Введение. На современном этапе развития эндокринологии о пролактине известно как о гормоне, выполняющем большое количество различных функций, имеющих непосредственное отношение к эндокринной, дыхательной, сердечно-сосудистой и пищеварительной системам, к метаболической и ноциоцептивной функциям, к формированию материнского инстинкта, к долгосрочной памяти и многое другое [4,5,9].
Повышение уровня пролактина может быть проявлением как самостоятельного гипоталамо-гипофизарного заболевания, так и одним из синдромов при различных эндокринопатиях, соматогенных и нервно-психических нарушениях [1,2,5]. Причины гиперпролактинемии могут быть как физиологические (стимуляции пролактин-рилизинг-факторов во время сна, при стрессе, физической нагрузки, акте сосания и др.), так и патологические (аденому гипофиза, соматотропин-секретирующие опухоли гипофиза, болезнь Иценко - Кушинга, синдром Нельсона, краниофарингиома, первичный гипотиреоз, хроническая почечная недостаточность, синтез антител к пролактину и лактотропоцитам) и фармакологические (блокаторы D-рецепторов и ингибиторы синтеза пролактина и декарбоксилазы) [7,8].
Целью нашего исследования было изучение влияния гиперпролактинемии на функции почек, в частности на диурез и основные процессы мочеобразования, и при наличии изменений, вскрытие механизмов, лежащих в их основе.
Материал и методы исследования. Для решения поставленной цели были созданы на крысах линии Вистар экспериментальные модели эндогенной и экзогенной гиперпролактинемии. Первую создавали введением в течение 22-х дней блокатора D2 рецепторов - галоперидола в дозе 0,2 мг/100 г [8]. Модель экзогенной гиперпролактинемии - создание в/м введением препарата пролактина «лактина» в дозе 9 ед/100г [8]. Исследования водного диуреза проводили после введения крысам через зонд в желудок водопроводной воды в объеме 5 % их массы (в серии опытов с галоперидолом водная нагрузка вводилась одновременно с ним, а с лактином - через 2,5 часа после инъекции). Контрольную группу составляли интактные крысы, получавшие водную нагрузку. Всех крыс зажали на три часа в специальные клетки для сбора мочи отдельно за каждый час. В собранной моче определяли содержание эндогенного креатинина (спектрофотометрически методом Поппера) [6], для последующего расчета скорости клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции воды. В слоях ткани почек и в плазме крови определяли содержание мочевины (спектрофотометрически с использованием тиосемикарбазида) [3] и натрия (пламенной фотометрией методом) [6].
Результаты и их обсуждение. Проведенные исследования показали, что в сериях опытов с эндогенной гиперпролактинемией, создаваемой ежедневным, в течение 22-х дней, введением галоперидола, можно выделить два периода: ранний, когда проявляются эффекты самого препарата, и поздний, обусловленный создаваемой им гиперпролактинемией.
Однократное введение галоперидола достоверно (р<0,05) снизило водный диурез на первом часе до 1,63±0,2 мл/час/100 г (контроль 2,1±0,16 мл/час/100 г), а на втором и третьем часах, наоборот, отмечалось незначительно повышение, в результате чего количество выделившейся мочи за три часа у экспериментальных крыс (4,63±0,53 мл/3часа/100 г) не отличалось от контроля (4,4±0,43 мл/3часа/100 г).
С продолжением введения крысам галоперидола уменьшение диуреза усиливалось и на 12-й день на первом часе (1,04±0,18 мл/час/100г, р<0,001) было в два раза меньше, а суммарно за три часа (3,44±0,41 мл/3чса/100г) впервые за все время введения галоперидола стал достоверно (р<0,05) меньше контроля.
Дальнейшее продолжение эксперимента уже практически не отразилось на количестве выделяющейся мочи, и максимальное снижение водного диуреза отмечалось на 15-м (0,96±0,12 мл/час/100г, р<0,01) и 22-м (0,97±0,11 мл/час/100 г) днях введения галоперидола, когда еще отмечалось торможение диуреза на втором и третьем часах, и за три часа мочи выделилось меньше (3,19±0,38 и 3,21±0,35 мл/3часа/100 г соответственно, р<0,01), и в среднем снижение диуреза было на 31,2 %.
Таким образом, уменьшение водного диуреза у крыс после перорального введения галоперидола вначале обусловлено действием самого препарата (ранний эффект), а при длительном введении уменьшение количества выделяющейся мочи вызвано способностью этого антипсихотоника повышать в крови содержание эндогенного пролактина (поздний эффект).
Изучение основных процессов мочеобразования для объяснения причины снижения водного диуреза у крыс показало, что как ранний, так и поздний антидиуретический эффекты галоперидола обусловлены усилением канальцевой реабсорбции воды с контрольного уровня в 92,73±0,85 % до 95,4±0,58 % (в первый день, р<0,01); до 96,99±0,54 % - на 12-й день (р<0,001); до 97,85±0,26 % и 97,28±0,37 % на 15-й и 22-й дни (р<0,001). Что касается скорости клубочковой фильтрации, то она на протяжении всего эксперимента, кроме тенденции к ускорению за первые два часа, не менялась, и в среднем за три часа изменение скорости клубочковой фильтрации укладывалось в среднестатистические колебания разброса.
То, что поздние эффекты галоперидола на диурез опосредованы повышением пролактина без определения его содержания в крови, не может быть однозначным и утверждающим, несмотря на то, что на это имеются литературные данные [1,4,5], и как минимум должно быть подтверждено аналогичными результатами изменения водовыделительной функции почек при введении пролактина. Поэтому мы решили провести сравнение данных влияния на диурез эндогенной гиперпролактинемии, вызванной длительным приемом галоперидола и экзогенной гиперпролактинемии, созданной введением самого гормона.
Доза лактина из-за отсутствия однозначных данных литературы определялась эмпирически в/м введением препарата, начиная с 1 ед/100г и прибавляя по одной единице. Повышение дозы до 8 ед/100г оказывало на водовыделительную функцию почек слабое действие, а начиная с 9 ед/100г - выраженное, которое при дальнейшем увеличении вызывало значительное торможение водного диуреза. Поэтому нами была выбрана доза лактина в 9 ед/100 г как средняя между слабыми и резкими изменениями диуреза.
Выяснив дозу лактина, мы начали ставить опыты с определением времени его введения относительно водной нагрузки. При одновременном введении лактина и водной нагрузки процент выведения жидкости из организма за три часа составлял 72,86±3,42 % (n=22), против 88,79±3,16 % (n=31) у контрольных крыс (р<0,01). Изменение диуреза было связано с тем, что на третьем часе он был достоверно снижен (р<0,002), на втором отмечалась тенденция к уменьшению, а на первом часе диурез изменений не наблюдалось.
При введении водной нагрузки через один час после инъекции лактина (n=20) количество мочи, выделившейся за три часа, от объёма введенной водопроводной воды составляло 70,36±3,24 % (р<0,002). При этом диурез был достоверно (р<0,01) снижен на втором и третьем часах. Введением нагрузки через два часа после гормона (n=17) торможение диуреза усилилось (р<0,001) за счет первых двух часов. В случае же нагрузки крыс водопроводной водой через три часа после инъекции лактина (n=19), количество выделившейся за три часа мочи от введенной воды составило 77,25±4,52 %, что оставалось меньше (р<0,05) контроля, но стало на 13,9 % больше данных введения водной нагрузки раньше инъекции гормона за два часа. Сопоставление полученных результатов всех поставленных вариантов опытов позволяет сделать заключение о целесообразности введения лактина за 2,5 часа до водной нагрузки, что исключит влияние примесей, вероятно имеющихся в лактине, прежде всего вазопрессина, и в то же время не сдвинет назад проявление эффекта самого гормона.
Итак, в/м ведение крысам линии Вистар лактина в дозе 9 ед/100 г и последующая, через 2,5 часа, нагрузка водопроводной водой в объеме 5 % от их массы и сбор выделившейся мочи в течение трех часов в отдельности за каждый показал, что в первый день опытов диурез за первый час с 2,35±0,2 мл/час/100 г снизился с до 1,56±0,12 мл/час/100г (р<0,01). За второй час также наблюдалось снижение диуреза на 38,1 % (р<0,02) с контрольного уровня в 1,42±0,11 мл/час/100 г. И хоть за третий час отличий не было, но в среднем суммарный трехчасовый диурез (3,22±0,28 мл/3часа/100 г) стал достоверно (р<0,02) меньше контроля (4,34±0,36 мл/3часа/100 г).
Аналогичные результаты такого же достоверного снижения водного диуреза были получены при трех,- пяти- и семикратном введении лактина (3,33±0,25; 3,17±0,31 и 3,26±0,28 мл/3часа/100 г, соответственно). И во всех случаях причиной торможения диуреза было достоверное (р<0,001) повышение канальцевой реабсорбции воды, при неменяющейся скорости клубочковой фильтрации. Так, у контрольных крыс за три часа в канальцах почек обратно, от профильтровавшейся воды, всосалось 92,37±0,82 %, а после однократного введения лактина - 95,26±0,52 %, а после семикратного - 95,5±0,76 %.
Выяснив дозу и время введения лактина, мы решили определить длительность сохранения его эффекта. Поэтому после однократной инъекции лактина на следующий день крысам ввели только водную нагрузку (n=18). И количество мочи в этом случае за каждый час, соответственно и суммарно за три часа (4,26±0,45 мл/3часа/100г), не отличалось от контроля (4,34±0,42 мл/3часа/100г). Аналогичные результаты были получены и после семикратного введения лактина (4,18±0,38 мл/3часа/100 г). Но отсутствие изменений диуреза не означает неизменность основных процессов мочеобразования, и постоянство диуреза может быть обусловлено соразмерными противоположными изменениями скорости клубочковой фильтрации и объема канальцевой реабсорбции воды. Проведенные исследования и расчеты показали, что результаты процессов мочеобразования у модельных крыс не отличались от контрольных. Так, на следующий день после семикратного введения лактина скорость клубочковой фильтрации за три часа составляла 75,57±9,48 мл/3часа/100 г, а объем канальцевой реабсорбции воды - 92,44±0,72 % (контроль 70,71±7,67 мл/3часа/100 г и 92,37±0,82 %). При этом не было и отличий этих показателей отдельно по каждому часу. То есть лактин не обладает пролонгированным действием и кумулятивными свойствами.
С целью выяснения механизма влияния лактина на усиление канальцевой реабсорбции воды, мы исследовали в слоях почек содержание мочевины и натрия как веществ, создающих большую часть осмотического давления и определяющих транспорт свободной воды из канальцев почек в интерстиций по осмотическому градиенту, регулируя конечный объем мочеобразования. Исследования эти проводили после четырехкратного введения лактина как при водном диурезе (так как изучали влияние лактина на основные процессы мочеобразования в условиях гидратации), так и спонтанном (для исключения влияния водной нагрузки и большего проявления эффекта самого лактина на водовыделительную функцию почек).
Итак, в условиях спонтанного диуреза после введения лактина повысилось содержание мочевины в корковом веществе почек (24,75±1,12 - контроль, 28,87±1,85 мкмоль/г влажной ткани - опыт, р<0,05), наружном мозговом веществе (с 41,53±2,7 до 52,38±3,58 мкмоль/г влажной ткани, р<0,01) и почечном сосочке (89,32±6,64 - контроль, 113,6±7,85 мкмоль/г влажной ткани - опыт, р<0,02). Одновременно увеличился и уровень натрия в корковом (р<0,05) и наружном мозговом (р<0,01) веществах почек (28,64±0,36 и 34,59±0,72 ммоль/100 г сухого вещества - контроль, 30,14±0,58 и 37,21±0,77 ммоль/100 г сухого вещества - опыт, соответственно). При этом изменения содержания мочевины и натрия в слоях почек не сопровождались изменением их уровней в плазме крови.
Аналогичные результаты содержания мочевины и натрия в слоях ткани почек и степень их выраженности имели место и при водном диурезе, с той лишь разницей, что повышение мочевины в корковом веществе не имело достоверного отличия. В опытах, поставленных на следующий день после четырехкратного введения лактина, когда ни диурез, ни основные процессы мочеобразования не отличались от контроля, содержание мочевины и натрия в слоях почек также было нормальным.
Таким образом, лактин вызывает рост осмотического градиента и активацию концентрирующего механизма слоев почек. А сходство поздних эффектов галоперидола на водовыделительную функцию почек при экзогенной гиперпролактинемии, вызываемой введением лактина, позволяет считать, что поздние эффекты галоперидола опосредуются повышением секреции эндогенного пролактина, то есть гиперпролактинемии.
Выводы
- Ежедневное, в течение 22-х дней, введение крысам галоперидола в дозе 2 мг/кг веса per os вызывает достоверное прогрессирующее снижение диуреза на первом часе трехчасового водного диуреза, вследствие повышения канальцевой реабсорбции жидкости.
- Экзогенная гиперпролактинемия, воспроизводимая в/м введением крысам лактина в дозе 9 мг/кг в течение семи дней, вызывает снижение водного диуреза за счет усиления реабсорбции воды в канальцах почек в результате повышения содержания мочевины и натрия и осмотический градиент в слоях ткани почки. Эффекты лактина на водовыделительную функцию почек носят временный функциональный характер.
- Сходство изменений водовыделительной функции почек при длительном введении галоперидола и лактина позволяет считать, что они обусловлены эндогенной гиперпролактинемией.
Рецензенты:
Басиева О.О., д.м.н., профессор, заведующая кафедрой внутренних болезней № 2 государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Северо-Осетинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации. г. Владикавказ.
Цаллагова Л.В., д.м.н., профессор, заведующая кафедрой акушерства и гинекологии государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Северо-Осетинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Владикавказ.
Библиографическая ссылка
Таболова Л.С., Джиоев И.Г., Акоева Л.А., Гиреева Л.А. ВЛИЯНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЭНДО – И ЭКЗОГЕННОЙ ГИПЕРПРОЛАКТИНЕМИИ НА ВОДОВЫДЕЛИТЕЛЬНУЮ ФУНКЦИЮ ПОЧЕК // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 6. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=11135 (дата обращения: 20.04.2024).