В настоящее время вакцинация является основным методом защиты поголовья птицефабрик. В современных условиях производства негативное влияние техногенных факторов способствует развитию иммунодефицитных состояний, что влечет снижение эффективности вакцинации и приводит к «прорыву» иммунитета у птицы [1,8].

В этой ситуации возрастает роль профилактических и лечебных мероприятий, направленных на повышение естественной резистентности птицы, стимуляции их иммунной системы [6]. В связи с этим создание и применение иммуномодуляторов, действие которых направлено на повышение общей резистентности организма птицы, устойчивости его к технологическим стрессам, снятию отрицательного иммунодепрессивного действия вакцинных препаратов, заслуживает пристального внимания [8].

Цель исследований. Изучить влияние препарата Ветостим (ООО «Сиббиотест») на иммунобиологический статус индюшат в системе специфической профилактики Ньюкаслской болезни.

Материалы и методы. Материалом для исследования служили индюшата-бройлеры кросса BIG-6, содержащиеся в одном из птицеводческих хозяйств Омской области. Для проведения эксперимента было сформировано две группы индюшат-бройлеров по 100 голов в каждой. Вес птицы на момент начала эксперимента составлял 50 гр.

Индюшатам первой группы вводили иммуномодулятор Ветостим в дозе 0,1 мг/кг в сочетании с живой вакциной против Ньюкаслской болезни. Вторая группа птиц также была вакцинирована, но без применения Ветостима (контроль).

Препарат применяли методом выпаивания с питьевой водой в сочетании вакциной Авивак-НБ против Ньюкаслской болезни на 14-е и 28-е сутки, согласно схеме вакцинопрофилактики, действующей на данном предприятии. Для этого птица предварительно была отделена от системы поения на 60 минут, после чего была проведена вакцинация.

В течение экспериментальных исследований осуществляли наблюдение за общим состоянием индюшат (внешний вид, оперение, аппетит, подвижность). Через 14 сут. после ревакцинации, у индюшат была получена кровь для гематологических, биохимических и иммунологических исследований, а также для оценки напряженности поствакцинального иммунитета.

С целью оценки иммунного статуса в периферической крови птиц определяли содержание иммунокомпетентных клеток в абсолютном содержании (тыс/мкл): число Т-лимфоцитов с помощью спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-рок), Т-киллеров - непрямого глобулинового розеткообразования с эритроцитами быка (ЕА-рок) и В-лимфоцитов - комплементарного розеткообразования с эритроцитами быка (ЕАС-рок). Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) методом осаждения полиэтиленгликолем (ПЭГ) с молекулярной массой 6000. Функциональную активность лейкоцитов оценивали в тесте с нитросиним тетразолием (НСТ-тест) фотометрическим методом в спонтанном варианте [4].

Гематологические исследования осуществляли общепринятыми методами с последующим выведением лейкоцитарной формулы.

Биохимические показатели сыворотки крови экспериментальных индюшат-бройлеров определяли на биохимическом анализаторе «Screen Master» производства фирмы «Hospitex» (Швейцария, Италия) с использованием реактивов «Hospitex» (Швейцария, Италия). При этом определяли количество общего белка, глобулинов, альбуминов, креатинина и щелочной фосфатазы.

Для оценки напряжённости поствакцинального иммунитета были проведены серологические исследования проб крови (РЗГА). Кровь для серологических исследований получали на 40-е сут. жизни птицы, согласно технологии, действующей на данном предприятии.

Полученный в ходе экспериментальных исследований цифровой материал обрабатывали с помощью биометрических методов.

Результаты исследований

При анализе результатов гематологических исследований установлено, что содержание эритроцитов и гемоглобина в периферической крови индюшат опытной и контрольной групп не имело достоверных различий. При определении относительного количества лимфоцитов, зарегистрировано их увеличение у птиц в опытной группе на 11,2 % в сравнении с контролем (p<0,001). Количество псевдоэозинофилов в опытной группе ниже на 4,8 %, чем в контрольной. В опытной группе отмечено снижение эозинофилов и моноцитов на 2,6 % и 3,2 % соответственно в сравнении с контролем. Достоверной разницы в количестве базофилов не установлено (табл. 1).

Таблица 1

Гематологические показатели крови индюшат при применении препарата ветостим

_{Примечание:} * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001.

Анализ биохимических характеристик сыворотки крови индюшат позволил установить, что достоверных изменений в количестве общего белка, глобулинов, альбумина и креатинина зарегистрировано не было. Количество глобулинов в контрольной группе было меньше на 3,4 г/л, чем в опытной, но не достигало достоверной разницы. Содержание щелочной фосфатазы в опытной группе увеличилось в 1,4 раза и составило 1944,6 МЕ/л, что на 536,4 МЕ/л больше, чем в контрольной группе (p<0,001) (табл. 2).

Таблица 2

Биохимические показатели крови индюшат при использовании препарата ветостим

Примечание: * p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001.

Содержание иммунокомпетентных клеток у индюшат, привитых вакциной Авивак-НБ в сочетании с иммуномодулятором, достоверно выше, чем в группе, где не применяли Ветостим (Р<0,001). Также отмечено увеличение функциональной активности псевдоэозинофилов в НСТ-тесте (0,66±0,06; 0,50±0,002 ед. оп. пл.; Р<0,05). Усиленная фагоцитарная активность псевдоэозинофилов способствует разрушению, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), о чем свидетельствует уменьшение их концентрации в сыворотке крови (66,00±14,90; 148,60±19,50 у.е.; Р<0,05) (табл. 3).

Таблица 3

Иммунологические показатели крови индюшат при использовании препарата Ветостим

При оценке напряженности иммунитета к вирусу Ньюкаслской болезни, после применения живой вакцины в сочетании с препаратом Ветостим, было установлено, что средний титр антител в опытной группе был выше на 0,29 log2, чем в контрольной, где данный показатель составил 4,58 log2. При этом эффективность иммунизации в опытной группе выше на 17 %, в сравнении с контрольной группой.

Заключение

Таким образом, иммунный статус у индюшат, иммунизированных вакциной Авивак-НБ в сочетании с препаратом Ветостим, характеризуется повышенным содержанием в крови Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и Т-киллеров (Р<0,001) и увеличением показателей в НСТ-тесте (Р<0,05). Значительный рост числа иммунокомпетентных клеток и усиление функциональной активности лейкоцитов, а также увеличение титров антител к вирусу Ньюкаслской болезни отражают повышенную устойчивость к данному заболеванию, индуцированную при сочетанном введении препарата Ветостим с вакциной.

Рецензенты:

Новицкий А.А., д.вет.н., профессор, профессор кафедры микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней ФГБОУ ВПО ОмГАУ им. П.А. Столыпина, г. Омск.

Бажин М.А., д.вет.н., профессор, заведующий лабораторией эпизоотологии и мер борьбы с туберкулезом ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных» Российской академии сельскохозяйственных наук, г. Омск.