Дубровник восточный является наименее изученным видом родаTeucriumL. Известно лишь несколько работ, касающихся морфологии, изучения компонентного состава эфирного масла итак далее [8,9,10]. Известно, что различные представители этого рода издавна пользовались успехом в народной официальной медицине. Особенно это касается дубровника белого, дубровника обыкновенного и некоторых других видов. Отсюда наш интерес к изучению дубровника восточного дагестанской флоры. Поскольку флавоноиды и антоцианы,как антиоксиданты прямого действия, характеризуют сырьевую ценность растительного сырья, на сегодня очень актуальными остаются скрининговые исследования для поиска перспективных источников флавоноидов, антоцианов с высокой антиоксидантной активностью выявление изменчивости накопления их в утилизируемых органах растительного сырья вдоль высотного градиента. Исходя из этого, целью наших исследований являлось выявление закономерностей накопления флавоноидов, антоцианов и антиоксидантов в различных органах TeucriumorientaleLвдоль средовых градиентов.
Материал и методика исследования
Род Teucrium L. насчитывает более 300 видов, занимающих достаточно большой ареал по всему земному шару, и представляет собой многолетние травянистые растения или полукустарники высотой 10–40 см. Основным центром видового разнообразия данного рода является Средиземноморье. На территории Юго-Восточной Азии и Северной Америки растения рода Teucrium L. считаются занесенными. На территории России и сопредельных государств (в пределах территории бывшего СССР) данный род представлен 26 видами, из них на Кавказе произрастает 13 видов. Согласно последним данным на территории Северного Кавказа произрастает 6 видов рода Teucrium L.[5]. На территории Дагестана обнаружено 6 видов[5]. Дубровник восточный–(TeucriumorientaleL.) – многолетнее травянистое растение высотой 5–30 см. Произрастает на сухих и каменистых склонах Северного Кавказа и Крыма. Интересной особенностью данного растения является способность к расположению почек у поверхности почвы (т.е. является хамефитом)[5].В Дагестане встречается во всех горных районах,на каменистых склонах до верхнего горного пояса [4].
Материал для работы (листья, соцветия, стебли дубровника восточного) был собран в 2013 году в фазу цветения с пяти изолированных географических точек (табл.1). Методика подготовки материала для химических анализов осуществлялась согласно ГФ [2].
Суммарное содержание флавоноидов иантоцианов определяли спектрофотометрически на спектрофотометре СФ-16 по стандартной методике с использованием реакции образования комплексных соединений с хлоридом алюминия ихлоридом кобальта, соответственно. Перерасчет данных производился нарутин и на 3-глюкозид цианидина путем подстановки значений оптической плотности исследуемого раствора в калибровочное уравнение [2].Суммарные антиоксиданты определялись на приборе для экспресс-анализа суммарных антиоксидантов «ЦВЕТ-ЯУЗА-001-ААА», амперометрическим методом, с пересчетом на галловую кислоту [6]. При приготовлении всех растворов использовалась деионизированная вода, получаемая на деионизаторе «Водолей». Статистическую обработку данных определения суммарного содержания флавоноидов, антоцианов, антиоксидантов проводили по общепринятым алгоритмам обработки данных с использованием лицензионной системы обработки данных Statistica 5.5. и пакета программ «MS EXCEL».
Результаты и обсуждение
Результаты (табл.1), полученные в ходе эксперимента, показывают, что: содержание суммы флавоноидов в исследованных образцах сырья колеблется от 0,35% до 1,05 %; суммы антоцианов – от 0,16% до 1,05%; ССА (содержание суммарных антиоксидантов) от 1,96 – до 4,94 мг/г. Межпопуляционное сравнение накопления вторичных метаболитов выявило популяции с максимальным суммарным содержанием флавоноидов (Хунзахское плато, 1710 м над у.м.), антоцианов (Хунзахское плато, 1710 м над у.м.),суммарных антиоксидантов (Ущелье р. Кзыл-Дере, Ахтынский р-н, 1800 м над ур.м.). Стоит отметить, в целом образцы со всех популяций дают хорошие результаты по содержанию вторичных метаболитов в надземных органах. Максимальное содержание флавоноидов обнаружено в листьях растения, чем в соцветиях (исключение: популяцииХунзахское плато, 1710 м над у.м. иУщелье р. Кзыл-Дере, Ахтынский р-н, 1800 м над ур.м), когда значение антоцианов в соцветиях выше, чем в листьях.Заметим, чтомаксимум содержания суммарныхфлавоноидов и антиоксидантов в природных популяциях приходится на листьяTeucriumorientaleL.
Таблица1
Суммарное содержание флавоноидов, антоцианов, антиоксидантной активности водно-этанольных экстрактов (70%) различных органов образцовTeucriumorientaleL.из природных популяций Дагестана, сбора 2013 года
|
№ |
ВУМ, м |
Сод-е суммы ФЛ, % |
Сод-е суммы АНТ., % |
ССА,мг/г |
||||||
|
Лист. |
соцв. |
стебли |
лист |
соцв. |
стебли |
лист |
соцв. |
стебли |
||
|
1 |
565 |
0,91± 0,01 |
0,81± 0,01 |
0,31± 0,01 |
0,31±0,00 |
0,46±0,00 |
0,18± 0,00 |
4,43± 0,00 |
3,99± 0,00 |
1,96± 0,00 |
|
2 |
1200 |
0,96± 0,01 |
0,85± 0,01 |
0,45± 0,01 |
0,34± |
0,62±0,0 |
0,26± 0,00 |
4,24± 0,00 |
3,43± 0,00 |
1,98± 0,00 |
|
3 |
1500 |
0,98± 0,01 |
0,65± 0,01 |
0,35± 0,01 |
0,26± 0,00 |
0,39± 0,00 |
0,20± 0,00 |
3,00± 0,00 |
3,65± 0,00 |
2,06± 0,00 |
|
4 |
1710 |
1,01± 0,01 |
1,05± 0,01 |
0,60± 0,01 |
0,38± 0,00 |
1,05± 0,00 |
0,44± 0,00 |
3,47± 0,00 |
2,99± 0,00 |
3,12± 0,00 |
|
5 |
1800 |
0,78± 0,01 |
1,01± 0,01 |
0,37± 0,01 |
0,25± 0,00 |
0,43± 0,00 |
0,16± 0,00 |
4,94± 0,00 |
3,45± 0,00 |
2,25± 0,00 |
|
6 |
всего |
0,93± 0,02 |
0,87± 0,4 |
0,41±0,03 |
0,31± 0,01 |
0,59± 0,06 |
0,25± 0,03 |
4,02± 0,19 |
3,50± 0,09 |
2,27± 0,12 |
Примечание: ВУМ – высота над уровнем моря; Ф. – флавоноиды; АНТ. –антоцианы; ССА – суммарное содержание антиоксидантов;1-Окр. с. Гергебиль, Гергебильский р-н; 2-Окр. с.Цудахар, Левашинский р-н; 3-Окр. с. Анада, Гунибский р-н; 4-Хунзахское плато, Хунзахский р-н; 5-Ущелье р. Кзыл-Дере, Ахтынский р-н
Влияние высотного градиента на накопление вторичных метаболитов выявило устойчивую тенденцию к повышению суммы флавоноидов с набором высоты над уровнем моря места сбора сырья (для соцветий и стеблей) и суммы антиоксидантов в стеблях растения (табл.2, рис.1,2). Иная картина наблюдается с соцветиями, где с ростом высоты над уровнем моря места сбора сырья наблюдается снижение содержания антиоксидантов (рис.3). Как видно из табл.2, результаты влияния высотного фактора на изменчивость антиоксидантов в листьях и стеблях коррелируют с данными по содержанию флавоноидов в них. Таким образом, зависимость накопления суммарных вторичных метаболитов в органах дубровника восточного носит разнонаправленный характер.
Рис.1. Содержание суммарных флавоноидовTeucriumorientaleL.природных популяций, 2013 г. сбора (соцветия)
Рис.2. Содержание суммарных флавоноидовTeucriumorientaleL.природных популяций, 2013 г. сбора (соцветия)
Рис.3.Содержаниесуммарныхантиоксидантоввстеблях TeucriumorientaleL. (природные популяции, 2013 г. сбора)
Рис. 4. Содержаниесуммарныхантиоксидантовв соцветияхTeucriumorientaleL. (природные популяции, 2013 г. сбора)
Таблица 2
Коэффициенты корреляции (r) и детерминации (r2) для природных популяцийTeucriumorientaleL. по влиянию высотного градиента на содержание флавоноидов, антоцианов и суммарных антиоксидантов (**,* – уровни значимости при α = 1%, 5%, соответственно)
|
Группы соединений |
Органы растений |
r |
r2 |
|
флавоноиды |
лист |
-0,22 |
- |
|
соцв. |
0,72** |
0,52 |
|
|
стебли |
0,63* |
0,40 |
|
|
антоцианы |
лист |
0,07 |
- |
|
соцв. |
0,45 |
0,20 |
|
|
стебли |
0,39 |
- |
|
|
антиоксиданты |
лист |
-0,19 |
- |
|
соцв. |
-0,77** |
0,59 |
|
|
стебли |
0,56* |
0,31 |
Выводы
Итак, нами впервые проведен фитохимический анализ на содержание вторичных метаболитов в надземных органах TeucriumorientaleL., собранных в природных популяциях флоры Дагестана.В ходе эксперимента получили данные, показывающие высокое содержание суммы флавоноидов, антоцианов, антиоксидантов в листьях и соцветиях дубровника восточного. При этом выявлены образцы с максимальным содержанием билогически активных соединений с высокой антиоксидантной активностью. Показано разнонаправление действия высотного факторана изменчивость содержания флавоноидов, антоцианов и антиоксидантов в надземных органах сырья.
Полученные данные имеют, несомненно, научный интерес с точки зрения объяснения механизмов изменчивости содержания вторичных метаболитов под влиянием комплекса абиотических факторов среды. Кроме того, результаты очень важны при оценке ресурсного вида флоры Дагестана, содержащего фенольные соединения с высокой антиоксидантной активностью; при введении вида в культуру.
Рецензенты:ГасановГ.Н., д.с.-х.н., профессор, зав. лабораториибиогеохимииФГБУНПИБРДНЦРАН, г. Махачкала;
ИсмаиловЭ.Ш., д.б.н., профессор кафедры химии ФГБОУ ВО «ДГТУ», г.Махачкала.