Изменение сезонных колебаний метеорологических факторовнаходит отражение в изменениях показателей большинства физиологических систем организма.Большое значение в оценке адаптационных и дизадаптационных изменений определяет динамика биоритмологическихколебаний в системе крови, а частности, в системе гемостаза и микроциркуляции [1]. Многие исследователи[4-6, 8-10]описывают закономерности развития общих неспецифических адаптационных реакций организма. Полагают, что  каждой реакции и группе уровней реактивности свойственен свой комплекс изменений в организме, его основных подсистемах и метаболизме. Поэтому тип и характер реакции определяют состояние здоровья, донозологические состояния, болезни разной тяжести, которые можно ассоциировать с нарушениями временной организации [6-10].

Цель исследования

Цель исследования - изучение временной организации биологических ритмов системы гемостаза и микроциркуляции в эксперименте на фоне ожогового ДВС-синдрома, поиск путей коррекции нарушений структуры биологических ритмов с использованием комплексных фитоадаптогенов – фитококтейлей «Биоритм-Э» и «Биоритм-РС».

Материалы и методы исследования

Показатели свертывания крови и микроциркуляцииизучали в 1, 7 и 21 сутки после экспериментальной ожоговой травмы (ЭОТ) в зимний и летний сезоны года без и на фоне коррекции нарушений системы гемостаза фитококтейлями (ФК) «Биоритм-Э» и «Биоритм-РС» в течение 21 суток после травмы в профилактическом, лечебном и лечебно-профилактическом режимах у крыс линии Вистар. Полученные результаты сравнивали с данными интактных крыс.

Животных содержали при естественном освещении со свободным доступом к пище и воде adlibitum. Использование крыс в экспериментах осуществляли в соответствии с Европейской конвенцией по охране позвоночных (1986) и  Правилами  лабораторной  практики  в Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 708 от 23.08.2010). Для охвата суточных колебаний процесса агрегации тромбоцитов, забор крови производили под тиопенталовым наркозом из сердца в течение двух последовательных суток в одно и тоже время (в 8.00; 12.00; 16.00 и 20.00 часов), по 8 измерений в серии, с учетом международных стандартов по клинической лабораторной диагностике для исследований в области гемостаза [3].

Ожоговую травму создавали контактным способом, нанося ожог разогретой медной пластиной на 2-3 участках предварительно эпилированной кожи спины под тиопенталовым наркозом, что обеспечивало поражение 10-15% кожной поверхности. Экспозиция для получения ожогов III-IV степени составляла 10-15 секунд. Использованная модель экспериментальной ожоговой травмы сопровождается развитием гиперкоагуляционного синдрома с явлениями хронического ДВС-синдрома [5].

Хроноанализ биоритмов системы гемостаза (СГ) и микроциркуляции (МЦ) включал использование метода группового анализа показателей электрокоагулографии (время начала (Т1), продолжительности (Т), конца (Т2), скорости (Vc) свертывания, время начала фибринолиза (Т3)), агрегатометрии тромбоцитов (СкА – скорость агрегации, ВА – время агрегации, СтА – степень агрегации), коагулографии (АЧТВ, ПВ, ТВ, фибриноген, РФМК), ультразвуковой допплерографии (М – средняя, S – систолическая, D – диастолическая скорости кровотока), в разное время суток (8.00; 12.00; 16.00; 20.00 часов) на протяжении 2-х последовательных суток, по 8 измерений в серии в осенне-зимний и весенне-летний сезоны на фоне экспериментальной ожоговой травмы (ЭОТ) и при ЭОТ на фоне курсового приема комплексных фитоадаптогенов (КФА): фитококтейлей (ФК) «Биоритм – РС» (БР-РС)  и «Биоритм-Э» (БР-Э). На основании  полученных показателей с помощью программы «Косинор-анализ» строили синусоиды с параметрами биоритмов для каждой серии наблюдений.

В работе использовали фитококтейли (ФК-Э) «Биоритм-Э» (БР-Э)(товарный         знак (ТЗ) № 2010734191 от 18.10.2011) и «Биоритм-РС» (БР-РС)(ТЗ № 2010734192 от 20.10.2011), которые составляли из смеси спиртовых экстрактов в определенных пропорциях - элеутерококка колючего, родиолы розовой, солодки голой, девясила высокого [9]. В течение недели перед применением фитококтейл замерялось суточное потребление воды в пересчете на 100 г массы тела крысы. В концентрации, рассчитанной, исходя из среднесуточного объема потребляемой жидкости, фитококтейль добавлялся в поилки. Дозировка адаптогенов рассчитывалась, исходя из рекомендаций в инструкции по применению препарата с учетом коэффициента (х10) для мелких лабораторных животных и составляла 0,05 мл на 100 г массы тела в сутки (растворитель – питьевая вода). В проведенных ранее исследованиях было показано отсутствие статистически значимых отличий к контролю из интактных крыс при курсовом приеме спирта (растворителя для ФК) в указанной дозе.

Статобработку проводили с использованием методов непараметрической статистики с помощью  пакетов программ Statistica 8.0.

Результаты и обсуждение

На рис. 1-2 представлен характер изменения временной организации некоторых показателей гемостаза и микроциркуляции в первые суткиожогав зимний и летний сезоны года.

 

Сезон года   Параметры БР	Показатели
	Т1	Т2	Т	Т3	Vс
	зима
Период Мезор Амплитуда Акрофаза Р	74,35 24,8 5,66 15 ч 22’ 0,945	17,56 68,54 9,83 20ч10’ 0,921	58,32 27,6 10,11 21ч45’ 0,978	Нд	7,85 2,16 1,1 16ч37’ 0,999
	лето
Период Мезор Амплитуда Акрофаза Р	63,82 118,58 11,32 18ч 53’ 0,915	Нд	45,03 56,34 16,47 14ч 32’ 0,994	Нд	Нд

Рис. 1. Синусоиды ритмов показателей свертывания цельной крови (электрокоагулограммы) крыс в 1 сутки  после ожоговой травмы

 

В зимний сезон года процент достоверных ритмов снижается в 2 раза (до 42,85%) в 1 сутки ожога, тенденция к восстановлению отмечается к 21 суткам эксперимента (71,42%). В 1-е сутки в структуре достоверных БР отмечается высокая доля ультрадианных (УдР) - Т2, Vc, ТВ, МЦ (М, S), АЧТВ - (55,6%) и инфрадианных (ИдР) ритмов (44,4% - преимущественно ритмы свертывания цельной крови (Т, Т1) и активности тромбоцитов (СтА), к 7 суткам появляются циркадианные ритмы (20%) (ЦдР), однако доля ультрадианных остается на уровне 50%. На 21-е сутки восстановления спектра биоритмов не происходит, преобладают ультрадианные (46,8%), процент достоверных инфрадианных ритмов пополняется из числа ранее недостоверных ритмов (26,6%).

Сезон года   Параметры  БР	Показатели
	ТВ	М	S	CтА	АЧТВ
	зима
Период Мезор Амплитуда Акрофаза Р	16,38 28,31 3,24 18ч 20’ 0,925	19,3 2,53 1,12 11ч45’ 0,960	20,21 12,43 0,78 15ч43’ 0,999	63,42 32,76 2,14 15 ч 14’ 0,947	45,8 18,2 2,75 19 ч 14’ 0,900
	лето
Период Мезор Амплитуда Акрофаза Р	58,12 25,55 3,12 14ч 21’ 0,999	6,13 0,79 0,32 08ч20’ 0,931	10,15 8,24 0,32 10 ч 30’ 0,947	35,32 33,79 4,32 17 ч 35’ 0,962	12,271 17,32 0,36 16ч15’ 0,978

Рис. 2. Синусоиды ритмов показателей плазменного гемостаза и микроциркуляции  крыс в 1 сутки  после ожоговой травмы

 

В летний сезон при ЭОТ происходит более выраженное нарушение в иерархии БР - % достоверных менее 40% в 1-7 сутки, к 21-м суткам доля их возрастает до 66,7%. В спектре достоверных ритмов в 1 сутки присутствуют инфра- (57,1%) и ультрадианные (42,9%). В спектре инфрадианных ритмов, как и зимой, регистрируются показатели свертывания цельной крови и агрегации тромбоцитов. К 7-м суткам увеличивается процент ультрадианных (62,5%), и к 21-м суткам регистрируются циркадианные БР (35,7%).

Таким образом, на фоне ожогового ДВС-синдрома у животных развивается острый (в 1-е сутки), затем подострый (с 7-х суток) патологический десинхроноз, разбалансированность временной организации сохраняется до 21 суток (хронический патологический десинхроноз) - мезоры ритмов свертывания цельной крови начинают возрастать, амплитуды снижаются, т.е. выявляют жесткие ритмы - низкая емкость адаптации СГ, что по ряду показателей согласуется с полученными ранее данными [6].

Анализ структуры БР у интактных животных продемонстрировал незначительное преобладание циркадианных ритмов над ультра- и инфрадианными в оба сезона года.В первые сутки ожога инфрадианные ритмы исчезали, и среди достоверных в зимний сезон преобладали ультра-, а в летний – инфрадианныебиоритмы. В динамике наблюдений до 21 суток исследований нормализации структуры БР не происходило, однако % достоверных  ЦдР был больше на 21-е сутки в летний сезон года, период ритмов несколько удлинялся (1,5-2 часа). При профилактическом приеме ФК при ЭОТ в 1-е сутки отмечались  достоверные циркадианные БР в оба сезона года, однако больший нормализующий эффект отмечался зимой, когда к 21 суткам происходило почти адекватное восстановление структуры биоритмов, особенно на фоне фитококтейля «Биоритм-РС».Лечебный прием фитоадаптогенов приводил к восстановлению циркадианной ритмики уже с 7-х суток ожога, и нормализации структуры биоритмов на фоне БР-РС в зимний сезон к 21-м суткам; летом % достоверных ЦдР к концу эксперимента (21 сут) был выше, чем при ожоговой травме без фитокоррекции(рис. 3).

Ввиду того, что эксперимент происходил в течение нескольких лет, в динамике которых отмечались разнообразные формы реагирования на ожоговую травму. В большинстве сезонов в 1 сут ожога отмечалось преобладание ультрадианых ритмов над ИдР зимой, и наоборот, летом. В некоторые годы отмечались обратные изменения. Тем не менее, восстановление временной организации систем гемостаза и микроциркуляции в зимний сезон начиналось уже на 7-е сутки после ожога.

В группах крыс с лечебно-профилактическим использованием ФК не происходило выраженных нарушений структуры биоритмов, однако ожидаемо лучшего восстановления циркадианной ритмики не происходило ни в один из сезонов года, т.е. биологический эффект ФК не накапливался (структурный след), и имел границы реагирования в системах.

В динамике ожога, как без коррекции, так и подвергавшегося фитотерапии и фитопрофилактике, происходило удлинение периодов ритмов в 1-7 сутки, с последующим возвращением их вначале в спектр достоверных инфра-, затем ультра- и, наконец,

                        Ожоговая травма                                                Хронопрофилактика 

                                                                                      БР-Э                 БР-РС 

             Ожоговая травма                                                Хронопрофилактика 

                                                                              БР-Э                 БР-РС  

                 Лечебный прием ФК                                Лечебно-профилактический  прием ФК

               БР-Э                 БР-РС                                БР-Э                 БР-РС

                Лечебный прием ФК                                Лечебно-профилактический  прием ФК

               БР-Э                 БР-РС                                БР-Э                 БР-РС

 

 

Рис. 3. Спектр достоверных биоритмов в динамике ожоговой травмы в зимний (А) и летний (Б) сезоны года (УдР – ультрадианные, ЦдР – циркадианные, ИдР – инфрадианные биоритмы),  при хронопрофилактике и хронотерапии

 

циркадианных ритмов. Эта особенность присутствовала в большинстве серий эксперимента и может являться примером принципа «биологической амортизации» Б.С. Алякринского[2], выдвинувшего гипотезу о том, что «ритмы с разными длительностями периодов образуют многоступенчатую систему амортизации, которая сопровождает экстремальные воздействия», а целостная ритмическая картина биосистемы определяет ее адаптационные возможности к условиямокружающей среды, в такой ситуации уход биосистемы от стационарности проявляется периодической дестабилизацией уровня как на примере частных характеристик БР, так и в структуре временной организации[8-10].

Заключение

Полученные данные показывают, что в динамике экспериментального ожога происходит существенное изменение временной организации систем гемостаза и микроциркуляции в виде острого посттравматического ожогового десинхроноза, который проявляется уже в первые сутки после ожоговой травмы. В дальнейшем, на фоне нарастающей интоксикации организма и присоединения бактериальных эндотоксинов, отмечается истощение адаптационных ресурсов организма и острый посттравматический ожоговый десинхроноз переходит сначала в подострый, затем в хронический процесс, который усугубляет течение типового воспаления. Использование комплексных фитоадаптогенов гармонизирует состояние временной организации и сокращается сроки восстановления характеристик биологических ритмов. Полученные результаты убеждают, что терапия ожогового ДВС-синдрома должна включать средства, корригирующие временную организацию системы гемостаза для сокращения сроков выздоровления и реабилитации пациентов с минимумом побочных эффектов.

 

Рецензенты:

Джиоев И.Г., д.м.н., профессор, зав. центральной научно-исследовательской лаборатории СОГМА, профессор кафедры нормальной физиологии ГБОУ ВПО Северо-Осетинская государственная медицинская академия, г. Владикавказ;

Дзугкоева Ф.С., д.м.н., профессор, зам. директора по НИР Института биомедицинских исследований ВНЦ РАН и РСО-А, г. Владикавказ.