Онкопатология продолжает занимать лидирующее положение в мире, несмотря на успехи в лечении и внедрении высокотехнологичных методов оказания специализированной помощи, по смертности уступает лишь сердечно-сосудистой патологии. Специалисты ВОЗ прогнозируют повышение заболеваемости и смертности от онкологических заболеваний, и в 2030 г. эта патология станет причиной летального исхода более чем в 13 млн случаев. При этом ведущая роль продолжает принадлежать колоректальному раку. Риск развития этой патологии достигает 5-6%, т.е. в течение жизни 1 из 20 человек заболевает колоректальным раком. В год, по данным мировой статистики, диагностируется до 1 миллиона случаев первичной заболеваемости. Россия, как и европейские страны, Северная Америка, не является исключением [1; 2]. Заболеваемость раком ободочной кишки возрастает, превышая аналогичные показатели рака прямой кишки, и составляет 16,2 на 100 тысяч населения. Большой проблемой остается своевременная диагностика ранних форм заболевания. Несмотря на развитие диспансеризации населения РФ при профилактических осмотрах, выявляется лишь 2% опухолей. При этом в I–II стадиях заболевание выявляется лишь у 20% больных, почти 40,0% случаев – это выявленные новообразования ободочной кишки в III стадии. Отдаленные метастазы у больных с впервые установленным диагнозом рака ободочной кишки есть уже у каждого третьего пациента [2; 3]. Одни из важных диагностических подходов в ранней диагностике злокачественных новообразований и в последующем мониторинге - исследования серологических опухолево-ассоциированных маркеров (ОМ). В решении проблемы ранней диагностики этой тяжелой патологии исследователи не оставляют попыток внедрения в алгоритм раннего диагностического поиска онкомаркеров [2-5].

Внедрение биохимических (клинико-химических по зарубежной терминологии) лабораторных тестов в онкологической практике экспоненциально увеличивалось, отношение к этим методам диагностики пересматривалось в течение последних лет. После пика применения данных методов диагностики, пришедшегося в России на начало XXI века, произошло снижение интереса к этим методам, однако в последние годы интерес и попытки применения ОМ на ранних этапах диагностического поиска возобновляются. Новые технологические достижения на каждом этапе приводили к замене старых лабораторных методик на более совершенные, точные и более чувствительные.

К онкомаркёрам относится большая группа факторов, обнаруживаемых в злокачественных и ассоциированных с опухолевым патологическим процессом. Это макромолекулы, в основном белки с углеводным или липидным компонентом. Онкомаркёры отличаются качественно (опухолево-специфичные) или количественно (ассоциируемые с опухолью, но присутствующие и в нормальных клетках) от соединений, продуцируемых непатологическими образованиями. Требования, предъявляемые к тестам на ОМ, общеизвестны: воспроизводимость и надежность (внутритестовая вариация <5%, межтестовая вариация <10%), широкий аналитический диапазон, доступная цена, специфичность > 95%, чувствительность > 50%, оптимальные, прогностические показатели (как положительные, так и отрицательные), корреляция с массой опухоли, экологически чистые реагенты и упаковка.

Раково-эмбриональный антиген - гликопротеин, первоначально идентифицирован у больных с эпителиальным раком эндодермального происхождения и карциномой прямой кишки Gold et Freedman. Молекула РЭА, в зависимости от метода выделения, имеет гетерогенный состав благодаря углеводам (до 50-60%), растворяется в перхлоруксусной кислоте, имеет молекулярную массу 175.000-200.000 Дальтон. РЭА - онкофетальный белок, обнаруживается в клетках эпителия пищеварительного тракта, бронхов. В первом триместре беременности он присутствует в клеточной цитоплазме, а затем становится составной частью поверхностных клеточных мембран плода. Продуцируется у взрослых в ограниченных количествах эпителиальными клетками бронхов, молочной железы, пищеварительного тракта. Также выявлены его минимальные количества в крови, спинномозговой жидкости, асцитической жидкости, плевральном экссудате. Наиболее высокое содержание этого ОМ определяется в слюнных железах и их протоках. Метаболизируется в печени. Биологический период жизни составляет для РЭА 14 дней.

Цель исследования: проанализировать чувствительность, специфичность ракового эмбрионального антигена и целесообразность его применения в диагностике колоректальной аденокарциномы.

Материалы и методы исследования

Предмет исследования: пациенты с колоректальной аденокарциномой и группа сравнения.

Обследованы 84 пациента на раковый эмбриональный антиген (РЭА). Исследование выполнялось в Центральной научной исследовательской лаборатории (ЦНИЛ) Северного государственного медицинского университета (СГМУ) г. Архангельска на иммуноферментном анализаторе Antos 2020 тест СЕА, серийный номер №19575-1, вид измерений - по конечной точке. Использованы фильтры с длиной волны 405 и 620 нм, дополнительно выполнен внутренний контроль качества работы стандартными сыворотками фирмы-производителя с заведомо известными концентрациями. Применён метод контроля качества работы постановкой дополнительных стандартов сывороток с заведомо известными концентрациями. Результат считывался: при длине волны 620 нм сразу, при длине волны фильтра 405 нм через 30 мин после добавления стоп-реагента.

Все обследованные   разделены на две группы. Первая группа (А) - пациенты без онкопатологии (50 случаев), вторая группа (В) (34 случая) - пациенты с колоректальной аденокарциномой поперечно-ободочной кишки, различного уровня поражения, сигмовидной и прямой кишки – статистической обработке в этой группе подвергся 31 случай. Диагноз был подтвержден фиброколоноскопией с прицельной биопсией из патологического очага и последующим гистологическим исследование препарата. Отдельно выделена группа С – все пациенты с онкопатологией различной локализации (47 пациентов). Статистический анализ проводился с использованием пакета прикладных программ STATA12.1. В описании данных статистического анализа использованы следующие статистические понятия: «среднее значение», «стандартное отклонение», медианы (Мd), соответствующие 10-му и 90-му процентилям (P10-P90), критерий Шапиро-Уилка, критерий χ2 Пирсона и точный двусторонний критерий Фишера, t-критерий для несвязанных групп, критерий Левене, U-критерий Манна-Уитни. Также применялся U-критерий Манна-Уитни парных с поправкой Бонферрони, тест Джонкхира-Терпстры, анализ ROC-кривых. В качестве критерия статистической значимости была выбрана вероятность случайной ошибки менее 5% (P<0,05).

Характеристика группы А: средний возраст 59,0 ± 15,0 лет, женщины - 21 (41,2%), мужчины - 30 (58,8%); группа В – средний возраст 67,4±8,7 года, женщины – 10 (30,3%), мужчины - 23 (69,4%), группа С - средний возраст 65,4 ±2,1 года, женщины – 20 (42,5%), мужчины - 27 (57,4%). В группах А и В определялись следующие лабораторные показатели: скорость оседания эритроцитов (СОЭ), количество лейкоцитов, лимфоцитов, эритроцитов, гемоглобин, общий белок.

Результаты исследования и их обсуждение

Значения РЭА имеют выраженную разницу значений среди пациентов с онкопатологией и здоровыми. У неонкологических пациентов РЭА =2,05±0,37 (р<0,001); в группе пациентов с колоректальной аденокарциномой РЭА = 23,4±5,9 (р=0,0005), что в десять раз выше, чем в группе сравнения (табл. 1).

Таблица 1

Значение РЭА у здоровых и больных с раковыми заболеваниями

Однако достоверность показателя выявляется между здоровыми и больными с аденокарциномой толстой кишки (табл. 2). Поэтому дальнейшая статистика сравнивала только эти две группы.

Таблица 2

Значение РЭА у больных с аденокарциномой и у здоровых пациентов

Значение РЭА в группе А составило при длине волны 620 н/м – 2,0 нг/мл (наибольшее 12,4 нг/мл) и 1,9 нг/мл при длине волны 420 н/м (наибольшее 12,3 нг/мл). В группе В этот показатель при длине волны 620 н/м – 19,0 нг/мл (наибольшее 92,2 нг/мл) и 12,6 нг/мл при длине волны 420 н/м (наибольшее 103,5 нг/мл).

В группе А показатели общего анализа крови незначительно, но отличались от показателей в группе В. Так, в группе А: гемоглобин 131,0 г/л ±21,6 г/л, в группе В: 116 г/л ±24,8 г/л, т.е. есть лабораторные маркеры анемии по данному показателю у пациентов с аденокарциномой толстой кишки, что не выявлено по количеству эритроцитов: группа А 4,6 х1012 ± 0,7 х 1012, группа В - 4,3 х1012 ± 0,7 х 1012. Общий белок крови также имеет незначительные отличия в этих двух группах. В группе А средний показатель общего белка - 65,8 ± 8,2 г/л, в группе В - 63,1 ± 8,2 г/л. Однако СОЭ статистически достоверно отличается в этих группах: в группе А СОЭ – 15,0 мм/час (наибольшее значение 65 мм/час), при этом данный показатель (СОЭ) в группе В в среднем составлял 24,1 мм/час (наибольшее значение – 60 мм/час) р <0, 000 (табл. 3).

Таблица 3  

Сравнительная характеристика показателей общего анализа крови в группе онкологических больных и пациентов без онкопатологии

У пациентов с онкопатологией выявлена умеренная теснота связи между возрастом и уровнем гемоглобина в общем анализе крови (r =0,47, p =0,039), что не характерно для больных без онкопатологии. В обеих группах выявлена умеренная и высокая теснота связи между СОЭ и уровнем гемоглобина, гематокрита, количеством эритроцитов. По результатам нашего исследования не определяется высокая степени тесноты связи между увеличением значения РЭА и такими данными, как N, характеризующее наличие и распространенность метастазов в регионарных лимфатических узлах, так и М – отсутствие или наличие отдаленных метастазов. Однако между распространенностью опухоли (Т) и РЭА при Т4 (опухоль прорастает всю стенку кишки и выходит за пределы органа) определена заметная степень тесноты связи: r =0,5, p =0,006. Этим и объясняется значимый тренд (p<0,001) увеличения РЭА при возрастании степени опухоли по TNM (тест Jonkheere-Teerpstra). Однако это уже запущенные формы заболевания, при которых радикальное лечение невозможно. Вместе с тем изменение такого показателя, как общий белок сыворотки крови, у пациентов с колоректальной аденокарциномой уже с Т2 имеет заметную степень тесноты связи: r =0,6, p =0,007. Также прослеживается высокая степень тесноты обратной связи между показателями РЭА и общего белка крови в группе колопроктологических больных (р=0,05, r =-0,9). Мы не получили высоких показателей чувствительности данного теста при раке толстой кишки (50%), специфичность РЭА при нашем исследовании составила 85%. В то же время фиброколоноскопия, как метод диагностики рака толстой кишки, имеет неоспоримые преимущества с чувствительностью 94,4% и специфичностью 89,9%. Визуализацию онкопроцесса можно улучшить с применением хромофиброколоноскопии, а прицельная биопсия с последующим гистологическим исследованием препарата дает окончательный ответ.

Диагностика злокачественных новообразований толстой кишки возрастает с каждым годом в связи с ростом числа онкологических заболеваний в России и мире, поздней выявляемостью, высокой смертностью. В последние годы вновь возрастает интерес к применению онкомаркеров в ранней диагностике онкопатологии. Так, например, по данным мониторинга, проведенного в Мурманской области по назначению исследований сыворотки крови на онкомаркёры, установлено, что в целом отмечается тенденция к росту этих исследований, общее количество показателей увеличилось на 22,5%. Доминирующие позиции занимает РЭА, уступающий лишь СА 125 [6].

Работами последних лет показано, что величина РЭА зависит от среды проживания человека [1; 2; 4; 5]. Повышенное содержание онкомаркеров, в том числе и РЭА, выявлено у жителей 30-км зоны Ростовской АЭС [7]. Исследованием Кривоноговой О.В. (2011) определено повышение концентраций раково-эмбрионального антигена в крови в возрастной группе 31-40 и более лет. Мы в своей работе не выявили отклонения показателей РЭА среди пациентов, не страдающих онкопатологией.

По данным нашего исследования, РЭА не обладает ни 100% специфичностью, ни чувствительностью. Так, чувствительность РЭА при нашем исследовании 50%, а специфичность 85,0%. Таким образом, при тестировании группы из 10 000 человек, среди которых 1% имеют данное заболевание, случаев карциномы толстой кишки будет выявлено всего 50. При этом специфичность 85% говорит о том, что 50 истинноположительных результатов будут сопровождаться 1485 ложноположительными (15% от 9900). В этом плане фиброколоноскопия, как метод ранней диагностики патологии толстой кишки, имеет неоспоримые преимущества, дает возможность не только визуализации патологического очага, но и выполнения прицельной биопсии с гистологическим исследованием биоптата, а применение ультразвука позволяет определить глубину инвазии патологического процесса в стенку кишки.

Данный факт сдерживает применение этого метода в первичной диагностике колоректальной аденокарциномы. По нашим данным, как и по результатам, полученным Ереминой Е.Ю., Кондратенко Ю.Н. (2011) [2], по оценке уровня РЭА достоверно можно определить только III стадию заболевания, когда опухолевый процесс распространяется за пределы одного органа, и IV стадию заболевания, которая выявляется уже клинически. Возможно, применение РЭА в совокупности с другими маркерами злокачественных опухолей, а также оценкой показателей общего белка сыворотки крови поможет улучшить раннюю диагностику онкопатологии, однако применение РЭА в монорежиме недостаточно информативно.

Заключение

Раковый эмбриональный антиген, как метод диагностики, обладая рядом преимуществ, таких как малоинвазивность, дешевизна, доступность на амбулаторно-поликлиническом этапе, возможность динамического лабораторного мониторинга, не может быть использован как метод диагностического выбора при злокачественных новообразованиях у колопроктологических пациентов. Применение РЭА малоинформативно для скрининга бессимптомных пациентов при колоректальной онкопатологии. Основным применением исследования на РЭА является мониторинг течения заболевания по уровню динамики данного онкомаркера. Приоритетным в постановке диагноза является фиброколоноскопия с прицельной биопсией и гистологическим исследованием материала.

Авторы благодарят за помощь в проведении исследования д.м.н., доцента А.В. Горенькову и всех научных сотрудников ЦНИЛ ФГБУ ВПО «СГМУ» (г. Архангельск) Минздрава России.