Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

КОБАЛЬТ-СВЯЗЫВАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ КАК МАРКЕР ИШЕМИИ МИОКАРДА У ПАЦИЕНТОВ, ПЕРЕНЕСШИХ АОРТОКОРОНАРНОЕ ШУНТИРОВАНИЕ

Лопатин Ю.М. 1 Литус Е.А. 2 Зайцев В.Г. 2 Островский О.В. 2 Дронова Е.П. 1 Подворчан М.А. 1 Трифонова А.Н. 3 Костерина Н.С. 4
1 ГБУЗ "Волгоградский областной клинический кардиологический центр"
2 ГОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет», г. Вогоград
3 ГБУЗ "Волгоградский облостной клинический кардиологический центр"
4 ГОУ ВПО Волгоградский государственный медицинский университет
Аортокоронарное шунтирование (АКШ) сопряжено с риском развития таких угрожающих жизни состояний, как стенокардия и инфаркт миокарда. Мы полагаем, что ишемически модифицированный альбумин (ИМА), как маркер ишемии миокарда, позволит оценить степень сердечной ишемии в послеоперационном периоде. Повышение уровня ИМА пропорционально снижению кобальт-связывающей способности (КСС) сыворотки крови пациента. Целью нашей работы стало определение изменения КСС образцов сыворотки крови пациентов, перенесших плановое АКШ, в течение послеоперационного периода. В исследование было включено 12 пациентов. Определение КСС и уровня гемоглобина проводили перед операцией, на 3–5-й день после операции и непосредственно перед выпиской. Оба показателя после операции снижались в сравнении с их предоперационными значениями. На момент выписки уровень КСС возвращался к первоначальному. Содержание гемоглобина также нормализовалось, но было ниже дооперационного. Между показателями была обнаружена статистически значимая корреляция. Таким образом, уровень КСС позволяет оценить степень послеоперационной миокардиальной ишемии.
гемоглобин.
ишемия миокарда
анемия
аортокоронарное шунтирование
кобальт-связывающая способность
1. Литус Е.А. Разработка протокола определения кобальт-связывающей способности крови / Е.А. Литус, В.Г. Зайцев, О.В. Островский // КЛД. – 2008. – № 9 – С. 51.
2. Островский О.В. Лабораторные маркеры повреждения миокарда в современной кардиологии // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. – 2009. – № 1. – С. 11–15.
3. Bar-Or D., Lau E., Winkler J.V. A novel assay for cobalt-albuming binding and its potential as a marker for myocardial ischemia – a preliminary report / D. Bar-Or, E. Lau, J.V. Winkler // J. Emerg. Med. – 2000. – V. 19. – № 4. – P. 311–315.
4. DerVartanian D.V., Chenoweth M.R. Rapid and accurate colorimetric determination of nickel and cobalt in protein solutions : Patent 6020204, 1.02.2000.
5. Effects of balloon occlusion during percutaneous coronary intervention on circulating Ischemia Modified Albumin and transmyocardial lactate extraction / M.K. Sinha, J.M. Vazquez, R. Calvino, D.C. Gaze, P.O. Collinson and J.C. Kaski // Heart. – 2006. – V. 92. – № 12. – P. 1852–1853.
6. Guidance for industry Q2B validation of analytical procedures: Methodology // ICH. – 1996. URL: http://www.fda.gov/downloads/Regulator%20yInformation/Guidances/UCM128049.pdf (дата обращения 26.11.11).
7. Ischemia Modified Albumin Is a Sensitive Marker of Myocardial Ischemia After Percutaneous Coronary Intervention / M.K. Sinha, D.C. Gaze, J.R. Tippins., P.O. Collinson, J.C. Kaski // Circulation. – 2003. – V. 107. – № 19. – 2403–2405.
8. The ischemia-modified albumin in relation to pacemaker and defibrillator implantation / E. Sbarouni, P. Georgiadou, D. Panagiotakos, E. Livanis, G.N. Theodorakis, D.T. Kremastinos // Pacing Clin Electrophysiol. – 2008. – V. 31. – № 1. – P. 83–87.
9. Wu A. New biochemical markers of ischemia: What markers are being investigated and how do they work? // International workshop on ischemia. – Barcelona, Spain, 2002 – P. 18–20.
10. Zaja J. Venous oximetry // Signa Vitae. – 2007. – V. 2. – № 1. – P. 6–10.
Введение. Аортокоронарное шунтирование (АКШ), как и любая операция, сопряжено с целым рядом рисков. Операция на сердце неизбежно сопряжена с его повреждением во время или после проведения операции. Поэтому мониторинг состояния пациента после проведения данной операции, безусловно, является неотъемлемой частью реабилитационного периода. Известно большое число маркеров, свидетельствующих о существовании либо риске развития поражения миокарда [2], однако у таких пациентов важна оценка именно степени ишемии миокарда. Но золотого стандарта для выявления ишемических изменений кардиомиоцитов до их некроза в настоящий момент не существует. В США и странах ЕС разрешен единственный лабораторный тест для определения ишемически модифицированного альбумина (ИМА), позволяющего судить о степени ишемизации сердечной мышцы [3]. Этот тест основан на предположении, что сывороточный альбумин при контакте с ишемизированной тканью миокарда полностью или частично теряет способность связывать Со2+ [9]. Таким образом, фактически определение содержания ИМА оценивается по степени снижения кобальт-связывающей способности (КСС) сыворотки крови. Было показано, что у пациентов, перенесших ту или иную операцию на сердце, повышен уровень ИМА [4; 5; 7; 8]. Это повышение было зафиксировано в течение короткого периода после операции (максимальный период составил 48 ч, по данным [8]). Однако в этих работах не проводилась оценка уровня ИМА после операции в среднесрочной перспективе (более 1 недели). Мы полагаем, что динамика показателя, характеризующего выраженность ишемии миокарда, могла бы оказаться полезной в оценке течения послеоперационного периода.

Целью нашей работы было определение изменения КСС сыворотки крови пациентов, перенесших плановое АКШ, в течение послеоперационного периода.

Материалы и методы. В исследование были включены 12 пациентов, госпитализированных в ГУЗ «Волгоградский областной клинический кардиологический центр» для планового проведения АКШ. Всем пациентам проводилось АКШ по показаниям при наличии стеноза 50% и более хотя бы одной коронарной артерии. Забор венозной крови производился за 1-3 дня до операции, на 3-й день после операции и перед выпиской (медиана неосложненного послеоперационного периода 15,5; 95% доверительный интервал (ДИ) [14-18] дней, срок госпитализации свыше 20 дней был у 1 пациента). Из образцов крови получали сыворотку  и замораживали при -20 °С до дня проведения анализа. Все биохимические анализы проводились в течение 2 ч после оттаивания образцов сыворотки. Повторное замораживание образцов не допускалось.

Исследование проведено с соблюдением всех этических норм.

В исследуемых образцах сыворотки проводилось определение КСС по разработанному нами протоколу [1]. Метод основан на способности сывороточного альбумина связывать Со2+ [3], при этом содержание свободных Со2+ можно определить по образованию окрашенного комплекса с дитиотрейтолом (ДТТ) [4]. Определение проводилось следующим образом. 60 мкл 2,5 мМ СоSO4 смешивали с 600 мкл 0,85% хлорида натрия, затем добавляли 200 мкл сыворотки. После пятиминутной инкубации при комнатной температуре приливали 250 мкл реактива, содержащего 7 мМ ДТТ, 25 мМ HEPES/KOH, рН 7,4, и 0,85% NaCl. Строго через 2 мин измеряли оптическую плотность при длине волны 495 нм против холостой пробы, не содержавшей сыворотки и раствора соли кобальта, на двухлучевом спектрофотометре Thermo Fisher Sсientific Helios α. В качестве калибратора использовали растворы сульфата кобальта с различной концентрацией. КСС выражали в ммоль Со2+/л сыворотки. Предел обнаружения (limit of detection, LOD) и предел надежного количественного обнаружения  (limit of quantification, LOQ), рассчитанные в соответствии с рекомендациями Международной конференции по гармонизации (The International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use, ICH) [6], составили 0,000569 и 0,001724 ммоль Со2+/л. Аналитическая вариабельность, рассчитанная как коэффициент вариации, в условиях повторяемости не превышала 3%, в условиях воспроизводимости 2,3%.

В образцах крови пациентов дополнительно определяли уровень гемоглобина на автоматическом гематологическом анализаторе фирмы Sysmex kx-21n.

Все статистические расчеты проводили с использованием пакета программ Statistica 6.0 (StatSoft, Inc., США).

Результаты и обсуждение. Поскольку хирургическое вмешательство предполагает усиление гипоксии миокарда, мы проанализировали образцы сыворотки, взятые перед проведением операции и на 3-5-е сутки после АКШ (рис. 1). Было обнаружено статистически значимое снижение КСС на 3-5-й день после АКШ (р<0,009, по критерию Вилкоксона с поправкой Бонферрони), что говорит о повышении ИМА и о наличии ишемии миокарда, которая сохраняется в указанном послеоперационном периоде.

pic 

Рис. 1. Динамика изменения кобальт-связывающей способности сыворотки крови пациентов до и после аортокоронарного шунтирования (в послеоперационном периоде). Результаты представлены в виде медиан, 95% ДИ для КСС до АКШ составил 0,582-0,906; после АКШ - 0,455-0,641; выписка - 0,536-0,684 ммоль Со2+/мл сыворотки.

В послеоперационном периоде произошло повышение уровня КСС сыворотки крови с 0,51 95% ДИ [0,455-0,641] ммоль Со2+/л до 0,644 95% ДИ [0,536-0,684] ммоль Со2+/л на момент выписки. Различия между представленными данными статически значимы (р < 0,009, по критерию Вилкоксона с поправкой Бонферрони). Следовательно, в течение послеоперационного периода уровень миокардиальной ишемии снижается, а снабжение миокарда кислородом нормализуется. При этом надо отметить, что величина КСС на момент выписки пациента не отличалась от исходного уровня.

Результаты определения гемоглобина крови показали, что в раннем постоперационном периоде наблюдалось  статистически значимое снижение его уровня (p<0,007, по критерию Вилкоксона с поправкой Бонферрони) (рис. 2).

 pic

Рис. 2. Динамика изменения гемоглобина крови пациентов до и после аорто-коронарного шунтирования (в послеоперационном периоде). Результаты представлены в виде медиан, 95% ДИ для гемоглобина до АКШ составил 144-164; после АКШ - 103-114,8; выписка - 119-139 г/л.

К концу реабилитации наблюдалась неполная нормализация показателя, в отличие от КСС (наблюдались достоверные отличия от послеоперационного и базового уровня показателя - р = 0,01 для обоих случаев). Согласно одному из основных уравнений оксиметрии снижение уровня гемоглобина на 50% ведет к снижению содержания кислорода крови вдвое [10]. В нашем случае статистически значимая разница в до- и послеоперационном уровнях гемоглобина составила 45,25 г/л (на 29,4%), что в свою очередь привело к снижению содержания молекулярного кислорода почти на 30% и, следовательно, к развитию гипоксемии. Уровень гипоксемии довольно значим, что говорит о весьма вероятном развитии анемической гипоксии.

Существует статистическая значимая связь между КСС и гемоглобином корреляции (R = 0,409, p < 0,015, критерий Спирмена).

Заключение. АКШ вызывает детектируемую лабораторными методами приходящую ишемию миокарда в раннем послеоперационном периоде. Однако к концу срока госпитализации лабораторный показатель содержания ИМА нормализуется. Мы считаем, что данный тест может использоваться для оценки вероятности развития ишемии миокарда и нормализации коронарного кровообращения в послеоперационном периоде. Повышение уровня ИМА прямо пропорционально связано со степенью анемии.


Библиографическая ссылка

Лопатин Ю.М., Литус Е.А., Зайцев В.Г., Островский О.В., Дронова Е.П., Подворчан М.А., Трифонова А.Н., Костерина Н.С. КОБАЛЬТ-СВЯЗЫВАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ КАК МАРКЕР ИШЕМИИ МИОКАРДА У ПАЦИЕНТОВ, ПЕРЕНЕСШИХ АОРТОКОРОНАРНОЕ ШУНТИРОВАНИЕ // Современные проблемы науки и образования. – 2011. – № 6.;
URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=5114 (дата обращения: 26.07.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074