И. 2

---

1 Курский государственный университет

2 Курский государственный медицинский университет

Известно, что ферменты метаболизма ксенобиотиков участвуют в метаболизме эндогенных веществ, следовательно, сбой в их работе может приводить к развитию значительного количества заболеваний. В представленном исследовании проведен анализ частот встречаемости полиморфных вариантов генов глутатионовых S-трансфераз – GSTT1 и GSTM1 у жителей Курской области. При этом установлено, что в рассматриваемых выборках (глаукома и контроль) количество генотипов GSTM1+ и GSTM1 del/del было практически равным. В тоже время количество генотипов GSTT1+ преобладало над количеством генотипов GSTT1 del/del. Таким образом, проведенный анализ частот встречаемости полиморфных вариантов генов глутатионовых S-трансфераз у жителей Курской области больных глаукомой не выявил значимых отличий по сравнению со здоровыми индивидами. Вероятно, существуют связи полиморфных вариантов генов GSTT1 и GSTM1 с некоторыми клиническими проявлениями рассматриваемой патологии.

Статья в формате PDF

122 KB

глаукома

глутатион S-трансферазы

полиморфизм

1. Баранов В.С., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э. и др. Геном человека и гены предрасположенности (Введение в предиктивную медицину). - СПб.: Интермедика, 2000. - 272 с.

2. Кулинский В.И. Обезвреживание ксенобиотиков // Соросовский образовательный журнал. - 1999. - № 1. - С. 8-12.

3. Кулинский В.И., Колесниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи современной биологии. - 1990. - Т. 110. - № 1(4). - С. 20-33.

4. Нестеров А.П. Глаукома. - М.: Медицина, 1995.

5. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных (Применение пакета прикладных программ Statistica) // М.: Медиа-Сфера, 2003. - 312 с.

6. ArandM., Muhlbauer R., Hengstler J., Jager E., Fuchs J., Winkler L., Oesch F. A multiplex polymerase chain reaction protocol for the simultaneous analysis of the glutathione S-transferase GSTM1 and GSTT1 polymorphisms. Anal. Bio-chem., 236: 184-186, 1996.

7. Bell D.A., Taylor J.A., Paulson D.F., Robertson C.N., Mohler J.L., Lucier G.W. Genetic risk and carcinogen exposure: a common inherited defect of the carcinogen-metabolism gene glutathione S-transferase M1 (GSTM1) that increases susceptibility to bladder cancer. J. Natl. Cancer Inst., 85: 1159-1164, 1993.

8. Cilenšek I, Mankoč S, Petrovič MG, Petrovič D. GSTT1 null genotype is a risk factor for diabetic retinopathy in Caucasians with type 2 diabetes, whereas GSTM1 null genotype might confer protection against retinopathy. // Dis Markers. 2012; 32(2):93-9.

9. Lindh J, Söderkvist P, Fredrikson M, Hosseininia S, Tondel M, Persson B, Vrethem M. Polymorphisms of GSTT1, GSTM1, and EPHX genotypes in patients with cryptogenic polyneuropathy: a case-control study. // Brain Behav. 2011 Nov; 1(2):135-41.

10. Sireesha R, Laxmi SG, Mamata M, Reddy PY, Goud PU, Rao PV, Reddy GB, Vishnupriya S, Padma T. Total activity of glutathione-S-transferase (GST) and polymorphisms of GSTM1 and GSTT1 genes conferring risk for the development of age related cataracts. // Exp Eye Res. 2012 Mar 16.

Среди офтальмопатологии имеются нозологические формы, которые развиваются незаметно, но в итоге приводят к полной потере зрения. Классический пример - глаукома.

Глаукома (от греч. - цвет морской воды, лазурный) - тяжелое заболевание органа зрения, получившее название от зеленоватой окраски, которую приобретает расширенный и неподвижный зрачок в стадии наивысшего развития болезненного процесса - острого приступа глаукомы. Отсюда же происходит и второе название этого заболевания - «зеленая вода» или «зеленая катаракта» (от нем. «Grun Star»).

В настоящее время отсутствуют единые представления о причинах возникновения и механизмах развития этой болезни, встречаются определенные сложности даже в самой попытке определить понятие «глаукома».

Это хроническое заболевание глаза, при котором повышается внутриглазное давление. Если глазное давление вовремя не снизить до нормы, гибнет зрительный нерв, что приводит к необратимой слепоте. Глаукома - довольно распространенное заболевание: по статистике 14-15% всех слепых на земном шаре потеряли зрение именно по этой причине.

Известно, что ферменты метаболизма ксенобиотиков (ФМК) помимо деградации молекул экзогенного происхождения также активно участвуют в метаболизме эндогенных веществ и что сбой в их работе может приводить к развитию значительного количества заболеваний. Этой проблеме посвящены многочисленные исследования отечественных и зарубежных авторов. Вместе с тем гены ФМК только в последние годы стали объектом подобных исследований, и на сегодняшний день существует достаточно противоречивая информация об их роли в отношении развития патологических состояний. Так, при катаракте наблюдается ассоциация делеционного варианта частоты гена GSTM с тяжестью заболевания. В то же время наблюдается выше частота делеционного варианта гена GSTT при катаракте в сравнении с контролем. Также выявлена взаимосвязь с риском развития полинейропатии у курящих индивидов, имеющих делеционный вариант гена GSTT. Установлено, что при сахарном диабете увеличена частота делеционного варианта гена GSTT и уменьшена частота делеционного варианта гена GSTM. В связи с этим в данной работе проведен анализ частот встречаемости полиморфных вариантов генов глутатионовых S-трансфераз - GSTT1 (делеция) и GSTM1 (делеция) у жителей Курской области.

Материалы и методы исследования

В качестве объекта исследования была взята выборка больных глаукомой (210 индивидов). Контрольную группу составили индивиды, не родственные между собой и не имеющие по результатам клинического исследования глаукомы (232 индивида). Выделение тотальной ДНК осуществляли из цельной венозной крови стандартным методом фенол-хлороформной экстракции. Типирование делеционных полиморфизмов генов GSTM1 и GSTT1 осуществлялось с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) согласно протоколу, описанному M. Arand с соавторами, на программируемом термоциклере МС2 ("ДНК-технология"). В качестве положительного контроля амплификации использовали фрагмент Р-глобинового гена. Продукты амплификации разделяли в 2%-агарозном геле с этидиумбромидом и визуализировали в проходящем УФ-свете с применением компьютерной видеосъемки на приборе GDS-8000 (UVP, США). Электрофоретическое разделение продуктов ПЦР гена представлено на рисунке 1.

Учитывая, что гетерозиготы и гомозиготы по нормальному аллели не дифференцируются с помощью использованного метода генотипоирования, в проведенном исследовании носителей этих генотипов объединили в одну группу.

Рис. 1. Разделение асплифицированных фрагментов генов GSTT1 и GSTM1 на 2%-агарозном геле. Обозначения: Фрагмент гена GSTM1 амплифицировался размером 215 п.н. (верхние фрагменты), гена GSTT1 - размером 480 п.н. (нижний фрагмент). Фрагмент р-глобина - размером 350 п.н. использовался в качестве положительного контроля амплификации (средний фрагмент). Гомозиготы GSTT1 del/del обозначены тремя стрелками сверху. Гомозиготы GSTM1 del/del обозначены двумя стрелками снизу. (А.В. Полоников)

Статистическая обработка данных проводилась на персональном компьютере с использованием программного пакета Statistica 8.0. Разницу в распределении частот генотипов и их сочетаний между группами рассчитывали с помощью критерия χ2 c поправкой Йейтса. Различия рассматривали как достоверные при уровне значимости p<0.05.

Результаты исследования и их обсуждение

Изучение генотипов контрольной выборки показало, что в случае гена GSTM1 распределение генотипов было практически равным: генотипов с делеционным вариантом было 41,81%, а вариантов генотипов GSTM+ - 58,19%. Несколько иная картина наблюдалась в случае гена GSTT1. Здесь преобладали генотипы GSTT+ в отличие от делеционных. Похожая картина наблюдалась и в группе больных глаукомой. Сравнительный анализ частот генотипов между контрольной группой и группой больных глаукомой не выявил статистически значимых различий (таблица 1).

Таблица 1 Распределение частот генотипов полиморфных вариантов генов в выборке больных с глаукомой и контрольной группе

Таким образом, проведенный анализ частот встречаемости полиморфных вариантов генов глутатионовых S-трансфераз у жителей Курской области больных глаукомой не выявил значимых отличий по сравнению со здоровыми индивидами. Тем не менее, вполне вероятно наличие связей полиморфных вариантов рассматриваемых генов с клиническими проявлениями представленной патологии.

Рецензенты:

• Ляпустин Виктор Николаевич, доктор биологических наук, старший научный сотрудник, заведующий отделением криогенного хранения культур клеток и коллекционных штаммов вирусов ГУ «Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова» РАМН, Московская обл.
• Варгин Виктор Викторович, доктор медицинских наук, доцент, ведущий научный сотрудник ГУ «Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова» РАМН, Московская обл.

Библиографическая ссылка