Дубильные вещества (танниды) – группа сложных по структуре растительных веществ полифенолов [10]. В основном различают два больших класса дубильных веществ. К первому классу – гидролизуемым дубильным веществам – относятся гликозиды галловой кислоты (галлотанины) и гликозиды эллаговой кислоты (эллаготанины). Второй класс – конденсированные дубильные вещества (так называемые проантоцианидины) – представлен полимерами флаван-3-ол мономерных субъединиц, таких как (+)-катехин, (-)-эпикатехин и их галлаты. В растениях гидролизуемые и конденсированные дубильные вещества встречаются одновременно, с преобладанием одного класса. На накопление и состав дубильных веществ могут влиять возраст и фаза развития растения, климат, почвенные условия, высотный фактор, освещение, влажность, время сбора и способы сушки и т.п. [1].

В медицинской практике долгое время считалось, что основным фармакологическим эффектом всех дубильных веществ является проявление вяжущих свойств, в последнее время было доказано наличие антиоксидантной, ангиопротекторной, противоопухолевой и других видов активности, которая зависит от структурных особенностей молекул таннидов [10].

В связи с этим поиск новых представителей флоры, в составе биологически активных веществ которых дубильные вещества являются доминирующими компонентами, является актуальной задачей.

Aconogonon (Polygonum) divaricatum L (таран растопыренный, горец растопыренный) – многолетние травянистое растение, входит в состав семейства Polygonaceae, рода Aconongonon (Meissn.) Reichend. В естественных условиях произрастает в Забайкалье [6, 9].

Известно, что компонентный состав группы биологически активных веществ горца растопыренного представлен фенолкарбоновыми кислотами, флавоноидами, антоцианами, катехинами, сапонинами, витаминами [4]. В настоящее время проведено изучение компонентного состава первичных метаболитов и определено содержание витамина К в растении [2, 5].

Согласно литературным данным, содержание дубильных веществ в подземной части горца растопыренного составляет от 4,2 до 26 %, при этом максимальное содержание дубильных веществ наблюдается на 3–4-ый год во время бутонизации и цветения [7]. Следовательно, горец растопыренный можно рассматривать в качестве перспективного источника дубильных веществ и рекомендовать заготовку сырья от взрослых растений, начиная с четвертого года вегетации. Данные о количественном содержании и компонентом соотношении групп дубильных веществ по органам растения нуждаются в уточнении.

Целью данного исследования является количественное определение суммы дубильных, конденсированных и гидролизуемых веществ в надземных и подземных органах Aconogonon (Polygonum) divaricatum L.

Материалы и методы исследования

Объектами нашего исследования послужили подземная и надземная части горца растопыренного, собранного в период 2013–2015 гг. Сырье подвергалось сушке воздушно-теневым способом. Анализ содержания дубильных веществ в сырье проводили в период с июня по сентябрь 2015 г.

Количественное содержание дубильных веществ в растительном объекте определяли фармакопейной методикой перманганатометрического титрования [3], компонентный состав групп дубильных веществ определяли модифицированной фармакопейной методикой, как указано в работе [8].

Обработку результатов выполняли с использованием программы STATISTICA 8.0. Для описания полученных результатов для каждого объекта приводили значение среднего результата (Xср) трех измерений (n=3), доверительного интервала среднего (Dxср).

Результаты и их обсуждение

Предварительно, по результату реакции с раствором железа хлорида (III), было установлено, что в растении преобладает группа конденсируемых дубильных веществ.

Для определения количественного содержания суммы дубильных веществ высушенное сырье измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с размером ячеек 3х3 мм. Далее, 2,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу, соединяли с обратным холодильником и проводили экстракцию горячей водой (соотношение сырье:экстрагент - 2:250) на электрической плитке. Полученное извлечение охлаждали, процеживали и титровали по методике из ГФ XI издания: отбирали 25 мл из полученного извлечения, добавляли 500 мл воды и 25 мл раствора индигосульфокислоты. Полученный раствор титровали 0,02 моль/л раствором перманганата калия до появления золотисто-желтого окрашивания.

Параллельно проводили контрольный опыт. В коническую колбу вместимостью 1000 мл помещали 525 мл воды очищенной и 25 мл раствора индигосульфокислоты, титровали 0,02 моль/л раствором перманганата калия до появления золотисто-желтого окрашивания.

Процентное содержание дубильных веществ определяли по формуле:

Х %=

где V – объем 0,02 моль/л КМnО₄, пошедшего на титрование, мл; V₁ – объем 0,02 моль/л КМnО₄, пошедшего на контрольный опыт, мл; К – коэффициент пересчета: для конденсированных дубильных веществ – 0,00582; m – масса навески сырья, г; W – влажность сырья, %.

На основании полученных расчетов нами была определена сумма всех дубильных веществ в сырье.

Содержание конденсированных дубильных веществ устанавливали следующим образом: к 25,0 мл водного извлечения добавляли 0,5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты, оставляли на 20 часов. Осадок отделяли центрифугированием и тировали фильтрат 0,02 моль/л раствором калия перманганата. Разность между титрованием водного извлечения до и после удаления свободных полифенолов, фенолокислот соответствует содержанию конденсированных дубильных веществ. Гидролизуемые танниды определяли по разности суммы дубильных веществ и конденсированных дубильных веществ [8].

Результаты количественного определения дубильных веществ приведены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты количественного определения дубильных веществ в разных органах Aconogonon (Polygonum) divaricatum L. методом перманганатометрии

*определение содержания дубильных веществ проводили в 2015 г.

Заключение

В результате проведенных исследований установлено, что в подземной и надземной частях Aconogonon (Polygonum) divaricatum L. присутствуют и конденсированные, и гидролизуемые дубильные вещества. Конденсированная группа составляет наибольшую часть из суммы дубильных веществ горца растопыренного. Наибольшее содержание суммы дубильных веществ установлено в подземной части растения, наименьшее – в стеблях. Динамика содержания суммы дубильных веществ показывает, что уменьшение их количества происходит в разных органах растения неравномерно и составляет 52, 9, 18, 24 и 8 процентов в подземной части, стеблях, листьях, цветках и плодах соответственно.

Следует отметить, что определение количественного содержания дубильных веществ перманганатометрическим титрованием может давать завышенный результат, так как перманганат калия взаимодействует не только с дубильными веществами, но и с другими соединениями, присутствующими в извлечении [1]. Поэтому для более точной оценки содержания дубильных веществ в подземной и надземной частях Aconogonon (Polygonum) divaricatum L. необходимо использовать более специфичные методы определения – гравиметрические, спектрофотометрические и хроматографические, используя результаты, полученные по фармакопейной методике, в качестве первичных данных о сумме окисляемых веществ в составе растения.

Рецензенты:

Гришин А.В., д.фарм.н., профессор, ректор Сибирской фармацевтической академии, г. Омск;

Пеньевская Н.А., д.м.н., профессор кафедры эпидемиологии ГБОУ ВПО Омского государственного медицинского университета Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Омск.