Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ КРИТЕРИЙ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ В РАЗВИТИИ ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДОВ

Друккер Н.А. 1 Селютина С.Н. 1 Каушанская Л.В. 1 Ганиковская Ю.В. 1
1 «Ростовский государственный медицинский университет» Минздрава России (Научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии)
Проведено определение диагностических маркеров формирования акушерской патологии. Изучен в сыворотке крови беременных количественный критерий клеточного биорегулятора контрактильной активности матки – фактора некроза опухоли (ФНО) в развитии преждевременных родов в определенные сроки беременности. В работе изучена одна из функций указанного цитокина при рассмотрении ранних преждевременных родов (РПР) в 28-32 недели и 6 дней и преждевременных родов (ПР) в 34-36 недель и 6 дней. При этом определяли содержание мембранного белка аннексина-5 (АН-5)-известного сосудистого антикоагулянта, а следовательно - биохимического маркера доклинической стадии заболеваний эндотелиальных сосудов. Под наблюдением находились 134 соматически здоровых беременных женщин. Пациенток стратифицировали на три группы: с РПР - 45 женщин (I группа), с ПР - 42 женщины (II группа) и со своевременными родами (СР) – 47 женщин (III группа). Материалом служила сыворотка крови, полученная методом венепункции в I периоде родов. Количество ФНО и аннексина определяли с применением твердофазного иммуноферментного анализа с использованием тест-систем. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощтю пакета прикладных программ Microsoft Exel 2000 n Statistica 6.0 Заключение. Полученные данные свидетельствуют, что в определенные сроки беременности количественный критерий ФНО играет существенную роль в развитии преждевременных родов и может быть использован в условиях сложной клинической ситуации акушерами для диагностики ПР. Так, низкий уровень ФНО (38,95 пг/мл) лежит в основе РПР (28-32 недели и 6 дней), а высокий (77,75 пг/мл) – при ПР в 34-36 недель и 6 дней.
преждевременные роды
ранние преждевременные роды
фактор некроза опухоли
аннексин (липокортин)
сыворотка крови
1. Горина К.А., Ходжаева З.С., Белоусов Д.М., Баранов И.И., Гохберг Я.А., Пащенко А.А. Преждевременные роды: прошлые ограничения и новые возможности // Акушерство и гинекология. 2020. № 1. С. 12-19. DOI: 10.18565/aig.2020.1.12-119.
2. Друккер Н.А., Селютина С.Н., Ермолова Н.В., Чикин А.Л., Палиева Н.В. Значение оксида азота и кахектина в патогенезе преждевременных родов // Акушерство и гинекология. 2020. № 3. С. 72-78. DOI: 10.18565/aig. 2020.3.72-78.
3. Курочка М.П., Волокитина Е.И., Бабаева М.Л., Волдохина Э.М., Маркина В.В. Сравнительная характеристика преждевременных родов // Акушерство и гинекология. 2019. № 12. С. 76-82. DOI: 10.18565/aig.2019.12.76-82.
4. Искендеров Б.Г. Артериальная гипертензия и метаболизм кальция: монография. Пенза, 2010. 225 с.
5. Акушерство: национальное руководство / Под ред. Г.М. Савельевой, Г.Т. Сухих, В.Н. Серова, В.Е. Радзинского. М.: Изд-во ГЭОТАР-Медиа, 2018. 88с. (Серия «Национальное руководство»).
6. Друккер Н.А., Погорелова Т.Н., Авруцкая В.В., Васильченко С.Г., Дурницына О.А. Способ диагностики плацентарной недостаточности инфекционно-воспалительного генеза в сроке 34-36 недель беременности // Патент РФ № 2699666 Патентообладатель ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет». 2019. Бюл. № 25.
7. Падруль М.М. Преждевременные роды: монография. Пермь: ГБОУ ВПО ПГМУ им. акад. Е. А. Вагнера, 2015. 132 с.
8. Друккер Н.А., Дурницына О.А., Никашина А.А., Селютина С.Н. Диагностическая значимость А-1-микроглобулина в развитии преждевременных родов // Акушерство и гинекология. 2019. № 1. С. 81-85.
9. Друккер Н.А., Погорелова Т.Н., Авруцкая В.В., Васильченко С.Г., Дурницына О.А. Способ диагностики плацентарной недостаточности инфекционно-воспалительного генеза в сроке 34-36 недель беременности // Патент РФ № 2699666 Патентообладатель ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет». 2019. Бюл. № 25.
10. Никашина А.А., Григорьянц А.А., Смолянинов Г.В., Дегтярева А.С., Селютина С.Н., Ерджанян Л.Л. Роль тиоловых соединений и релаксантов сыворотки крови, амниотической жидкости в развитии преждевременных родов // Обмен веществ при адаптации и повреждении. Дни молекулярной медицины на Дону: материалы XVII Российской научно-практической конференции с международным участием (г. Ростов-на-Дону, 25 мая 2018 г.). Ростов н/Д: Издательство РостГМУ, 2018. С. 46-48.
11. Эмануэль В.Л., Мнускина М.М., Смирнов А.В., Панина И.Ю., Румянцев А.Ш., Васина Е.Ю., Васина Л.Б. Аннексин-5 – биохимический маркер ранних сосудистых нарушений при хронической болезни почек // Клиническая лабораторная диагностика. 2013. № 4. С. 9-10.
12. Боташева Т.Л., Радзинский В.Е., Хлопонина А.В., Васильева В.В., Заводнов О.П., Железнякова Е.В., Саргсян О.Д. Пол плода в экспрессии ангиогенных факторов и поддержании цитокинового баланса в материнском организме при физиологической беременности и плацентарной недостаточности // Медицинский вестник Северного Кавказа. 2019. Т. 14. № 2. С. 325-329.
13. Тамразян А.А., Макаров О.В., Керчелаева С.Б., Бурденко М.В. Прогностическая значимость антител к аннексину-5 в развитии осложнений беременности и родов // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина, 2011. С. 366-372.
14. Падруль М.М., Олина А.А., Кляусова Е.Г., Садыкова Г.К. Профилактика преждевременных родов в первом триместре беременности // Акушерство и гинекология. 2015. № 10. С. 107-111.

Высокая частота перинатальной и младенческой смертности в значительной степени обусловлена преждевременными родами (ПР). Для уточнения некоторых звеньев патогенеза ПР необходимы отсутствующие пока сравнительные исследования сыворотки крови рожениц в зависимости от срока гестации [1-3]. Активность клеточной функции наступает в ответ на изменения концентрации ионов кальция в цитозоле покоящейся клетки, которая в 10 000 раз ниже, чем его концентрация во внеклеточной среде. При закрытии Са2+ каналов плазматической мембраны ионы кальция выходят из цитозоля, предотвращая избыточное попадание их в клетку. Поступление в клетку Са2+ приводит к увеличению его концентрации до определенного уровня и тем самым к запуску сокращения миометрия [4].

Обнаружение в крови беременной женщины фактора некроза опухоли (ФНО) свидетельствует о каких-либо воспалительных процессах, обусловленных бактериальными компонентами [5; 6]. Определенная роль здесь принадлежит модификации уровня ФНО, способствующей изменению физиологического состояния внеклеточного и внутриклеточного кальция. При этом высокое содержание ФНО вызывает открытие Са2+ каналов мембраны, а низкий уровень его задерживает выход ионов кальция из клетки [7]. Особенности функции ФНО в регуляции Са2+ в клетках обусловили его исследование в сыворотке крови рожениц с ранними преждевременными родами – 28-32 недели и 6 дней (РПР) и преждевременными родами – 34-36 недель и 6 дней [8].

В настоящей работе продолжено изучение функции ФНО при различных сроках названной патологии и определение содержания мембранного белка аннексина-V (АН-V), который относится к эндотелиальным факторам, представленным в основном в эндотелии клеток и плаценте [9; 10]. Повышение уровня аннексина будет способствовать ингибированию прокоагулянтной и провоспалительной активности клеток и, следовательно, эндотелия. Увеличение в крови концентрации аннексина-V обусловливает изменение эндотелия путем активации апоптоза, что приводит к нарушению микроциркуляции. Доказано, что при физиологической беременности этот белок предотвращает тромбообразование на поверхности трофобласта, в результате чего обеспечивается необходимое кровоснабжение плода. Существенной функцией аннексина является участие его в процессе связывания фосфолипидов, образуя «щит» вокруг определенных фосфолипидов, блокируя их вступление в реакцию коагуляции. При этом большое количество молекул, расположенных на клеточных мембранах, ускоряет реакцию коагуляции. Это приводит к необычному свертыванию крови, развивается антифосфолипидный синдром. Наряду с этим именно аннексин необходим для качественной передачи сигналов между клетками. У человека этот мембранный белок находится внутри клетки, в то же время он обнаруживается и вне её, в частности в крови. Основной функцией аннексина-V является его мощная антикоагулянтная способность.

Обнаружение в крови беременных антител к аннексину свидетельствует о развитии в организме нарушений процесса свертывания её и повышении риска формирования тромбов в кровеносных сосудах, что требует необходимого контроля накопления их уровня [11].

У женщин с привычным невынашиванием беременности возникает необходимость определения аннексина в практике для обследования беременных. Растворимая форма аннексина-V рассматривается как маркер апоптоза клеток плаценты, что индуцирует развитие процесса важнейшего осложнения беременности - фетоплацентарной недостаточности (ФПН) при гестации. В связи с вышеизложенными фактами о функции аннексина нам представлялось целесообразным выяснение особенностей наличия АН-V в сыворотке крови женщин при различных сроках преждевременных родов.

Цель исследования. Изучение роли количественного критерия ФНО и аннексина-V в разные сроки преждевременных родов (ПР).

Материал и методы исследования. Научное исследование выполнялось по основной специальности «Акушерство и гинекология» – 040101 и финансировалось как плановое государственное задание по теме НИР № 056 00144-18-00 от 26.12.2017 г.

Из поступивших в родильное отделение НИИАП беременных были выделены в проспективное исследование 134 соматически здоровые женщины с преждевременными и своевременными родами. Критерием включения был характер родов. Пациенток стратифицировали на три группы: с ранними преждевременными родами (РПР) 28-32 недели и 6 дней и преждевременными родами в 34-36 недель и 6 дней, а также - своевременными родами (СР), что отражено в таблице 1. Критериями исключения из имеющейся выборки являлись: возраст рожениц старше 40 лет, многоплодная беременность, острая фаза и обострение хронических инфекционных заболеваний.

Всем беременным женщинам выполнялось стандартное обследование. До начала эксперимента получили информированное согласие пациенток включиться в исследование с использованием их биопроб.

Таблица 1

Схематическое описание исследования

№№

п/п

Группы рожениц

Срок

родов (недели)

Кол-во

женщин (n)

I

Ранние преждевременные роды

 

28–32

45

II

Преждевременные роды

 

34–36

42

III

Контрольная группа - своевременные роды

38–40

47

Возрастной состав 47 пациенток контрольной группы был в пределах 24-28 лет. Массо-ростовые показатели новорожденных были в норме, и состояние их по шкале Апгар соответствовало 8-9 баллам. У 27 (60%) женщин послеродовый период протекал без осложнений, первобеременные составили 61,7% (29), повторнобеременные – 38,3% (18). Все женщины данной группы оказались первородящими. Оперативное родоразрешение было значительно реже (в двух случаях), чем у женщин I-II групп. Во II группе 20 первобеременных и 22 повторнобеременные составили 48,0% и 52,3% соответственно. В этой группе было 24 (57,1%) повторнородящих женщины. Оперативно были родоразрешены 16 (38,0%) беременных. Контрольная группа представлена 27 женщинами в возрасте 30-39 лет. В группе первобеременные составили 61,70% (29), а повторнобеременные - 38,3% (18). 24 женщины (57,1%) с ПР (I-II группы) были повторнородящими, остальные - первородящими. Сопоставление характера родов показало, что чаще оперативное родоразрешение было у женщин этих групп.

У женщин I и II групп с ПР масса тела младенцев была в пределах 2000-2500 г. Характеристика массо-ростовых показателей у новорожденных этих групп в 31,1% (32) свидетельствовала о наличии низкой массы тела, а у 9,2% (8) - экстремально низкой массы тела. Состояние 12 (13,8%) новорожденных по шкале Апгар в I и II группах было оценено ниже 5 баллов. Было установлено, что анамнестические данные, относительно акушерской патологии, свидетельствуют о наличии неразвивающейся беременности, самопроизвольных абортов, преждевременных родов - встречались чаще, чем в контрольной группе. Были установлены хронические воспалительные заболевания, перенесенные женщинами до наступления данной беременности.

У рожениц I и II клинических групп инфекционный статус нижнего генитального тракта характеризовался дисбиозом цервикального канала, кольпитом, ИППП, эндоцервицитом, превышая таковой процент у пациенток контрольной группы. 32 (71,1%) беременных I группы страдали эндоцервицитом, дисбиозом цервикального канала - 29 (64,4%), кольпитом - 16 (44,4%). Эти показатели наблюдались чаще в 3,3 и в 6,4 раза, чем у рожениц III (контрольной) группы. Что касается II клинической группы, то частота ИППП выявлена в 23,8% (10), дисбиоз цервикального канала в 59,5% (25), эндоцервицит – у 24 беременных (57,1%).

Особого внимания заслуживает характер экстрагенитальных заболеваний наблюдаемых беременных. В I группе имели место сердечно-сосудистые заболевания в 11,1% (5) и во II группе – в 9,5% (4), заболевания желудочно-кишечного тракта в I группе – 11,1 (5), во II – 7,1% (3). У пациенток I и II групп обнаружены хронический цистит и пиелонефрит у 42,9% и 44,4% соответственно. Осложнения в период данной беременности установлены в виде угрозы ее прерывания у женщин I группы в 73,3% (33) и во II группе – в 57,1% (24). У 32 (71,1%) беременных диагностирована ФПН, во II группе у 18 (42,9%), умеренная преэклампсия у 40,0% женщин I группы, что в 3 раза чаще, чем у пациенток II группы. В I группе беременных отмечена анемия в 68,9% случаев, многоводие у 24,4% (11), ЗРП в 8,9% (4). Во II группе пациенток многоводие выявлено в 21,4% (9), ЗРП имела место у 8 человек и составила 19,0%.

Первая группа состояла из 45 (100%) первородящих беременных. Во вторую группу включены 18 (42,9%) первородящих и 24 (57,1%) повторнородящие женщины. В процессе родов в обеих группах пациенток оперативное родоразрешение проведено чаще по сравнению с контролем. В I группе 37,8% (17) новорождённых имели очень низкую массу тела и низкую массу тела - 31,1% (14), экстремально низкую - 8,9% (4), состояние с оценкой по шкале Апгар меньше 5 баллов в 27,6% (12) случаев. У 90,1% (38) новорождённых II группы масса тела была в пределах от 2000 до 2500 г, и оценка состояния по шкале Апгар в 21,5% (9) случаев достигала 9 баллов.

При анализе анамнестических данных выявлено, что у пациенток I и II групп неразвивающиеся беременности (30%), самопроизвольные аборты (41%), преждевременные роды встречались чаще (57%), чем в контрольной группе. Преждевременные роды (ПР) в анамнезе имели место как у женщин I группы – 11,11% (5), так и во II клинической группе – 16,6% (7). Данный анамнестический факт повышал риск развития ранних преждевременных родов (РПР) в 1,74 раза (95%), а преждевременных родов (ПР) в 2 раза (95%). Структура перенесенных гинекологических заболеваний женщин позволила установить, что хронические воспалительные заболевания органов малого таза в I и II группах регистрировались чаще, чем в контрольной группе. Наряду с этим проведен анализ инфекционного статуса нижнего генитального тракта рожениц всех клинических групп. Дисбиоз цервикального канала, кольпит, ИППП, эндоцервицит присутствовали приблизительно в одинаковом процентном случае у женщин I и II групп, превышая таковой процент встречаемости у пациенток контрольной группы. Так, эндоцервицит у рожениц I клинической группы встречался в 71,1% случаев (32), что повышало риск развития ранних преждевременных родов в 3,7 раза (95% ДИ 2,238-5,984). Дисбиоз цервикального канала у пациенток I клинической группы отмечен в 64,4% случаев (29), кольпит обнаружен в 44,4% (16), что в 3,3 и 6,4 раза соответственно чаще, чем у рожениц третьей группы. Что касается пациенток II клинической группы, то частота встречаемости дисбиоза, кольпита, эндоцервицита, ИППП также превышала частоту их присутствия у рожениц контрольной группы: дисбиоз цервикального канала выявлен в 59,5% (25), ИППП – в 23,8% (10), эндоцервицит – в 57,1% случаев (24).

Экстрагенитальные заболевания выявлены у ряда обследованных женщин всех групп. Заболевания сердечно-сосудистой системы имели место у беременных I группы - 11,1% (5) и во II группе – в 9,5% (4), а по заболеваниям желудочно-кишечного тракта в I группе – 11,1% (5), во второй группе – 7,1% (3). Хронический пиелонефрит и цистит были выявлены у женщин I и II групп – 44,4%; 42,9%. Характер течения беременности свидетельствовал о наличии угрозы её прерывания у женщин I группы в 73,3% (33) и во II группе – 57,1% (24). Также диагностирована ФПН у 71,1% (32) обследованных в I группе, у 18 (42,9%) – во II группе, умеренная преэклампсия у 40% I группы, что в 3 раза чаще, чем у женщин II группы. При этом многоводие зарегистрировано у беременных I группы в 24,4% (11), во II группе - в 21,4% (9); задержка роста плода (ЗРП) у первых диагностирована в 8,9% (4), во II группе – в 19,0% (9); анемия имела место у пациенток I группы в 68,9% (31), а во II группе – в 19,1% (8). Количественный показатель выявленных осложнений беременности у женщин I группы был в 2 раза выше, чем во II группе. В период родов у рожениц наблюдался преждевременный разрыв плодных оболочек: в I группе в 37,8% (17), во второй – 57,1% (24). Острый дистресс плода встречался в I группе в 26,0% случаев (12), во II группе - в 7,14% (3), что почти в 4 раза чаще. У 13,3% женщин I группы имела место отслойка нормально расположенной плаценты. Выявленная частота осложнений беременности у женщин обеих групп была практически одинаковой.

Уровень ФНО у беременных женщин определяли в сыворотке крови, полученной методом венепункции в I периоде родов. Женщины с РПР находились в латентной или активной фазе раскрытия шейки матки. Пациентки со срочными родами (СР) были в активной фазе родов. Применяли твердофазный иммуноферментный анализ с использованием тест-систем Red&systems (USA) и многофункционального счётчика для иммуноферментных методов с программным обеспечением (Victor «Finnland»). Определение аннексина проводили иммуноферментным методом наборами фирмы Cytimmune systems (USA). Статистическую обработку данных осуществляли с помощью лицензионного пакета программ Statistica 5.1 (StatSoft, США). Для оценки статистической значимости использовали критерий Стьюдента (t-критерий) и непараметрический критерий Манна-Уитни (U-критерий). Достоверными считались различия при р < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение. Полученные нами данные демонстрируют разнонаправленные изменения продукции ФНО в случаях преждевременных родов. Уровень ФНО в сыворотке крови женщин с РПР был снижен в 1,35 раза (р < 0,001) относительно данных у беременных контрольной группы (№ 3), а аннексина – повышен в 1,18 раза (р < 0,001) (табл. 2). При этом у рожениц с ПР в 34-36 недель и 6 дней выявлен повышенный в 2,25 раза (р2 < 0,001) уровень ФНО.

Модификация продукции ФНО способствует изменению содержания внутриклеточного и внеклеточного кальция. Известно, что функция ФНО состоит в контроле кальциевых каналов плазматической мембраны. При высоком уровне ФНО у беременных с ПР 34-36 недель и 6 дней этот цитокин осуществляет их открытие. Это способствует избыточному поступлению ионов кальция в клетки миометрия [12-14]. Таким образом, при ПР повышение уровня ФНО в сыворотке крови обусловливает сокращение миометрия, происходящее в результате нарастания содержания внутриклеточного кальция.

ФНО в условиях РПР при низком количественном его содержании (38,95 пкг/мл) относительно своевременных родов (ФНО) обусловливает накопление Са2+ в клетках миометрия, за счет снижения его выхода из клетки. При высоком содержании ФНО (77,75 пкг/мл) у женщин с ПР в 34-36 недель и 6 дней происходит открытие кальциевых каналов, вследствие чего наблюдается значительное поступление Са2+ в клетки. Данный эффект нарастания Са2+, также реализуется в активации сокращения миометрия.

Таблица 2

Содержание клеточных биорегуляторов в сыворотке крови женщин с преждевременными и своевременными родами

п/

п

 

Показатели

клеточных

биорегуляторов

Преждевременные роды

(клинические группы)

Своевременные роды

СР

(контрольная группа)

(n=47)

 

р1

 

р2

РПР

28-33 недели и 6 дней

(n=45)

ПР

34-36 недель

и 6 дней

(n=42)

I группа

II группа

III группа

1

ФНО

(пкг/мл)

38,95*

(36,9; 40-35)

77,75**

(75,6; 81,7)

52,70

(50,9; 53,8)

 

<0,001

 

<0,001

2

Аннексин-V

(пкг/мл)

0,78 *

(0,69; 0,88)

0,75**

(0,65;0,90)

0,66 (0,59;0,77)

 

0,000

 

0,001

Примечание: * − достоверность различий (р1 -РПР и р2 -ПР) относительно группы сравнения.

У беременных при РПР (28-33 недели и 6 дней) был выявлен сниженный уровень ФНО. Это свидетельствует о наличии другой метаболической ситуации, когда в большей степени имело место нарушение процесса элиминации Са2+ из клеток. Уровень аннексина-V у обследуемых женщин оказался достоверно выше контрольных величин (р<0,001) в обеих группах: при РПР в 1,18 раза и при ПР - в 1,14 раза, что свидетельствовало об улучшении эндотелиальной функции. Это заключение обусловлено тем, что в случае снижения содержания аннексина-V в сыворотке крови при ПР, на поверхности ворсинок развиваются тромбозы и инфаркты плаценты. В нашем исследовании при ПР в обеих группах обнаружен повышенный уровень аннексина-V в крови. С учетом его метаболических особенностей у наблюдаемых пациенток тромбообразования не происходило. Очевидно, что повышение уровня аннексина-V препятствовало свертыванию крови (антикоагулянтный эффект), связываясь с фосфолипидами клеточных мембран плаценты, улучшая её кровоснабжение.

Выводы. Низкий уровень ФНО (38,95 пкг/мл) и повышенное содержание аннексина-V (0,78 пг/мл) лежат в основе ранних преждевременных родов (28-32 недели и 6 дней), а высокие значения ФНО (77,75 пкг/мл) и аннексина–V (0,75 пкг/мл) являются факторами развития преждевременных родов (34-36 недель и 6 дней). Сделали заключение, что количественный критерий ФНО играет существенную роль в развитии преждевременных родов в определенные сроки беременности и может быть использован акушерами в условиях сложной клинической ситуации для диагностики данной патологии.


Библиографическая ссылка

Друккер Н.А., Селютина С.Н., Каушанская Л.В., Ганиковская Ю.В. КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ КРИТЕРИЙ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ В РАЗВИТИИ ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДОВ // Современные проблемы науки и образования. – 2021. – № 1.;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=30509 (дата обращения: 28.07.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074