Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

EFFICIENCY OF THE BETUCLADINE NATURAL COMPLEX IN COMPLEX THERAPY FOR CHRONIC VIRAL HEPATITIS "B" WITH DELTA AGENT

Sleptsova S.S. 1 Struchkova T.F. 1 Kolosova O.N. 2 Shashurin M.M. 3 Zamorschikova O.M. 1 Kershengolts B.M. 3
1 North-Eastern Federal University named after M.K. Ammosov Medical Institute
2 Institute for Biological Problems and Cryolithozone of the Siberian Branch of the RAS - Division of the Federal Research Center Yakutsk Scientific Center of the Siberian Branch Russian Academy of Sciences
3 Institute for Biological Problems and Cryolithozone of the Siberian Branch of the RAS - Division of the Federal Research Center Yakutsk Scientific Center of the Siberian Branch Russian Academy of Sciences
Цель: изучение и обоснование применения природного комплекса «Бетукладин» в комплексной терапии хронического вирусного гепатита B с дельта агентом в экспериментальных условиях. Материалы и методы: Оценка эффективности Бетукладина проведена путем динамического контроля за уровнем ряда клинико-лабораторных параметров. Результаты: За период наблюдения, у 71,4% пациентов экспериментальной группы отмечалось улучшение общего самочувствия, увеличение работоспособности и улучшение сна (в контрольной группе 56,7%). Уменьшение синдрома цитолиза наблюдалось у 71,4% обследуемых в экспериментальной группе и у 40% в контрольной группе. У 64,3% больных экспериментальной группе отмечалось увеличение показателя уровня гемоглобина, в контрольной группе - 30%. В экспериментальной группе у 50% больных, до начала приема бетукладина, наблюдалась лейкопения; повышение содержания лейкоцитов до значений нормы достигнуто у 71,4% больных (в контрольной группе у 40%). Отмечается нормализация уровня общего белка и альбумина в экспериментальной группе у 78,6% больных (в контрольной группе - у 20%). Заключение: в функциональном состоянии гепатобилиарной системы у больных с вирусным гепатитом В с дельта-агентом при дополнительном приеме Бетукладина отмечается достоверно положительная динамика по сравнению с контрольной группой.
Purpose: to study and substantiate the use of the natural complex «Betuсladin» in the complex therapy of chronic viral hepatitis B with a delta agent under experimental conditions. Materials and methods: Evaluation of the effectiveness of «Betuсladin» was carried out by dynamic monitoring of the level of a number of clinical and laboratory parameters. Results: During the observation period, 71.4% of patients in the experimental group showed an improvement in general well-being, an increase in working capacity and an improvement in sleep (56.7% in the control group). A decrease in cytolysis syndrome was observed in 71.4% of the subjects in the experimental group and in 40% in the control group. In 64.3% of patients in the experimental group, an increase in the hemoglobin level was noted, in the control group - 30%. In the experimental group, 50% of patients had leukopenia before starting betukladin administration; an increase from the content of leukocytes to normal values was achieved in 71.4% of patients (in the control group in 40%). Normalization of the level of total protein and albumin is noted in the experimental group in 78.6% of patients (in the control group - in 20%). Conclusion: In the functional state of the hepatobiliary system in patients with viral hepatitis B with a delta agent, with the additional intake of «Betuсladine», there is a significantly positive trend compared with the control group.
infectious diseases
viral hepatitis
treatment of hepatitis b with a delta agent
hepatoprotectors
betulin
lichen

Гепатит В с дельта-агентом – быстропрогрессирующее заболевание печени, приводящее в течение нескольких лет к компенсированному или декомпенсированному циррозу. Хроническое течение гепатита D отличается агрессивностью и приводит к циррозу печени значительно раньше, чем гепатит В [1–3].

Республика Саха (Якутия) является неблагополучной территорией по заболеваемости гемоконтактными гепатитами [4], частота обнаружения антител к которым в разных районах Якутии колеблется от 17,2% до 31,7% у больных гепатитом В [3].

В настоящий момент не существует стандартов терапии гепатита D, в текущих руководствах рекомендуется прием пегилированных интерферонов-альфа в течение как минимум 48 недель [3]. В среднем уровень устойчивого вирусологического ответа низкий, однако это лечение является независимым фактором, ассоциированным с меньшей вероятностью прогрессирования заболевания [5–7].

Для поддержания нормального функционирования печени применяются гепатопротекторы растительного происхождения и на основе аминокислот. В связи с этим к числу ценных источников биоактивных веществ относятся бетулин, выделяемый из коры березы, а также комплекс биоактивных веществ, выделяемых из лишайников рода Cladonia [8, 9]. Бетулин – основной компонент экстракта бересты (60–85% состава), в который, кроме него, входят лупеол, лупенон, бетулиновая кислота, олеаноловая кислота, бетулон, бетулоновый альдегид и другие соединения [10]. Противовоспалительная активность бетулина обусловлена его репаративным, антиоксидантным, противомикробным и противовирусным действием [10]. Исследования, проведенные отечественными и зарубежными учеными, показали, что бетулин обладает также антигипоксантной, гиполипидемической, противовирусной и гепатопротекторной активностью [11]. Механизм действия бетулина связан с его вирулицидным, интерфероногенным, иммуномодулирующим действием. Бетулин блокирует сайт в молекуле вирусного белка, в результате чего вирус лишается возможности инфицировать другие клетки. Бетулин стабилизирует мембраны митохондрий, запускает естественный процесс апоптоза, не позволяя митохондриальной ДНК выйти из поврежденной клетки [10]. Важным фактором применения бетулина является отсутствие токсичности и побочных эффектов даже при его длительном применении и тяжелом поражении паренхимы печени [10].

Состав ягеля хорошо изучен, содержащиеся в нем вещества разделяют на первичные и вторичные [12]. Первичные лишайниковые вещества представлены в основном прочными β-полисахаридами лихенина и изолихенина. Ко вторичным лишайниковым веществам относится усниновая кислота, в большом количестве продуцирующаяся в надземной части ягеля [8, 13,14].

Биопрепарат «Бетукладин» получают путем совместной механохимической активации бетулина и слоевищ лишайников рода Cladonia [10,15]. Образующиеся при такой биотехнологической переработке лишайниковые β-олигосахариды, создавая с бетулином и усниновой кислотой супрамолекулярные комплексы, повышают их биоусвояемость. Сами лишайниковые β-олигосахариды обладают высокой способностью к детоксикации внутренних сред организма [10, 14].

Таким образом, БАД «Бетукладин» обладает противовирусным, антибактериальным, гепатопротекторным, иммуномодуляторным и детоксикационными свойствами, которые могут оказать лечебное патогенетическое действие при хроническом вирусном гепатите B с дельта-агентом.

Цель исследования: изучение и обоснование применения природного комплекса «Бетукладин» в комплекcной терапии хронического вирусного гепатита B с дельта-агентом в условиях клинического исследования.

Материалы и методы исследования

1. Для этиологической верификации гепатитов использованы серологические и вирусологические методы исследования, в частности ИФА (иммуноферментный анализ) с применением отечественных тест-системы ЗАО «Биосервис» (Москва), ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), НПО «Диагностические системы» (Нижний Новгород), «Вектогеп D - антитела-стрип» и зарубежных диагностикумов «Hoffmann La Roche», «Орженикс» и «Лабсистемс». Для выделенияDNA-HBV, RNAHCVиHDVприменялся метод ПЦР-диагностики (полимеразная цепная реакция).

2. Оценка эффективности комплекса «Бетукладин» проведена путем динамического контроля за уровнем следующих клинико-лабораторных параметров: гемоглобина, эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, гематокрита, общего белка и/или альбумина, креатинина, мочевой кислоты, С-реактивного белка (СРБ), аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), общего билирубина, щелочной фосфатазы (ЩФ), альфа-фетопротеина (АФП), протромбинового времени (ПТВ).

3. Статистическая обработка полученных результатов проводилась путем сравнения гематологических и объективных показателей до, во время и в конце исследования через 1 год после начала приема комплекса «Бетукладин» в обеих группах, оценка полученных результатов осуществлялась с использованием критерия хи-квадрат при помощи онлайн-калькулятора medstatistic.com.

Пациенты контрольной группы получали стандартное лечение, основной группы – стандартное лечение и природный комплекс «Бетукладин» по 400 мг в сутки (по 2 капсулы по 100 мг 2 раза в день через 1–1,5 ч после еды, запивая достаточным количеством воды), курсами по 2 месяца с ноября 2019 г. по март 2020 г. На каждого больного по результатам комплексного обследования заполнена разработанная «Индивидуальная карта испытуемого».

Критерии включения: возраст от 18 до 70 лет включительно на момент предоставления письменного информированного согласия на участие в исследовании; наличие HBsAg и анти-HDVв сыворотке в течение минимум 6 последних месяцев; положительный результат ПЦР на HDV РНК в сыворотке на скрининге; пациенты с циррозом печени класса А и В по Чайлд-Пью независимо от предшествующей терапии интерферонами; пациенты без цирроза печени, у которых предшествующая терапия интерферонами была неэффективна или, по мнению врача-исследователя, в настоящий момент противопоказана; уровень АЛТ более 1 ВГН, но менее 10 ВГН; отрицательный тест на беременность по анализу мочи у женщин – участниц исследования детородного возраста.

Критерии исключения: класс печеночной недостаточности С по шкале Чайлд-Пью; наличие психических заболеваний, аутоиммунных заболеваний, злокачественных новообразований; туберкулез любой локализации в активной фазе и в анамнезе; тяжелые и декомпенсированные заболевания печени и почек, сердечно-сосудистой и эндокринной систем; беременность и период лактации.

Результаты исследования и их обсуждение. По данным системы мониторинга больных вирусными гепатитами «Регистр больных вирусными гепатитами в Республике Саха (Якутия)» зарегистрированы 7447 пациентов с хроническим вирусным гепатитом В, в том числе с дельта-агентом – 1158, из них с циррозом печени – 184, с гепатоцеллюлярной карциномой – 7, с ГЦК на фоне цирроза печени HDV-этиологии – 10. В 2019 г. в отделение для лечения больных вирусными гепатитами Якутской республиканской клинической больницы были госпитализированы 692 больных с хроническими вирусными гепатитами, из них 310 (45%) – с хроническим вирусным гепатитом В с дельта-агентом, из которых 72% имели установленный диагноз «цирроз печени». Умерли всего за год 34 пациента, из них 29,4% – в исходе осложнений HDV-инфекции.

В целях изучения гепатопротекторных свойств природного комплекса «Бетукладин» организованы две группы. Пациенты наблюдаемых групп были сопоставимы по возрастно-половому и социальному составу. Средний возраст пациентов в основной группе – 42 года, женщин – 2, мужчин – 12; в контрольной группе средний возраст – 45 лет, женщин – 11, мужчин – 19.

Перед началом клинических испытаний БАД «Бетукладин» проведен контроль анализов крови: общий анализ крови (определены уровень гемоглобина, лейкоцитов, тромбоцитов, гематокрит, СОЭ); биохимический анализ (определены общий белок и альбумин, мочевина, креатинин, АЛТ, АСТ, общий и связанный билирубин, щелочная фосфатаза, гамма-глутамилтрансфераза); коагулограммы (исследованы протромбиновое время, МНО); ПЦР на качественное и количественное исследование ДНК-HBV и РНК-HDV. Далее контроль проводился после первого курса приема БАД «Бетукладин» в течение 1 месяца, через 3 месяца после первого курса приема и после второго курса приема БАД «Бетукладин» в течение 3 месяцев; ПЦР – до и после исследования.

Не были включены в результаты исследования 6 пациентов, прервавших лечение и добровольно отказавшихся от приема БАД «Бетукладин», а также 1 пациент с резким ухудшением состояния, не связанным с приемом БАД «Бетукладин».

Также учитывались субъективные данные: общее самочувствие, улучшение/ухудшение качества сна и засыпания, аппетит, появление слабости и утомляемости.

После второго курса приема «Бетукладина» у большинства пациентов основной группы (71,4%, 10 человек) отмечаются значительные улучшение общего самочувствия, увеличение работоспособности и улучшение качества сна по сравнению с контрольной группой (56,7%; табл.).

Уменьшение синдрома цитолиза в виде снижения уровня АЛТ и АСТ наблюдается у 71,4% пациентов, что значительно выше, чем в контрольной группе (40%), где у большинства пациентов отмечается тенденция к увеличению уровней АЛТ и АСТ. Также в основной группе увеличение показателя уровня гемоглобина отмечено у 64,3% больных, в контрольной группе – у 30%. В основной группе у 7 из 14 пациентов до начала приема БАД «Бетукладин» наблюдалась лейкопения. Прием БАД «Бетукладин» позволил увеличить долю больных в основной группе с нормальным содержанием лейкоцитов до 71,4% случаев (в контрольной группе через 7 месяцев она составила 40%). Отмечается уменьшение гипопротеинемии в виде увеличения уровня общего белка, альбумина у 78,6% больных основной группы (в контрольной группе – у 20%).

Динамика изменения основных параметров в исследуемых группах

 

Показатели

Основная группа

(n=14)

Контрольная группа (n=30)

Критерий

Хи-квадрат Пирсона

Уровень значимости

df=1

Абс.

%

Абс.

%

Улучшение общего самочувствия, увеличение трудоспособности

10

71,4

17

56,7

0,204

ρ=0,652

Уровень трансаминаз (АСТ до 45 ед/л)

10

71,4

12

40,0

3,945

ρ=0,053

Уровень трансаминаз (АЛТ до 32 ед/л)

10

71,4

12

40,0

3,945

ρ=0,053

Повышение уровня гемоглобина

9

64,3

9

30,0

3,721

ρ=0,054

Повышение уровня лейкоцитов на фоне исходной лейкопении

10

71,4

12

40,0

0,116

ρ=0,280

Повышение уровня белковых фракций

11

78,6

6

20,0

13.812

ρ<0,001

Повышение до нормального уровня лейкоцитов отмечается в обеих группах в равной степени. Уровень лимфоцитов был в пределах нормы в обеих группах, снижаясь в контрольной группе с 1,58х109/л до 1,32х109/л и с 1,68х109/л до 1,58х109/л в основной группе. У больных основной группы на 15% и 14% увеличивались уровни гемоглобина и тромбоцитов соответственно (в контрольной группе эти показатели снижались на 4% и 13% соответственно). У пациентов основной группы отмечалось снижение уровня СОЭ с 14,2 до 10,2 мм/ч (норма до 10–15 мм/ч). В контрольной группе уровень СОЭ оставался выше нормы, колеблясь в диапазоне 20,6–17,6 мм/ч.

Отмечалась тенденция увеличения уровня АФП (маркера развития гепатоцеллюлярной карциномы) в обеих группах за время наблюдений: в основной – с 83,3 до 93,3; в контрольной – с 151,4 до 162,6 (при норме до 10 МЕ/л), оставаясь в исследуемой основной группе в 1,7–1,8 раза ниже, чем в контрольной.

На гипохолестеринемическое и сахароснижающее действие БАД «Бетукладин» указывает снижение уровня холестерина в основной группе с 4,64 до 4,49 ммоль/л (в контрольной группе – увеличение с 4,7 до 5,0 ммоль/л). Содержание глюкозы в крови больных основной группы оставалось в диапазоне 4,4–4,6 ммоль/л (в контрольной группе повышалось от 4,7 до 5,3 ммоль/л). Снижение общего и прямого билирубина отмечено у больных основной группы, в то время как у больных контрольной группы отмечено их увеличение.

После двух курсов приема БАД «Бетукладин» у 79% больных основной группы повысилась биосинтетическая активность печени, приведшая к увеличению уровня общего белка (в среднем от 74 до 80 г/л), в том числе альбумина (в среднем от 34 до 41 г/л); в контрольной группе – у 20% больных, притом что к концу 2-го месяца эти показатели снижались до 60 и 29 г/л соответственно (рис. 1).

Рис. 1. Средние показатели общего белка и альбумина в исследуемых группах в динамике

Рис. 2. Средние показатели АЛТ и АСТ в исследуемых группах в динамике

У больных основной группы показатели АЛТ и АСТ в крови снизились по сравнению с исходными данными. В контрольной группе эти показатели в период наблюдений колебались с большой амплитудой, но в конечном итоге достоверно не изменялись (АЛТ – с 98,4 до 92,2 ед/л, АСТ – с 85,5 до 84,8 ед/л), превышая у большинства пациентов нормальные значения (рис. 2).

Заключение

Таким образом, в функциональном состоянии гепатобилиарной системы у больных с вирусным гепатитом В с дельта-агентом по основным показателям клинико-лабораторных показателей крови при дополнительном приеме БАД «Бетукладин» отмечается достоверная положительная динамика по сравнению с контрольной группой.

Применение БАД «Бетукладин» повышает эффективность комплексного лечения больных вирусным гепатитом В с дельта-агентом, что проявляется в снижении синдромов цитолиза (АЛТ, АСТ), цитопении (увеличение уровня лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина), в уменьшении гипопротеинемии (увеличение уровня общего белка и альбумина), а также в улучшении общего самочувствия, увеличении трудоспособности, улучшении качества сна.