Многообразие биологических эффектов цитокинов, их ключевая роль как медиаторов межклеточного взаимодействия в поддержании гомеостаза предполагают участие во многих патологических процессах, в том числе и в развитии бактерионосительства.

В связи с тем, что для цитокинов характерны плейотропность, дублирующие и перекрывающие эффекты, мы решили проанализировать уровень классического провоспалительного цитокина: ИЛ-8 и цитокина, относимого к противовоспалительной группе - ИЛ-10. Кроме того, по общему мнению роль именно этих медиаторов велика в возникновении хронических инфекций. Роль этих цитокинов в бактерионосительстве ранее не рассматривалась [1,2].

В целом об этих соединениях известны следующие факты. ИЛ-8 является, как все интерлейкины, индуцибельным бел­ком. Под воздействием ЛПС, а также ИЛ-1, 3, TNFa и главного комплекса гистосовместимоcти происходит синтез ИЛ-8, и последний может быть обнаружен в культуральной среде через 3 ч после индукции. ИЛ-8 явля­ется хематтрактантом не только для нейтрофильных лейкоци­тов, но и для макрофагов, лимфоцитов и эозинофилов [6,7,11].

Помимо основной функции, ИЛ-8 способствует усилению адгезивных свойств нейтрофилов, генерации активных форм кислорода, активации пентозофосфатного шунта, подъем концентрации внутриклеточного Са²⁺, изменяет форму нейтрофильных лейкоцитов, способствует экзоцитозу. Механизм повышенной адгезивности, как было показано, связан с нарушением экспрессии гликопротеинов СД11 - CD18 на поверхности нейтрофилов [8,9].

Можно сделать вывод, что ИЛ-8 является мощным индуктором острой воспалительной реакции, вызывая миграцию нейтрофилов в очаг проникновения патогена. Однако, судя по тому, что его синтез может происходить под воздействием ИЛ-la и -b, а также TNFa. ИЛ-8 может также играть роль одного из патогенетических звеньев в хроническом воспалении.

Альтернативным регулирующим цитокином для макрофагов является типичный противовоспалительный цитокин IL-10, ко­торый ингибирует все те свойства и функции макрофагов, ко­торые стимулируют g-IFN. Его продуцентами могут быть либо сами моноциты/макрофаги, либо активированные Th2 и, как было показано недавно, активированные Th1. Этот цитокин яв­ляется физиологическим антагонистом и ингибитором синтеза IL-12, ингибирует продукцию g-IFN и весь Th1-ответ. IL-10 ингибирует продукцию макрофагами всех провоспалительных цитокинов (IL-1, IL-6, IL-8, IL-12, TNFa, MIF), экспрессию ре­цепторов TNFa и IL-12 на ЕК. Кроме того, IL-10 ингибирует продукцию и секрецию всех цитокинов всеми Т-хелперами, включая IL-4 и IL-5.

IL-10 ингибирует воспалительный ответ независимо от при­надлежности участвующих в нем клеток к той или иной субпо­пуляции Th. Повышенная чувствительность Thl-клеток к нега­тивной регуляции IL-10 связана с их зависимостью от паракринной регуляции их дифференцировки IL-12, продукцию ко­торого АПК ингибирует IL-10 [5].

Материалы и методы

Определяя уровень цитокинов в сыворотке крови и семенной плазме, мы выделяли группы резидентных и транзиторных носителей. К резидентной группе относятся «злостные» носители, у которых постоянно выделяется стафилококк одних и тех же фаготипов, с множественной антибиотикоустойчивостью. К транзиторной группе относятся носители, у которых также выделяется стафилококк, но фаготипы и количество его меняются [4].

ИЛ 8 и ИЛ 10 определяли с помощью соответствующих «Иммуноферментных тест-систем для количественного определения уровня цитокинов человека в биологических жидкостях и культуральных средах», пр-во: ООО «Цитокин», С.-Петербург, в соответствии с прилагаемой инструкцией.

Результаты и обсуждение

Распределение уровня интерлейкинов в сыворотке крови при различных видах бактерионосительства выглядело следующим образом (таблица 1).

Таблица 1

Содержание ИЛ 8 и ИЛ 10 в сыворотке крови бактерионосителей (М±m, пг/мл)

Нами было определено, что наибольшее отклонение в системе иммунитета вызывает носительство S.aureus транзиторного типа. Уровень ИЛ 10 у таких больных превышает норму в 31,8 раза, а ИЛ 8 - только в 2,6 раза. Для сравнения S.aureus в стадии резервации такой гиперергической реакции со стороны иммунной системы не вызывает, хотя и его показатели значительно выше нормы и преобладание противовоспалительной реакции сохраняется: ИЛ 10 больше нормы в 10,7 раза, ИЛ 8 - в 1,8 раза.

В то же время S.epidermidis обладает, судя по всему, более «скромными» возможностями влияния на систему ИЛ. Так, транзиторные носители имеют показатели, близкие к норме по ИЛ 8 (больше нормальных в 1,3 раза), превышающие по ИЛ 10 в 4,9 раза. Переходя к рассмотрению резидентного носительства S.epidermidis, необходимо отметить, что оно протекает при более чем шестикратном увеличении ИЛ 10 (6,8 раза), росте уровня ИЛ 8 в 2,3 раза, что сопоставимо в абсолютных числах с уровнем резидентного носительства S.aureus.

Было установлено, что при всех вариантах бактерионосительства наибольшие изменения биохимических параметров сыворотки крови в организме больного вызывает присутствие S.aureus. Соотношение ИЛ 8/ИЛ 10 в норме составляет 6,2/1 [9]; однако, у транзиторных носителей золотистого стафилококка оно составило 0,5/1, а у эпидермального - 1,64/1. Таким образом, носительство S.aureus и S.epidermidis достоверно (р<0,001) вызывает дисбаланс в системе интерлейкинов в сторону угнетения воспалительной реакции, что, судя по всему, позволяет микробной клетке спокойно обосноваться в макроорганизме.

При переходе возбудителя обоих типов в стадию резервации, эти нарушения несколько нормализуются, но сохраняются более выраженными у S.aureus (1,03/1), а у S.epidermidis они составляют (2,1/1). Мы полагаем, это связано с тем, что резидентное носительство характеризуется внутриклеточным расположением возбудителя, что исключает его плотный контакт с иммунной системой и, как следствие - постоянной ее стимуляции.

Рассматривая персистенцию стафилококков в мужской репродуктивной системе, также был выявлен ряд особенностей интерлейкинового статуса спермы пациентов в зависимости от вида носительства (таблица 2).

Таблица 2

Уровень ИЛ 8 и ИЛ 10 в спермоплазме обследованных (М±m, пг/мл)

Нами установлено, что независимо от вида носительства, показатели ИЛ 8 превышали нормальные в десятки раз. Резидентное носительство S.aureus сопровождалось увеличением количества ИЛ 8 до 2520 пг/мл, что в 2,87 превышает аналогичный показатель при носительстве S.epidermidis, количество ИЛ 8 при котором составляло 870,7 пг/мл. При этом транзиторное носительство золотистого стафилококка вызывает меньшее повышение ИЛ 8 (578,0 пг/мл), чем эпидермального (1610,0 пг/мл).

В отношении ИЛ 10 мы выявили следующие закономерности: в сперме он был выявлен только у 22,2 % обследованных. При этом у не носителей он не встречался. У носителей S.aureus он также отсутствовал. В сперме резидентных носителей S.epidermidis ИЛ 10 был обнаружен в 20 % и составлял 1,4 пг/мл, а у транзиторных носителей ИЛ 10 присутствовал у 26, 3 % и составлял 2,40 пг/мл.

Заключение

Сопоставляя полученные нами результаты, можно сделать вывод, что носительство эпидермального стафилококка носит более мягкий и предсказуемый характер. В ответ на внедрение чужеродного агента возникает достаточно сильный иммунный ответ, причем провоспалительная реакция уравновешивается противовоспалительными механизмами. При переходе в стадию резервации (резидентное носительство) сила и амплитуда иммунных реакций снижается, что и позволяет возбудителю персистировать. S.aureus же поддерживает гиперэргический характер воспаления, даже переходя к внутриклеточному существованию. Возможно, это связано с отсутствием продукции ИЛ 10 и, как следствие, достаточной презентацией антигенного материала на поверхности макрофагов.

Исследование выполнено при финансовой поддержке РГНФ в рамках проведения научных исследований по проекту № 13-06-00008 «Повышение качества жизни больных хроническим простатитом: медицинский и социальный аспекты».

Рецензенты:

Николаев А.А., д.м.н., профессор, зав. кафедрой общей и биоорганической химии ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, г. Астрахань.

Кривенцев Ю.А., д.м.н., доцент кафедры биохимии с курсом КЛД ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздрава России, г. Астрахань.