Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,006

ОСОБЕННОСТИ ОРИЕНТИРОВОЧНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КОАГУЛОГРАММЫ КРОЛИКОВ В УСЛОВИЯХ ОСТРОЙ БАРОКАМЕРНОЙ ГИПОКСИИ

Еникеев Д.А. 1 Хисамов Э.Н. 1 Еникеев О.А. 1 Хисамов Э.Э. 1 Фаюршин А.З. 1 Лашин А.А. 1
1 ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России»
Изучение состояния некоторых ориентировочных показателей коагулограммы при действии на организм острой барокамерной гипоксии проводилось на взрослых кроликах породы шиншилла. Разрежение воздуха соответствовало 5-7 тыс. м высоты. Исследование гемостаза проводилось по показателям времени конца свертывания капиллярной крови, ретракции кровяного сгустка, а также активности спонтанного фибринолиза в исходном уровне (контроль), через 3, 7, 12, 24 часа действия острой гипоксии, а также через 1, 2, 3, 4, 5 суток после опыта. Показатели времени конца свертывания капиллярной крови в условиях барокамерной гипоксии постепенно снижались с максимальными значениями к концу 24 часов опыта. Возвращение к исходному состоянию данного показателя также происходило постепенно, нормализация наступала лишь на 4-5-е сутки. Свертывание крови в данном опыте моделировало образование первичного сосудисто-тромбоцитарного сгустка, когда повышалась активность тромбоцитарного, эндотелиального звеньев и гуморальных факторов - адреналина, VIII плазменного фактора Виллебранда, III фактора тромбопластина, а также IV фактора – ионов кальция. Среднее значение ретракции кровяного сгустка постепенно по мере удлинения срока пребывания животных в барокамере повышалось и максимального значения достигало через 24 часа. Возвращение к исходному уровню происходило на 4-5-е сутки после опыта. Только через 3 часа действия острой гипоксии наблюдалось статистически значимое понижение данного показателя по сравнению с исходным уровнем. Среднее значение активности фибринолиза крови под действием барокамерной гипоксии имело тенденцию к снижению. Выявленные сдвиги со стороны фибринолиза, возможно, обусловлены дефицитом процесса оксигенации ферментативного превращения плазминогена в плазмин. Исключение составляло значение данного показателя через 3 часа острой гипоксии, когда отмечалось статистически достоверное его повышение. Таким образом, в целом обозначился прокоагуляционный эффект гипобарической гипоксии.
гипоксия
свертывание
ретракция сгустка крови
фибринолизис
1. Питкевич Э.С., Угольник Т.С., Лызиков А.А., Бель Ю.И. Система гемостаза: физиология, патофизиология и медикаментозная коррекция: учебно-методическое пособие. Гомель: Гомельский государственный медицинский университет, 2007. 44 с.
2. Зверев А.А., Зефиров Т.Л. Статистические методы в биологии: учебно-методическое пособие. Казань: КФУ, 2013. 42 с.
3. Еникеев Д.А., Хисамов Э.Н., Еникеев О.А., Срубилин Д.В., Шакиров А.Р. Состояние клеточного гемостаза при действии острой барокамерной гипоксии // Современные проблемы науки и образования. 2019. № 4.; URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=29028 (дата обращения: 24.11.2019).
4. Шахматов И.А., Вдовин В.М., Киселев В.И. Состояние системы гемостаза при различных видах гипоксического воздействия // Бюллетень СО АМН. 2010. Т. 30. № 2. С.131-138.
5. Хайбуллина З.Р., Вахидова Н.Т. Состояние периферической крови при острой гипоксии в эксперименте // Медицина: вызовы сегодняшнего дня: материалы Междунар. науч. конф. Челябинск: Два комсомольца, 2012. С. 24-29.
6. Москаленко С.В., Шахматов И.И., Бондарчук Ю.А., Улитина О.М Влияние однократного и многократного воздействия гипоксической гипоксии сильной интенсивности на состояние системы гемостаза у крыс // Сибирский научный медицинский журнал. 2018. Т. 38. №1. С. 32-37.

Система гемостаза представляет собой наиболее важный компонент более обширной системы регуляции агрегатного состояния крови и коллоидов (РАСК), обеспечивающей гомеостаз внутренней среды [1]. Индивидуальная адаптация организма в физиологических условиях, а также при патологии невозможна без адекватной пластичности системы гемостаза. Поэтому любая лечебная коррекция или диагностика нуждаются в информации о степени равновесия или отклонения различных элементов гемостаза – прокоагулянтов, антикоагулянтов и фибринолитической системы. В практической медицине имеет важное значение исследование состояния гемостаза с применением относительно недорогих и простых методов, но достаточно полно отражающих состояние плазменных факторов свертывания крови.

Реакция гемостаза на действие гипоксии не всегда однозначна.   Это касается состояния   внутреннего равновесия элементов гемостаза в целом, а также его факторов в отдельности. Поэтому работы, направленные на изучение данной проблемы, сохраняют свою оригинальность.

Цель исследования: установить направленность сдвигов различных фаз коагуляционного гемостаза и фибринолитической системы в условиях действия на организм острой прерывистой барокамерной гипоксии различной интенсивности и в послеопытном периоде в сравнительном аспекте.

Материал и методы исследования

Материалом для работы служила периферическая кровь 50 кроликов породы шиншилла. Экспериментальные условия были созданы в виде пребывания взрослых кроликов в барокамере со снижением уровня атмосферного давления, соответствующего по показателю манометра-анероида 5-7 тыс. м высоты. Прерывистая гиперкапническая гипоксия создавалась с перерывами на 15 минут через каждый час пребывания в камере. Исследование проводилось через 3, 7, 12, 24 часа и в течение 5 суток после опыта. Во время эксперимента и после него состояние кроликов было удовлетворительное, случаев гибели не было. Изучение свертываемости крови проводилось по трем параметрам:

  1. Определение времени конца свертывания капиллярной крови по методу Сухарева. В капилляр аппарата Панченкова для СОЭ набирается 25 мм крови и устанавливается время полной остановки движения крови при смене наклона капилляра 40 г в каждые 30 сек. Индекс свертывания крови (ИСК %) = (Исходное время свертывания / экспериментальное время свертывания) х 100%.
  2. Определение величины ретракции (R%) сгустка крови по методу Рутберг. Устанавливается по формуле: R (%) = (F2 x 50) / V, где F2 – объем сыворотки 2 мл крови после удаления сгустка и центрифугирования (15 мин. 1500 об. в мин.); V- объем плазмы 2 мл крови по гематокриту; 50 – расчетное число для 100 мл плазмы крови.
  3. Определение активности спонтанного фибринолиза (SF %) по методу Рутберг. Устанавливается по формуле: SF (%) = (F3 x 50) / HT, где: F3- объем форменных элементов (мл) после центрифугирования сыворотки 2 мл крови; HT – гематокрит, т.е. объем форменных элементов 2 мл крови; 50 - расчет на 100 мл плазмы.Например, в исходном состоянии: F2 =1,8 мл. V=1,32 мл. R=68,2%. GT=34,1% (0,68 мл). F3=0,18 мл. SF=13,23.

Соответствие выборок нормальному распределению оценивалось по критерию Шапиро - Уилка. Показатели внутри выборок отличались от стандартного нормального распределения. Для установления достоверности различий был использован критерий Вилкоксона для сопряженных пар, когда одно и то же животное является контролем (исходное состояние) и экспериментальным (в процессе опыта) [2].

Результаты исследования и их обсуждение

В соответствии с поставленной целью работы объектом изучения стали ориентировочные свойства плазменных факторов: время свертывания крови, значение ретракции кровяного сгустка и активность спонтанного фибринолиза взрослых кроликов в условиях 24-часового пребывания в барокамере при понижении уровня атмосферного давления, соответствующего 5-7 тыс. м высоты в динамике.

Среднее время конца свертывания капиллярной крови по мере пребывания животных в барокамере постепенно снижалось, с максимальным значением к 24 часам действия острой гипоксии (табл. 1). Возвращение к исходному состоянию наблюдалось лишь на 4-5-е сутки после опыта.

Таблица 1

Показатели свертывания крови при действии барокамерной гипоксии

Сроки исследования

Среднее время конца свертывания капиллярной крови (сек.)

Диапазон времени конца

свертывания капиллярной крови

(сек.)

Среднее значение индекса конца свертывания капиллярной крови (%)

Диапазон индекса свертывания капиллярной крови (%)

Исходное состояние

188,7±5,1

156-277

-

-

Через 3 часа

176,3±4,9*

153-272

188,7/176,3

х100=107,0

92-121

Через 7 часов

161,2±5,2*

144-258

188,7/161,2

х100=117,0

98-136

Через 12 часов

143,3±4,9*

131-246

188,7/143,3

х100=131,5

119-141

Через 24 часа

98,2±4.7*

118-221

188,7/98,2

х100=192,1

179-203

После 1 суток

123,1±4,6*

133-242

188,7/123,1

х100=153,2

145-162

После 2 суток

148,5±4,8*

145-225

188,7/148,5

Х100=127,0

118-136

После 3 суток

173,1±5,3*

146-261

188,7/173,1

х100=109,0

93-117

После 4 суток

195,2±5,4

151-271

188,7/195,2

х100=96,7

81-107

После 5 суток

191,2±5,3

155-281

188,7/191,2

х100=98,6

82-109

Примечание: n = 50; M - средняя арифметическая величина; m – стандартная ошибка средней арифметической; *- P<0,05 достоверность различий при сопоставлении с исходным уровнем.

Состояние плазменных факторов гемостаза изучалось с помощью значения ретракции и активности спонтанного фибринолиза (табл. 2). Среднее значение ретракции кровяного сгустка постепенно по мере удлинения срока пребывания животных в барокамере снижалось и максимального значения достигало через 24 часа. Возвращение к исходному уровню происходило на 4-5-е сутки после опыта. Лишь через 3 часа действия острой гипоксии наблюдалось статистически значимое повышение данного показателя по сравнению с исходным уровнем.

Активность фибринолиза крови под действием барокамерной гипоксии имело тенденцию к снижению по сравнению с исходным состоянием. Исключение составляло значение данного показателя через 3 часа острой гипоксии, когда отмечалось статистически достоверное повышение среднего показателя активности спонтанного фибринолиза при сопоставлении с исходным уровнем.

Таблица 2

Ориентировочные показатели коагуляционного гемостаза при действии острой гипоксии

 

 

Сроки исследования

Среднее значение

ретракции кровяного сгустка (%), M±m

Диапазон значения ретракции сгустка

(%), M±m

Среднее значение активности спонтанного фибринолизиса (%), M±m

Диапазон

активности спонтанного фибринолизиса   (%), M±m

Исходное состояние

68,2 ±1,32

73-64

13,23 ±0,28

 

14,4-10,9

Через 3 часа

64,1±1,21*

69-63

14,8±0,31

15,6-11,2

Через 7   часов

69,4±1,28

72-66

13,5±0,26

14,9-10,6

Через 12 часов

74,2±1,35*

79-62

12,8±0,29

14,1-10,9

Через 24 часа

78,6±1,47*

81-59

11,4±0,24

13,6-9,3

После 1 суток

74,5±1,36*

77-67

11,6±0,26

12,8-9,8

После 2 суток

71,7±1,29*

75-66

11,8±0,25

12,2-9,1

После 3 суток

69,3±1,28*

73-63

12,5±0,29

13,1—10,1

После 4 суток

69,1±1,33

70-62

14,1±0,27

13,9-10,8

После 5 суток

67,8±1,34

71-54

13,4±0,26

13,4-9,9

Примечание: n = 50; M - средняя арифметическая величина; m – стандартная ошибка средней арифметической; * - P<0,05 достоверность различий при сопоставлении с исходным уровнем.

Исследование времени свертывания крови имеет важное значение, так как оно отражает общую коагуляционную активность периферической крови независимо от этиологического процесса. Однако значение этого показателя наиболее адекватно в тех случаях, когда отклонение его связано с патологией вторичного характера в качестве сопутствующего признака или как осложнение основного заболевания. Поскольку почти в любой патологии имеют место изменения в динамике окислительного фосфорилирования, как обязательного элемента в механизме патологического процесса, то есть гипоксии в широком ее понимании, не остается сомнения о конкретной роли последнего в регуляции физиологического гомеостаза внутренней среды, следовательно, и системы свертывания крови. Однако влияние гипоксии как фактора, экспрессирующего ферментативный процесс, распространяется на все звенья гемостаза, включая прокоагулянтный, антикоагулянтный и фибринолитический компоненты. Остается открытым вопрос, как реагируют на гипоксию компоненты гемостаза, происходит ли внутренняя перестройка с доминирующей активностью одного звена и подавлением другого. Если допустить такой вариант, то какое место занимают по активности прокоагуляционная, антикоагуляцинная и, наконец, фибринолизирующая системы. Поэтому для установления ясности в этих вопросах, кроме определения времени свертывания крови, были изучены и активность ретракции кровяного сгустка, и показатели фибринолиза при гипоксии.

В процессе капиллярного свертывания крови происходит образование сгустка крови при участии внутренних и внешних факторов сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, где доминирующую роль играют адгезия, агрегация тромбоцитов и эритроцитов, зафиксированных фибриновыми нитями. Повышение активности тромбоцитарного фактора при барокамерной гипоксии было приведено в нашей предыдущей работе [3], что косвенно указывает на усиление при гипоксии коагуляционного гемостаза [4]. Сокращение времени свертывания крови в условиях кислородного голодания организма отмечено и другими авторами [4-6]. В результате данного исследования нами было отмечено прямо пропорциональное сокращение времени конца свертывания капиллярной крови по мере увеличения срока пребывания животных в барокамере. Свертывание крови в данном случае моделировало образование первичного сосудисто-тромбоцитарного тромба при повышении активности, наряду с тромбоцитарным и эндотелиальным звеньями, гуморальных факторов - адреналина, VIII-плазменнного фактора Виллебранда, III-фактора тромбопластина, а также IV- фактора – ионов кальция [1].

Конец капиллярного свертывания крови отражает начало формирования первичной гемостатической пробки. Однако этот процесс может быть обратимым при активации под влиянием простациклина. Тогда адгезивность тромбоцитов стирается, и кровяной сгусток распадается. Дальнейший процесс формирования необратимого уплотненного сгустка крови происходит только при ретракции его, а также при активации секрета тромбоцитов тромбостенина, когда появляются способные к сокращению фибриновые нити в условиях реализации схемы: протромбин -тромбин-фибриноген- фибрин. Гипоксическое состояние сопровождается повышением содержания в крови ионов кальция, медиаторов тромбоксана и простагландина I2 (простациклина). В норме действие простагландинов доминирует над эффектом тромбоксана, тогда прилипчивость, а также тенденция к скучиванию тромбоцитов не наблюдаются. Однако в условиях кислородного голодания ситуация может изменяться в противоположном направлении: функциональная эффективность тромбоксана оказывается выше, чем таковая простациклина, тогда усиливается адгезивность и агрегация тромбоцитов, что способствует в результате усилению прокоагуляционного эффекта. Этому способствует и повышение содержания ионов кальция, которое наблюдается при гипоксии. Дефицит кислорода в организме также приводит к возбуждению симпато-адреналовой системы, что сопровождается доминированием активности прокоагуляционной системы [1]. Данный процесс подтверждается результатами наших исследований – сокращением конечного времени капиллярного свертывания крови и повышением активности ретракции кровяного сгустка в условиях барокамерной гипоксии.

Сохранение адекватных реологических свойств крови обеспечивается равновесием между прокоагуляционной и антикоагуляционной системами. В роли антикоагуляционной системы важную роль играет фибринолитическая система. Логично допустить, что выявленные нами сдвиги со стороны фибринолиза во время опытов обусловлены дефицитом процесса оксигенации ферментативного превращения плазминогена в плазмин. Что касается неферментативных путей снижения активности фибринолиза, то их также можно связать со снижением синтеза АТФ в процессе секреции биогенных аминов, участвующих в динамике фибринолиза, в условиях острой гипоксии.

Выводы

  1. Время свертывания капиллярной крови в условиях барокамерной гипоксии постепенно снижалось с максимальным выражением к концу 24 часов опыта. Возвращение к исходному состоянию данного показателя также происходило постепенно, нормализация наступила лишь на 4-5-е сутки. Свертывание крови происходило по схеме развития сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
  2. Ретракция кровяного сгустка по мере удлинения срока пребывания животных в барокамере повышалась и максимального значения достигала через 24 часа. Функциональная эффективность тромбоксана оказалось выше таковой простациклина. Возвращение к исходному уровню происходило на 4-5-е сутки после опыта.
  3. Активность фибринолиза крови под действием барокамерной гипоксии имела тенденцию к снижению. Выявленные сдвиги со стороны фибринолиза, очевидно, обусловлены дефицитом процесса оксигенации ферментативного превращения плазминогена в плазмин. Таким образом, в целом обозначился прокоагуляционный эффект гипобарической гипоксии.    

Библиографическая ссылка

Еникеев Д.А., Хисамов Э.Н., Еникеев О.А., Хисамов Э.Э., Фаюршин А.З., Лашин А.А. ОСОБЕННОСТИ ОРИЕНТИРОВОЧНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КОАГУЛОГРАММЫ КРОЛИКОВ В УСЛОВИЯХ ОСТРОЙ БАРОКАМЕРНОЙ ГИПОКСИИ // Современные проблемы науки и образования. – 2019. – № 6. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=29392 (дата обращения: 28.03.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674