Артериальная гипертензия (АГ) в настоящее время широко распространена не только среди лиц среднего и пожилого возраста, но и среди молодого населения, и является одним из основных факторов кардиоваскулярного риска. Избыточный вес и ожирение, высокое артериальное давление (АД), а также отягощенный семейный анамнез по этим факторам являются важными предикторами развития метаболического синдрома (МС) и сердечно-сосудистых заболеваний. Согласно исследованиям, распространенность АГ у молодых лиц от 20 до 29 лет составляет 14,2% [1]. Так, по результатам обследования 250 молодых людей с отягощенным по АГ семейным анамнезом, только у 24% АД было нормальным, у 13,6% пациентов зарегистрировано высокое нормальное АД (130-139/85-89 мм рт. ст.), эссенциальная АГ выявлена у 58,4%, симптоматическая АГ – у 4% обследованных [2].

На территории Ханты-Мансийского автономного округа - Югры (ХМАО - Югра) общая смертность от болезней системы кровообращения на 2017 г. составила 33,8%, при этом среди мужчин – 35,9% и женщин – 25,6% [3]. За период с 2012 по 2017 год по округу число пациентов трудоспособного возраста с болезнями, характеризующимися повышенным кровяным давлением, возросло на 33,5%, среди подростков с 14 до 17 лет заболеваемость АГ составила 18,8 на 1000 населения [3]. Климатоэкологические факторы, изменения структуры питания на Севере отразились также и на показателях распространенности ранее не характерных для коренных жителей хронических неинфекционных заболеваний, таких как ожирение, атеросклероз, ишемическая болезнь сердца (ИБС), АГ, сахарный диабет (СД) и другие. За период с 2012 по 2017 г. число ханты и манси с сердечно-сосудистыми заболеваниями выросло в 2,1 раза, из них с АГ - в 2,14 раза, с цереброваскулярной болезнью – на 2,6%, с ИБС – на 29,2% [4].

Роль наследственной предрасположенности к АГ в настоящее время не вызывает сомнений. Многие работы посвящены поиску и изучению генетических факторов риска развития АГ [5; 6]. Одним из возможных маркеров риска развития АГ является ген CSK (MIM 124095 - cytoplasmic tyrosine kinase), который расположен на длинном плече 15-й хромосомы в локусе 15q24.1. Было изучено влияние полиморфизма rs1378942 гена CSK на развитие многих патологических процессов [7; 8], в том числе и развитие АГ [9]. Ген CSK кодирует различные семейства тирозинкиназ, играющих важную роль в регуляции клеточного роста и дифференцировки нормальных клеток [10; 11]. Нарушение экспрессии гена CSK влечет за собой увеличение активности sck-тирозинкиназы. Основная функция представителей данного семейства белков заключается в фосфорилировании С-концевого участка киназ Src-семейства, что лежит в основе негативной регуляции их активности в молекулах клеток-мишеней, которые представлены клетками сердечно-сосудистой системы, почек, эндокринных органов и центральной нервной системы [12]. В немногочисленных работах авторы изучали роль rs1378942 гена CSK в развитии ожирения и АГ. У 3503 китайских детей в возрасте 6-18 лет были выделены 6 однонуклеотидных полиморфизмов (ОНП) (ATP2B1 rs17249754, CSK rs1378942, MTHFR rs1801133, CYP17A1 rs1004467, STK39 rs3754777, FGF5 rs16998073). 758 детей имели ожирение. Среди шести ОНП три были связаны с риском ожирения, одним из них являлся ген CSK rs1378942 (ОШ 1,20, 95% ДИ 1,01-1,43, p=0,042). Эти данные свидетельствуют о вероятном влиянии генетических факторов и факторов окружающей среды на риск ожирения и МС [13]. Не исключена роль гена CSK в нарушении метаболизма глюкозы в β-клетках поджелудочной железы. Тем не менее физиологическая роль rs1378942 гена CSK в метаболизме глюкозы в настоящее время остается неясной [14].

Цель исследования: изучить ассоциацию rs1378942 гена CSK с артериальной гипертензией среди молодых жителей с метаболическим синдромом, длительно проживающих в северных условиях.

Материалы и методы исследования

Исследование проводилось на базах: «Федоровская городская больница», филиал больницы в д. Русскинская, «Сургутская городская клиническая поликлиника №1». За период 2015-2018 гг. было обследовано 882 человека в возрасте 18-44 лет (средний возраст 36,62±5,12 года), из них 732 пациента с проявлением МС и 150 здоровых молодых людей. Некоренные жители представлены городским и сельским населением. Коренное малочисленное население севера (КМНС) - ханты и манси. Контрольная группа (n=150) включала здоровых людей с нормальной массой тела и без метаболических нарушений, из них 42% мужчин и 58% женщин. Проведено: анкетирование, антропометрическое обследование, включающее измерение роста, массы тела, индекс массы тела (ИМТ=кг/м²), окружность талии (ОТ), измерение АД. Определение уровней общего холестерина (ОХС), холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), холестерина липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП), триглицеридов (ТГ) осуществляли в сыворотке венозной крови при помощи стандартных энзиматических методик на автоматическом биохимическом анализаторе AU – 680 фирмы Beckman Coulter - (США), используя коммерческие реактивы фирмы Termo electron corparation (Финляндия). Основным критерием МС согласно рекомендациям экспертов Всероссийского научного общества кардиологов (ВНОК) (2009 год) является ОТ>94 см у мужчин и свыше 80 см у женщин, дополнительными критериями являются два из следующих: артериальная гипертония (АД ≥ 130/85 мм рт. ст.), повышение уровня триглицеридов (≥ 1,7 ммоль/л), снижение уровня ХС ЛПВП (<1,0 ммоль/л у мужчин; <1,2 ммоль/л у женщин), повышение уровня ХС ЛПНП > 3,0 ммоль/л, гипергликемия натощак (глюкоза в плазме крови натощак ≥ 6,1 ммоль/л), нарушение толерантности к глюкозе (глюкоза в плазме крови через 2 часа после нагрузки глюкозой в пределах ≥7,8 и ≤11,1 ммоль/л).

Молекулярно-генетическое исследование выполнено в НИИТПМ - филиал ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр ИЦиГ СО РАН». Геномную ДНК выделяли из венозной крови методом фенол-хлороформной экстракции. Полиморфизм rs1378942 гена CSK тестировали с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с полиморфизмом длин рестрикционных фрагментов  (ПДРФ). Характеристика обследованных пациентов с МС и контрольной группы представлена в таблице 1.

Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. Полученные результаты статистически обработаны с помощью пакета программ SPSS 16.0, определены частоты генотипов, изучаемых однонуклеотидного полиморфизма в этнических группах с МС и группе контроля. Сравнение групп по частотам генотипов выполнено с помощью таблиц сопряжённости с использованием критерия хи-квадрата по Пирсону, определение средней ошибки (m) средней величины (M). В случае четырёхпольных таблиц применен точный двусторонний критерий Фишера с поправкой Йетса на непрерывность. Относительный риск АГ по конкретному аллелю или генотипу вычислен как отношение шансов (ОШ), определение доверительного интервала (ДИ) с использованием точного двухстороннего критерия Фишера и критерия хи-квадрата по Пирсону. В качестве уровня значимости использовали p<0,001.

Таблица 1

Характеристика обследованных пациентов с МС (M±m)

Примечание: p* <0,001 по сравнению с контрольной группой,

САД – систолическое АД, ДАД – диастолическое АД.

Результаты исследования и их обсуждение

Из всех пациентов, включённых в исследование, проживали на территории ХМАО-Югры менее 10 лет - 1,3%, более 10 лет – 98,7%. Средний возраст пациентов: мужчины 27,61±7,45, женщины – 28,27±8,20 года. У пациентов с МС была обнаружена высокая частота наследственной отягощённости: ожирение среди родителей у 88,7% женщин и у 79,2% мужчин, АГ 31,2% у обоих полов, СД - 75,5% у женщин и 68,8% у мужчин. Артериальная гипертензия, как компонент МС, была выявлена у 15,0% пациентов с МС (n=110) (4,9% мужчин и 10,1% женщин), при этом среди городских пациентов с МС – у 13,6%, сельских пациентов с МС – 17,7%, КМНС с МС – у 12,9%. Результаты анализа распределения генотипов rs1378942 гена CSK среди обследованных коренных и некоренных жителей с МС и без АГ представлены в таблице 2. В частоте носительства генотипа TG полиморфизма rs1378942 гена CSK в группе некоренных здоровых жителей и пациентов с МС достоверных различий не выявлено (ОШ =0.946, 95% ДИ 0.604-1.482, p=0.229) (табл.2).

В группе коренных жителей с МС частота носительства генотипа TG выше по сравнению со здоровыми КМНС (47,2% и 33,3% соответственно), хотя различие не достигает уровня статистической достоверности (ОШ =1.790, 95% ДИ 0.767-4.177, p=0.218). А частота генотипа ТТ, наоборот, ниже в группе коренных жителей с МС по сравнению с контролем (33,7% и 48,2% соответственно). В контрольной группе коренных жителей частота генотипа ТТ (48,2%) выше, чем в группе некоренных жителей (28,7%).

Таблица 2

Частоты генотипов rs1378942 гена CSK среди некоренных и коренных жителей

Примечание: р - уровень значимости при сравнении распределений генотипов.

Таблица 3

Уровни САД и ДАД в зависимости от генотипов rs1378942 гена CSK в группах пациентов с МС и АГ

Примечание: р — уровень значимости при сравнении распределения генотипов

Выполнен анализ ассоциаций rs1378942 со средними уровнями систолического и диастолического АД (таблица 3). Распространенность генотипа TG среди мужчин села с МС и АГ составила 55,6%, КМНС мужчин – 44,4%, среди некоренных жительниц села - 58,8% и женщин КМНС – 40,9%. Доля гомозиготных генотипов GG и TT в сравниваемых группах не различалась. Cреди сельских мужчин и женщин с МС и АГ носителей Т гетерозиготного аллеля TG уровень САД был выше, чем у носителей гомозиготного GG и ТТ генотипов (у мужчин - ОШ 1.567, 95% ДИ 0.588-4.178, p=0.5; у женщин – ОШ 1.655, 95% ДИ 0.812-3.372, p=0.363).

При анализе распределения генотипов в зависимости от выраженности ожирения у городских, сельских и коренных жителей выявлено, что гетерозиготный генотип TG rs1378942 гена CSK часто встречается среди пациентов с I степенью ожирения, независимо от пола обследованных. Большинством носителей T гетерозиготного аллеля TG являются мужчины с МС, проживающие в городе (ОШ 1.432, 95% ДИ 0.351-5.843, p=0.717), и женщины с МС (городские – ОШ 1.765, 95% ДИ 0.598-5.207, p=0.552; сельские – ОШ 1.279, 0.646-2.535, p=0.321; КМНС – ОШ 2.305, 0.683-7.78, p=0.621) (таблица 4).

Таблица 4

Частоты генотипов полиморфизма rs1378942 гена CSK среди пациентов с МС без АГ в зависимости от степени ожирения

Примечание: р — уровень значимости при сравнении распределения генотипов с контрольной группой

Артериальная гипертензия является основным фактором риска развития сердечно-сосудистых заболеваний. Распространенность АГ среди населения обусловлена множеством факторов риска, таких как ожирение, чрезмерное потребление соли, гиповитаминоз, курение, чрезмерное потребление алкоголя и стресс. Длительное увеличение диастолического АД (ДАД) на 5 мм рт. ст. связано с увеличением риска инсульта на 34% и повышением риска коронарных событий на 21% [15].

В настоящее время возрастает роль генетических факторов в развитии сердечно-сосудистых заболеваний. По результатам метаанализа шести крупных проспективных исследований в Консорциуме CHARGE среди 29 136 участников были выявлены 11 значимых для всего генома ассоциаций, свидетельствующих о связи с уровнями систолического АД (САД), ДАД и АГ: четыре локуса для САД (ATP2B1, CYP17A1, PLEKHA7, SH2B3), шесть локусов для ДАД (ATP2B1, CACNB2, CSK / ULK3, SH2B3, TBX3/TBX5, ULK4) и один локус для гипертонии (ATP2B1) [16; 17]. При анализе rs1378942, который находится в интроне CSK в 15q24, достоверно выявлена ассоциация увеличение ДАД у 34 433 человек из 100 347 европейцев и у 12 889 из 194 304 человек азиатского происхождения с группой генов, расположенных в этой области (CYP1A2 (фермент цитохрома P450), CSK (тирозинкиназу c-src), LMAN1L (подобный лектину, связывающему маннозу1) и ARID3b (кодирующий белок AT Rich Interacting Domain) [18]. Однако имеются исследования, представившие взаимосвязь полиморфизма rs1378942 гена CSK с артериальной гипертензией, в частности тесно ассоциированной с повышением САД (p<0,05) [5; 6]. В ряде работ была установлена ассоциация носительства гомозиготного генотипа ТТ с риском АГ (ОШ=1,09 95%ДИ 0,98–1,22) [11].

Известно, что ген CSK кодирует цитоплазматическую тирозинкиназу, участвующей в пролиферации клеток гладких мышц сосудов и зависимых от ангиотензина II, обладающего сосудосуживающей активностью, протромботическим эффектом, регулируя адгезию, агрегацию тромбоцитов и синтез ингибиторов PAI-1 и PAI-2. Под действием ангиотензина кора надпочечников выделяет гормон альдостерон, вызывающий задержку натрия и потерю калия [19]. Повышенное АД может привести к инсульту и терминальной стадии почечной недостаточности. Так, отечественными учеными установлено, что гетерозиготный генотип TG rs1378942 гена CSK, ассоциированный с АГ, значимо преобладает в группе больных с инсультом (52,5%±3,7) по сравнению с группой контроля (39,5%±3,7) (ОШ 1,688 95% ДИ 1,074–2,655) [7]. В проведенном нами исследовании установлено, что гетерозиготный генотип TG rs1378942 гена CSK преобладает в группе некоренных жителей с МС и АГ (49,4%) по сравнению с коренными жителями с МС и АГ (42,0%). В частоте носительства генотипа TG полиморфизма rs1378942 гена CSK в группе некоренных здоровых жителей и пациентов с МС достоверных различий не выявлено (ОШ =0.946, 95% ДИ 0.604-1.482, p=0.229). В группе коренных жителей с МС частота носительства генотипа TG выше по сравнению со здоровыми КМНС (47,2% и 33,3% соответственно) (ОШ =1.790, 95% ДИ 0.767-4.177, p=0.218). В проведенном нами исследовании была выявлена также ассоциация между гетерозиготным генотипом TG и ожирением у городских мужчин с МС (ОШ 1.432, 95% ДИ 0.351-5.843, p=0.717) и у женского населения с МС (городские – ОШ 1.765, 95% ДИ 0.598-5.207, p=0.552; сельские – ОШ 1.279, 0.646-2.535, p=0.321; КМНС – ОШ 2.305, 0.683-7.78, p=0.621).

Заключение 

Таким образом, среди лиц молодого возраста распространенность АГ составляет 15,0%, при этом женщины страдают АГ чаще, чем мужчины. Наиболее частые случаи АГ были выявлены среди некоренного сельского населения. Было установлена ассоциация АГ у пациентов с МС с rs1378942 гена CSK. При этом определено преобладание гетерозиготного генотипа TG rs1378942 гена CSK в группе некоренных жителей с МС и АГ (49,4%) по сравнению с коренными жителями с МС и АГ (42,0%). В группе коренных жителей с МС частота носительства генотипа TG выше. При этом риск развития АГ выявлен выше, по сравнению со здоровыми коренными жителями (47,2% и 33,3% соответственно) (ОШ =1.790, 95% ДИ 0.767-4.177, p=0.218). Полученная нами ассоциация гетерозиготного генотипа TG rs1378942 гена CSK с ожирением среди молодых пациентов свидетельствует о влиянии генетических факторов и факторов окружающей среды на развитие МС.