GENDER DIFFEREVCE OF ACETYLCHOLINE METABOLISM IN RATS MYOCARDIUM AT NECROTICAL PROCESSE DEVELOPING ON THE GROUND OF MELATONIN

Доминирование сердечно-сосудистой патологии в статистике ВОЗ по показателю смертности и инвалидности свидетельствует о сохранении актуальности научных исследований, главная цель которых состоит в раскрытии более глубоких механизмов взаимодействия патогенного влияния негативных факторов и ответа организма, с учетом адекватности и эффективности [7]. В последнее время все большее число ученых говорят о целесообразности гендерного подхода при формировании стратегии лечения патологии сердца и сосудов, учитывая общеизвестные данные о превалировании мужчин в статистике заболеваемости ИБС, с учетом частоты осложнений. Увеличение продолжительности жизни современного человека показало, что с возрастом при развитии менопаузы количество женщин, болеющих ИБС, резко возрастает [11]. В совокупности выше изложенное является важным доказательством активного участия половых стероидов в функционировании сердца и сосудов и получило большое количество доказательств на уровне эксперимента [1, 3]. Несмотря на это, при лечении кардиологических больных не учитывается пол пациента, что не является оправданным, имеющиеся на сегодняшний день данные свидетельствуют о различном реагировании на однотипное лечение мужчин и женщин по скорости излечения, его эффективности и осложнениях.

Поиски эффективных и наиболее естественных по своему происхождению кардиопротекторов способствовали привлечению внимания ученых к мелатонину - гормону шишковидной железы, антиоксидантные, антиишемические и антиадренергические свойства которого хорошо известны [8, 9]. В то же время научных исследований, которые изучали бы гендерные различия влияние мелатонина на развитие патологии миокарда, очень мало, полученные результаты иногда являются противоречивыми, что свидетельствует о необходимости более глубокого изучения его влияния на развитие некротического процесса в миокарде с учетом пола и уровня половых гормонов.

Цель исследования - изучить половые отличия обмена ацетилхолина в миокарде крыс при развитии некротического процесса на фоне мелатонина.

Материал и методы исследования. Исследования провели на половозрелых лабораторных крысах обоего пола, у которых моделировали адреналиновый (А) некроз (адреналин 1 мг/кг). Мелатонин (Мел, 5 мг/кг) с целью кардиопротекции использовали за 1 час до введения адреналина. В миокарде предсердий и желудочков определяли содержание ацетилхолина [2] и общую холинэстеразную активность (ОХЭА) [4] через 1 и 24 часа после введения адреналина, что соответствует началу и пику некрозообразования. Для оценки влияния половых гормонов на исследуемые показатели эксперименты провели на гонадэктомированных (ГЭ) животных и тех, которые получали заместительную терапию половыми гормонами (ЗТПГ, самцы - тестостерон 2 мг/кг, самки - гексестрол 0,1 мг/кг и прогестерон 5 мг).

Результаты исследования и их обсуждение.

Изучение динамики содержания ацетилхолина (АХ) в миокарде предсердий важно с точки зрения его участия в обеспечении электрических процессов, что подтверждается доминированием в этом отделе сердца медиаторной фракции. Анализ полученных данных показал, что мелатонин по-разному влиял на исследуемый показатель у самцов и самок. У самок содержания АХ в миокарде предсердий в процессе реализации повреждающего эффекта адреналина уменьшалось (табл. 1). Эти изменения происходили на фоне повышения активности ферментативного гидролиза АХ (табл. 2), что в совокупности свидетельствовало об улучшении условий метаболизма медиатора ибо активность гидролиза и синтеза являются синергичными процессами [4].

Таблица 1

Содержание ацетилхолина (мкМ/кг) в миокарде предсердий при повреждении сердца адреналином на фоне мелатонина (M±m, n=6)

	Контроль	А 1 час	А 24 часа	Мел контроль	Мел+А 1 час	Мел+А 24 часа
♀	25,0±1,3²	27,5±0,6²	25,6±0,4²	32,0±0,5^{2, 4}	28,5±0,4^{1, 2}	26,7±0,3^{1, 2}
♂	17,8±0,8²	16,7±0,5²	14,2±0,4^{1, 2}	21,7±0,4^{2, 4}	18,5±0,6^{1, 2}	23,9±0,4^{1, 2, 4}
ГЭ животные
♀	22,6±0,8²	24,8±1,1²	23,3±0,8^{2, 3}	24,1±0,7^{2, 3}	24,5±0,6^{2, 3}	27,9±0,7^{1, 2, 4}
♂	12,3±0,5^{2, 3}	12,5±0,6^{2, 3}	10,4±0,6^{1, 2, 3}	14,0±0,8^{2, 3}	11,7±0,7^{1, 2, 3}	10,5±0,7^{1, 2, 3}
ЗТПГ
♀	29,7±0,6^{2, 3}	29,4±0,6²	29,0±0,5^{2, 3}	35,2±0,5^{2, 3, 4}	34,2±0,8^{2, 3, 4}	29,9±0,9^{1, 2, 3}
♂	18,3±0,7²	21,7±0,6^{1, 2, 3}	22,3±0,6^{1, 2, 3}	20,0±0,5²	22,0±0,7^{2, 3}	20,9±0,5^{2, 3}
Примечание: ¹ - достоверная разница относительно контроля, ² - между самцами и самками, ³ - относительно животных с функционирующими гонадами, ⁴ - относительно показателя животных без коррекции мелатонином.

У самцов содержание АХ в миокарде предсердий при патогенном действии адреналина на фоне мелатонина незначительно, но достоверно увеличивалось и было больше, чем без коррекции, на 68 % (р<0,001). Происходили такие изменения на фоне увеличения ОХЭА, что также свидетельствовало об улучшении условий для метаболизма. Отличие между самцами и самками по содержанию АХ было небольшим в сторону преобладания показателя у самок. Такое же соотношение наблюдали и в группе животных, которые не получали мелатонин. Следует отметить, что мелатонин, не влияя особенно на характер изменений показателей, обеспечивал большее содержание АХ в предсердиях самцов.

Дефицит половых гормонов, вызванный гонадэктомией, изменил характер динамики исследуемых показателей. В миокарде предсердий самок содержание АХ увеличивалось. ОХЭА на таком фоне оставалась значительно выше, чем без коррекции. Это подтверждало присутствие эффекта гормона шишковидной железы. У самцов при этом уровень АХ снижался и был меньше, чем в особей с интактными гонадами, в 2,3 раза (р<0,001). Интересно, что аналогичные изменения происходили в миокарде предсердий животных, которые не получали мелатонин. Тем не менее достоверно выше значение ОХЭА свидетельствовало о более эффективном процессе обмена АХ в миокарде данного отдела сердца, что могло быть связано с медиаторной его фракцией.

Таблица 2

Общая холинэстеразная активность (мМ/(кг∙час)) миокарда предсердий при повреждении сердца адреналином на фоне мелатонина (М±m, n=6)

Контроль

А 1 час

А 24 часа

Мел

контроль

Мел+А

1 час

Мел+А

24 часа

♀

119,2±0,7

123,5±0,8

^{1, 2}

126,5±0,8

121,7±0,8

125,2±0,8

134,5±0,8

^{1, 2, 4}

♂

74,1±0,8

109,5±0,8

^{1, 2}

128,1±0,8

78,3±0,8

^{2, 4}

122,4±0,8

^{1, 4}

125,5±0,8

^{1, 2}

ГЭ животные

♀

81,7±0,6

^{2, 3}

142,1±0,6

^{1, 2,}

142,5±0,7

¹^{, 2, 3}

141,2±0,7

^{2, 3,4}

145,5±0,7

^{1, 2, 3, 4}

146,2±0,6

^{1, 2, 3, 4}

♂

93,4±1,5

^{2, 3}

134,2±0,8

^{1, 2, 3}

119,3±2,4

^{1, 2, 3}

97,0±0,7

^{2, 3}

122,4±0,7

^{1, 2, 4}

139,2±0,7

^{1, 2 , 3, 4}

ЗТПГ

♀

120,2±0,6

121,8±0,6

127,5±0,7

^{1, 2}

127,5±0,7

^{2, 3, 4}

130,4±0,7

^{1, 2, 3, 4}

133,2±0,6

^{1, 2, 4}

♂

109,5±0,8

^{2, 3}

137,6±0,7

^{1, 2, 3}

142,0±0,7

^{1, 2, 3}

141,0±0,7

^{2, 3, 4}

147,4±0,7

^{1, 2, 3, 4}

148,4±0,6

^{1, 2, 3, 4}

Примечание: ¹ - достоверная разница относительно контроля, ² - между самцами и самками, ³ - относительно животных с функционирующими гонадами, ⁴ - относительно показателя животных без коррекции мелатонином.

В условиях ЗТПГ динамика обоих показателей в миокарде предсердий самок при развитии патологии на фоне мелатонина напоминала таковую у животных с интактными гонадами. Более стабильное содержание АХ у самцов поддерживалось на фоне постепенно возрастающей и более высокой, чем при отсутствии мелатонина, ОХЭА. Отличие между самцами и самками наблюдали не только по характеру динамики АХ, но и по уровню активности его гидролиза, который был существенно выше у самцов. Это свидетельствовало о различной в зависимости от пола степени влияния мелатонина на метаболизм медиатора и, соответственно, роли андрогенов и эстрогенов в реализации эффектов.

Интерес к изучению обозначенных выше показателей в миокарде желудочков вызван тем, что в данном отделе сердца преобладаем метаболическая фракция АХ. В желудочках, которые является главной мишенью для адреналина, АХ уменьшает активность обменных процессов, потребление кислорода и истощение запасов макроэргов [6, 10]. Это в конечном итоге предупреждает открытие митохондриальной поры, развитие оксидантного стресса [12] и уменьшает повреждение [5].

Результаты исследования животных с функционирующими гонадами показали, что мелатонин не изменил характер динамики АХ и ОХЭА в миокарде желудочков при их повреждении (табл. 3 и 4). Влияние кардиопротектора проявилось лишь большим содержанием АХ, несмотря на более высокую ОХЭА миокарда желудочков, что свидетельствовало о лучших, чем без коррекции, условиях синтеза. У самок такого рода эффект был существеннее. Интересно, что степень структурного повреждения миокарда желудочков самок в таких условиях был на 54 % меньше (у самцов - только на 26 %).

Таблица 3

Содержание ацетилхолина (мкМ/кг) в миокарде желудочков при повреждении сердца адреналином на фоне мелатонина (M±m, n=6)

	Контроль	А 1 час	А 24 часа	Мел контроль	Мел+А 1 час	Мел+А 24 часа
♀	5,93±0,20	3,00±0,10^1,²	3,15±0,09^{1, 2}	7,93±0,16^{2, 4}	3,90±0,11^{1, 4}	5,00±0,20^{1, 2, 4}
♂	4,95±0,34	2,33±0,08^{1, 2}	2,18±0,13^{1, 2}	5,92±0,11^{2, 4}	3,10±0,13^{1, 4}	3,05±0,09^{1, 2, 4}
ГЭ животные
♀	4,97±0,16^{2, 3}	3,25±0,16^{1, 2}	2,90±0,17¹	5,10±0,17³	4,98±0,18^{3, 4}	3,93±0,30^{1, 2, 3, 4}
♂	4,05±0,16²	2,50±0,11^{1, 2}	3,22±0,14^{1, 3}	5,25±0,23⁴	4,60±0,19^{3, 4}	4,80±0,14^{2, 3, 4}
ЗТПГ
♀	6,02±0,16²	2,80±0,10¹	2,95±0,13^{1, 2}	5,95±0,23^{2, 3}	6,97±0,22^{1, 2, 3, 4}	7,90±0,23^{1, 2, 3, 4}
♂	4,92±0,16²	2,95±0,16^{1, 3}	2,05±0,13^{1, 2}	4,85±0,21^{2, 3}	4,70±0,21^{2, 3, 4}	5,10±0,17^{2, 3, 4}
Примечание: ¹ - достоверная разница относительно контроля, ² - между самцами и самками, ³ - относительно животных с функционирующими гонадами, ⁴ - относительно показателя животных без коррекции мелатонином.

Таблица 4

Общая холинэстеразная активность (мМ/(кг∙час)) миокарда желудочков при повреждении сердца адреналином на фоне мелатонина (М±m, n=6)

Контроль

А 1 час

А 24 часа

Мел

контроль

Мел+А

1 час

Мел+А

24 часа

♀

132,5±0,7

123,5±0,8

^{1, 2}

148,5±1,1

^{1, 2}

145,7±1,0

^{2, 4}

152,6±1,0

^{1, 2, 4}

154,0±0,9

^{1, 2, 4}

♂

92,4±0,8

133,6±0,7

^{1, 2}

144,5±0,7

^{1, 2}

103,2±0,7

^{2, 4}

141,2±0,7

^{1, 2, 4}

144,4±0,8

^{1, 2}

ГЭ животные

♀

101,0±0,7

^{2, 3}

103,4±0,8

^{2, 3}

106,4±0,6

^{1, 2, 3}

106,0±0,4

^{2, 3, 4}

105,5±0,5

^{2, 3}

107,1±0,4

^{2, 3}

♂

78,1±0,8

^{2, 3}

95,8±0,8

^{1, 2, 3}

100,9±0,6

^{1, 2, 3}

83,1±0,6

^{2, 3, 4}

97,8±0,6

^{1, 2, 3}

98,2±0,5

^{1, 2, 3, 4}

ЗТПГ

♀

120,8±0,4

^{2, 3}

123,5±0,5

^{1, 2}

140,5±0,3

^{1, 2, 3}

125,1±0,4

^{2, 3, 4}

133,1±0,4

^{1, 2, 3, 4}

137,0±0,4

^{1, 2, 3, 4}

♂

133,6±0,7

^2,

147,1±0,6

^{1, 2, 3}

150,2±0,5

^{2, 3}

156,1±0,6

^{2, 3, 4}

151,7±0,5

^{1, 2, 3, 4}

155,4±0,4

^{2, 3, 4}

Несмотря на сохранение общей тенденции к уменьшению содержания АХ в данном отделе сердца, у ГЭ самок при развитии некротического процесса абсолютные значения показателя стали ниже, чем у животных с интактными гонадами, а у самцов - выше. При этом динамика ОХЭА у животных обоего пола практически не отличалась от таковой в группе животных, которые не получали мелатонин. Это свидетельствовало об уменьшении способности мелатонина влиять на активность метаболизм АХ на фоне дефицита половых гормонов.

Использование ЗТПГ не восстановило характерной для животных с функционирующими гонадами закономерности изменений исследуемых показателей. При использовании мелатонина на фоне ЗТПГ содержание АХ в миокарде желудочков было больше, чем у особей с интактными гонадами, у самцов на 67 %, а у самок - на 58 % (24 часа после введения адреналина). При этом ОХЭА существенно не отличалась. На таком фоне ступень структурного повреждения миокарда самок практически не изменялся, а у самцов существенно уменьшился (группа сравнения - животные с интактными гонадами). Такой положительный эффект можно объяснить не только антиоксидантными свойствами мелатонина, но и способностью АХ уменьшать негативное влияние адреналина.

Заключение. Полученные данные свидетельствуют о том, что мелатонин влияет на метаболизм ацетилхолина в миокарде крыс. В условиях реализации кардиотоксического эффекта адреналина характер такого влияния зависит не только от пола, но и уровня половых гормонов. Это подтверждает необходимость более активных исследований гендерных отличий эффективности известных и перспективных кардиопротекторов, действие которых реализуется через холинергические механизмы.

Рецензенты:

Вадзюк С.Н., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой нормальной физиологии Тернопольского государственного медицинского университета имени И.Я. Горбачевского МОЗ Украины, г. Тернополь;

Фира Л.С., д.б.н., профессор, заведующий кафедрой фармации института последипломного образования Тернопольского государственного медицинского университета имени И.Я. Горбачевского МОЗ Украины, г. Тернополь.

Scientific journal
Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

GENDER DIFFEREVCE OF ACETYLCHOLINE METABOLISM IN RATS MYOCARDIUM AT NECROTICAL PROCESSE DEVELOPING ON THE GROUND OF MELATONIN

Modern problems of science and education
Scientific journal | ISSN 2070-7428 | CertJournal