Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

В современной литературе появились сведения о возрастной структурной перестройке паренхимы и стромы слюнных желез человека, критических периодах развития, но миоэпителий, являющийся специализированным структурным элементом концевых отделов слюнных желез, и его возрастные морфофункциональные особенности не учитывались и не описаны [1-3]. Вместе с тем миоэпителиальные клетки способны к активному размножению, что влияет на стромально-паренхиматозное отношение и, возможно, проявляется в критические возрастные периоды. Миоэпителий способен к образованию опухолей, которые составляют 4,5% от всех новообразований слюнных желез. К ним относятся миоэпителиальная аденома, ее злокачественный вариант – миоэпителиальная карцинома, а также эпителиально-миоэпителиальная карцинома [4; 5]. Критические периоды возрастной перестройки миоэпителия и возможного развития опухолей слюнных желез миоэпителиальной природы до настоящего времени остаются не выясненными.

Цель – провести возрастной морфологический анализ миоэпителиальных клеток серозных концевых отделов поднижнечелюстных желез человека с учетом возрастных стромально-паренхиматозных изменений и выявить критические периоды для развития миоэпителиом.

Материал и методы

Забирали поднижнечелюстные железы при патологоанатомическом вскрытии людей обоих полов, по 5 от каждой возрастной группы. Группы формировали согласно общепринятой возрастной периодизации, принятой на VII Всесоюзной конференции по проблемам возрастной морфологии, физиологии и биохимии (1965 г.): грудной возраст (0–1 год), раннее детство (1–3 года), позднее детство (4–7 лет), подростковый (8–17 лет), юношеский (18–21 год), первый взрослый (22–35 лет), второй взрослый (36–60 лет), пожилой (61–74 года). Железы фиксировали в 12% нейтральном формалине, обезвоживали в спиртах, просветляли в ксилоле и заливали в парафин. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, гематоксилином и пикрофуксином по методу Ван Гизона, традиционно применяемому для выявления гладкой мышечной ткани. В пяти полях зрения площадью 0,096 мм2 каждого среза железы производили подсчет численной плотности, площади ядра и цитоплазмы, ядерно-цитоплазматического отношения молодых и зрелых миоэпителиальных клеток (МЭК). Срезы изучали под микроскопом Primo Star (Carl Zeiss, Германия) с цифровой фотокамерой G-10 (Canon, Япония) и программным обеспечением Axio Vision 4.8.2 (Carl Zeiss, Германия). Данные морфометрии обрабатывали с использованием пакета прикладных программ Statistics for Windows v. 6.I (Statsoft, CША). Вычисляли среднее значение показателя (М), стандартное отклонение (s), медиану (Me) и интерквартильный интервал (Q1–Q3). Значимость различий оценивали по U-критерию Манна-Уитни на уровне p<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Первый зрелый возраст взят за контроль, так как, по данным литературы, он характеризуется зрелостью паренхиматозных элементов поднижнечелюстной железы, при этом доля серозных концевых отделов в объеме паренхимы долек составляет 24±2,2% [1; 2]. По ультраструктуре МЭК выделяют зрелые, имеющие звездчатую форму и отчетливо различимую электронную плотность цитоплазмы с множеством центрально расположенных актиновых миофиламентов, и молодые клетки эллипсоидной формы с небольшим количеством толстых и коротких отростков, характеризующихся электронно-светлой цитоплазмой и незначительным количеством актиновых миофиламентов [6]. Зрелые МЭК имеют более вытянутое, чем молодые клетки, палочковидное, а не овоидное ядро, более длинные отростки цитоплазмы. В отличие от соединительнотканных клеток (фибробластов, лимфоцитов) МЭК располагаются в составе концевых отделов, ограниченных базальной мембраной от интерстиция.

В грудном возрасте количественное отношение молодых и зрелых МЭК примерно одинаковое, молодые превышают зрелые в 1,18 раза (табл. 1).

Таблица 1

Количественная характеристика миоэпителиалных клеток (М±s, р<0,05)

Примечание. ** – значимые различия молодых и зрелых МЭК в группе.

Площади ядра и цитоплазмы молодых МЭК в 1,5 раза меньше аналогичных показателей для зрелых клеток внутри данного возраста, ядерно-цитоплазматическое отношение внутри возраста сохраняет стабильность, но при сравнении с контрольной группой у зрелых клеток оно оказалось значимо выше (табл. 2).

По данным литературы, в этом возрасте происходит перестройка железы с ростом паренхимы, увеличением количества белковых концевых отделов, идет активная пролиферация эпителия [1]. Сопоставляя данные литературы с полученными результатами, можно предположить, что увеличение численной плотности молодых клеток, снижение численной плотности и повышение активности зрелых миоэпителиальных клеток неразрывно связаны с адаптивной перестройкой железы, сопровождающейся усиленным ростом паренхимы.

Таблица 2

Морфометрические показатели миоэпителия возрастных групп (Mе (Q1–Q3), р<0,05)

Примечание. * – значимые различия с первым зрелым возрастом; ** – значимые различия молодых и зрелых МЭК в группе; Sя – площадь ядра миоэпителиальной клетки; Sцтп – площадь цитоплазмы миоэпителиальной клетки; ЯЦО – ядерно-цитоплазматическое отношение.

В периоде раннего детства (1–3 года) по сравнению с предыдущей возрастной группой процентное отношение молодых клеток к зрелым возрастает в 1,62 раза и общая численная плотность молодых МЭК становится в 1,91 раза больше, чем зрелых (табл. 1). У зрелых МЭК ядерно-цитоплазматическое отношение значимо выше по сравнению с контрольной группой, что указывает на их функциональную активность (табл. 2). Также необходимо отметить, что количество молодых МЭК в этом возрасте повышено (рис. 1) по сравнению с контрольным возрастом (рис. 2) и процентное отношение количества молодых МЭК к зрелым в 5,6 раза больше, что позволяет отметить повышенную пролиферативную активность молодых МЭК в этом возрасте.

В позднем детском возрасте (4–7 лет) ограничивается рост паренхимы, ее объемная доля снижается в 1,2 раза [1]. Внутри возраста площади ядер у молодых МЭК значимо меньше зрелых, а цитоплазма имеет тенденцию к увеличению (табл. 2). В данном возрасте уменьшается процентное отношение молодых клеток, которых становится в 2,16 раза меньше, чем зрелых, и это событие отмечается возрастным перекрестом в 3–4 года. В дальнейшем в развитии подчелюстной железы будет сохраняться преобладание зрелых МЭК над молодыми (рис. 3).

Рис. 1. Поднижнечелюстная железа в раннем детстве:

красными звездочками обозначены молодые МЭК, зелеными звездочками – зрелые МЭК. Окраска по Ван Гизону. При фотографировании микропрепарата было доработано освещение и подобраны фильтры

Рис. 2. Фрагмент дольки поднижнечелюстной железы в первом взрослом возрасте: красными звездочками обозначены зрелые МЭК, зелеными – молодые МЭК, желтой – зрелая МЭК на границе белкового концевого отдела и вставочного протока.

Окраска по Ван Гизону

Рис. 3. Возрастные изменения количества молодых и зрелых миоэпителиальных клеток в ацинусах поднижнечелюстных желёз человека. По оси ординат – процентное содержание, по оси абсцис – возрастные группы

В подростковом периоде (8–17 лет) замедляется рост паренхимы, количество белковых концевых отделов уменьшается до 24±2,5 и увеличивается объем стромы [1]. Общая численная плотность МЭК меньше в 1,42 раза, чем в группе контроля. Молодых МЭК в 1,8 раза меньше, чем зрелых, их площади ядра и цитоплазмы уступают зрелым клеткам, но ядерно-цитоплазматическое отношение не имеет значимых различий, что указывает на состояние функционального покоя (табл. 2). На основании этих данных можно говорить о том, что в этом возрасте зрелых клеток больше, чем молодых, не наблюдается значимых различий по всем показателям с контрольным возрастом, что указывает на зрелость и функциональную стабильность МЭК.

В юношеском периоде (18–21 год) преобладают зрелые клетки, их в 2,03 раза больше, чем молодых. В сравнении с контрольной группой у зрелых МЭК площадь ядра значимо меньше и наблюдается тенденция к уменьшению площади цитоплазмы (табл. 2). Ядерно-цитоплазматическое отношение у зрелых клеток выше показателя контрольной группы, но они имеют меньшие размеры по сравнению с контрольным возрастом, что указывает на гипотрофию клеток и функциональную напряженность. Эти изменения можно связать с активным развитием паренхимы железы [1].

Второй взрослый возраст (36–60 лет) характеризуется усиленным ростом белковых концевых отделов [1]. Резко снижена общая численная плотность как молодых, так и зрелых МЭК, процентное же содержание молодых МЭК в группе в 2 раза меньше, чем зрелых, но оно выше в 1,32 раза по сравнению с контрольным возрастом (табл. 1). Площадь ядер молодых МЭК меньше, чем зрелых, но нет значимых различий в размерах цитоплазмы и ядерно-цитоплазматическом отношении, что говорит о функциональном покое молодых МЭК. Зрелые МЭК проявляют тенденцию к увеличению площади цитоплазмы по сравнению с контрольной группой, и ядерно-цитоплазматическое отношение у них значимо выше (табл. 1). Это свидетельствует о повышении функциональной активности зрелого миоэпителия, но снижение при этом численной плотности клеток, скорее всего, указывает на компенсаторное его напряжение.

В пожилом возрасте (61–74 года) процентное отношение количества молодых МЭК в 2,6 раза меньше зрелых и общая численная плотность высокая. У зрелых МЭК площадь ядра имеет тенденцию к уменьшению в сравнении с контрольным возрастом, а площадь цитоплазмы имеет самое высокое значение среди всех возрастных групп, что свидетельствует о снижении функциональной активности (табл. 2).

При анализе различных возрастных групп оказалось, что самое высокое процентное отношение молодых МЭК к зрелым и самая низкая численная плотность зрелых клеток - в раннем детстве, что указывает на активные пролиферативные процессы. Наблюдаются следующие изменения численной плотности молодых миоэпителиальных клеток в возрастных группах: во-первых, начиная с грудного возраста и до позднего детства идет ее снижение; во-вторых, показатель численной плотности не изменяется, начиная с позднего детства и вплоть до первого взрослого возраста; в-третьих, в позднем взрослом возрасте происходит снижение этого показателя с последующим подъемом в пожилом возрасте (рис. 3). Во всех возрастных группах у молодых МЭК морфометрические показатели не имеют значимых различий с контрольным возрастом, что говорит о стабильном функциональном состоянии. Основные изменения наблюдаются у зрелых МЭК. Так, в зрелом возрасте самые высокие значения площади ядер, самые высокие значения площади цитоплазмы в подростковом возрасте и пожилом, также в этих возрастах самые маленькие значения площади ядер, что указывает на снижение функциональной активности. Стоит отметить, что два этих возраста характеризуются прекращением роста паренхимы и началом роста стромы органа [1].

Заключение

Таким образом, настоящее исследование выявило динамику количественных морфологических изменений миоэпителиальных клеток серозных концевых отделов поднижнечелюстных желез человека в различные возрастные периоды. В раннем детстве в период роста паренхимы повышена пролиферативная активность МЭК, численно преобладают молодые клетки. После возрастного перекреста в периоде позднего детства начинается быстрое созревание МЭК и процентное отношение сдвигается в сторону зрелых клеток. В последующем количественно преобладают зрелые клетки, но обращают на себя внимание периоды функциональной напряженности миоэпителия (юношеский, второй зрелый и пожилой возраст), которые также совпадают со стромально-паренхиматозной перестройкой слюнных желез, как и период раннего детства, и являются критическими в развитии опухолей миоэпителиальной природы.