Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

GENETIC MARKERS OF CHRONIC HEART DISEASE INSUFFICIENCY WITH A PRESERVED EJECTION FRACTION

Sveklina T.S. 1 Shustov S.B. 1 Kolyubaeva S.N. 1 Kuchmin A.N. 1 Kondratenko A.A. 1 Kozlov V.A. 2
1 S. M. Kirov Military Medical Academy
2 Chuvash State University named after I. N. Ulyanov
Цель исследования – изучение сочетания генетических показателей предрасположенности к сердечно-сосудистым заболеваниям у лиц с хронической сердечной недостаточностью ХСН с сохраненной фракцией выброса. Материал и методы. Всего обследовано 50 пациентов с ХСН и 50 лиц без симптомов ССЗ. Средний возраст пациентов с ХСН – 68,0±6,7, в контрольной группе – 35,6 ±8,3 года. Критерии отбора больных: классические симптомы ХСН, фракция выброса (≥ 50%, 40-50% и ≤ 40%); увеличение плазменной концентрации мозгового натрийуретического пептида (МНП) более 35 пг/мл и/или его N-концевого предшественника (NT-proBNP) более 125 пг/мл; выявление дополнительного критерия ХСН (гипертрофия левого желудочка и/или дилатация левого предсердия, и/или диастолическая дисфункция). Исследовали генные маркеры, ассоциированные с гипертензией и гиперкоагуляцией, патологией метаболизма лекарственных средств, углеводного и липидного обмена. Результаты: у больных с ХСН по сравнению с эталонной группой увеличена частота однонуклеотидных полиморфизмов, связанных с формированием: тромбофилии – F13 (rs 5985), ITGB3 (rs 5918), PAI-1 (rs 1799889), MTHFR (rs1801133), MTRR (rs1801394); гипертензии – AGT (rs 699), GNB3 (rs 5443), NOS3 (rs 1799983); нарушением липидного и углеводного обменов – FTO (rs9939609), PON1 (rs 662), ADRB2 (C>G); метаболизма – СYP3A5(G>A), СYP3A5(G>A), CYP11B2 (344C>T). У больных с ХСН с различной фракцией выброса различия частот получены для генов: MTHFR (677C>T) rs 1801133, MTRR (66A>G), AGT (700 T>C) rs 699, FTO (A>T) rs939609. Выводы: у пациентов с ХСН выявлено значимое увеличение количества маркерных полиморфизмов, связанных с развитием гиперкоагуляции, гипертензии, нарушением липидного и углеводного обмена, метаболизма лекарственных средств; частота полиморфизма гена FTO в группе пациентов с ХСН в 1,65 раза превышает частоту в контрольной группе.
The research aim was to study the combination of genetic indicators of predisposition to cardiovascular diseases in individuals with chronic heart failure (CHF) with a preserved ejection fraction. Material and methods. A total of 50 patients were examined with CHF and 50 individuals without CVD symptoms. The patients with CHF average age were 68.0±6.7 years, in the control group – 35.6 ±8.3 years. The patient’s selection criteria were classic symptoms of CHF, ejection fraction (≥ 50%, 40-50% and ≤ 40%); an increase in the plasma concentration of brain natriuretic peptide (MNP) of more than 35 pg / ml and/or its N-terminal precursor (NT-proBNP) of more than 125 pg/ml; identification of an additional criterion for CHF (left ventricular hypertrophy and/or left atrial dilatation, and/or diastolic dysfunction). Gene markers were studied associated with hypertension and hypercoagulation, pathology of drug metabolism, carbohydrate and lipid metabolism. Results: In patients with CHF, compared with the reference group, the frequency of single – nucleotide polymorphisms associated with the formation of: thrombophilia – F13 (rs 5985), ITGB3 (rs 5918), PAI – 1 (rs 1799889), MTHFR (rs1801133), MTRR (rs1801394); hypertension – AGT (rs 699), GNB3 (rs 5443), NOS3 (rs 1799983); violation of lipid and carbohydrate metabolism – FTO (rs9939609), PON1 (rs 662), ADRB2 (C>G); metabolism – CYP3A5(G>A), CYP3A5(G>A), CYP11B2 (344C>T). In patients with CHF with different ejection fraction, frequency differences were found for the genes: MTHFR (677C>T) rs 1801133, MTRR (66A>G), AGT (700 T>C) rs 699, FTO (A>T) rs939609. Conclusions: with CHF patients showed a significant increase in the marker polymorphisms number associated with: 1) the development of hypercoagulation, hypertension, impaired lipid and carbohydrate metabolism, drug metabolism; the frequency of FTO gene polymorphism in the group of patients with CHF is 1.65 times higher than the frequency in the control group.
chf
lvef
genetic polymorphisms
hypercoagulation
hypertension
impaired lipid and carbohydrate metabolism
drug metabolism

Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) – синдром, являющийся следствием первичных заболеваний сердечно-сосудистого континуума (ССК). ХСН, как правило, сопровождается паттерном симптомов: одышка и утомляемость, вызванные низкой резистентностью к физической нагрузке, отеки и др., – связанным с несоответствующей потребностям перфузией органов и тканей в покое или при физической и/или психоэмоциональной нагрузке. В исследовании ЭПОХА было установлено, что частота ХСН любого функционального класса (ФК) в европейской части РФ составляет 7%, а ХСН III–IV ФК – 2,1%. Количество больных с ХСН статистически значимо увеличилось от 4,9% до 10,2%, а с ХСН III–IV ФК – от 1,2% до 4,1% в период с 1998 по 2014 год [1]. Общаясмертностьпациентов с ХСН – 6% в год. Это значит, что в РФ каждую минуту умирает один пациент с ХСН. Поскольку при СН патофизиологический статус ССК нестабилен, риск смерти одинаков как для больных с I и II ФК, так и с III и IV ФК. Причин для развития ХСН достаточно много. ВРоссийской Федерации основными считаются артериальная гипертензия (АГ) и ишемическая болезнь сердца (ИБС) [2], сочетанные у половины больных [3].

Различие причин, приводящих к ХСН, определяет клиническую неоднородность этого состояния. A priori – ХСН не инфекционного генеза в своей основе имеет первичные изменения генома, поздно проявляющие себя в фенотипе сначала в форме патологии сердечно-сосудистой системы, а затем – присоединившейся ХСН. A posteriori – болезни возраста, к которым относятся сопровождаемые ХСН заболевания, являются полигенными. Между тем сложилась практика связывать полигенную патологию с точечной мутацией какого-либо единственного гена, наиболее часто встречающегося при данной патологии. Очевидно, что единственный полиморфизм, частотно связанный с какой-либо возрастной патологией, может быть как непосредственной причиной данной болезни, реализуемой во взаимодействии с рядом других фоновых генов, так и просто полиморфизмом-маркером. То есть не влияющим на формирование патогенеза мутантным геном, но наследуемым вместе с группой патогенных генов в результате кроссинговера. Тогда как сами участвующие в патологическом процессе гены, производящие патологический фенотип, могут наследоваться независимо друг от друга. Вто же время для формирования определенного фенотипа, наследуемого полигенно, необходима передача непостоянного набора измененных генов – генной сети, формирующей такой патологический фенотип. В таком наборе вся группа генов формирует конкретный фенотип, но сам фенотип оказывается сформирован в виде различающихся преобладающей симптоматикой и тяжестью течения клинических вариантов в зависимости от того, какие гены сформировали генную сеть у данного больного. Поэтому большой интерес представляет не только поиск маркерных однонуклеотидных генов, ведущих к замене аминокислот в белковых последовательностях или нарушению работы регуляторных участков генома, но и выявление генных сетей, формирующих патологический фенотип.

Примерно у 50% больных с ХСН фракция выброса левого желудочка (ФВЛЖ) находится в пределах референтного интервала, но её распространённость к ХСН с низкой фракцией выброса (СНнФВ) увеличивается на 1% в год [4; 5]. В популяции обследованных с ХСН, верифицированной по Фрамингемским критериям, у 85,6% лиц ФВЛЖ была более 40%, у 56,8% обследованных ФВЛЖ – более 50% [1; 3]. Пограничная ФВ от 40 до 49% (ХСНпФВ) составляет 10-20% популяции лиц с СН [6]. В соответствии с данными последнего регистра по обращаемости в поликлиники, у 78% больных ФВЛЖ не выходит за пределы физиологической нормы, что говорит о более высокой медико-социальной значимости данного состояния для нашей страны, чем для стран западного мира [7]. Внастоящий момент основными биологическими маркерами ХСН являются натрийуретические пептиды, которые также используют как маркеры эффективности терапии. Обнаружение физиологических количеств натрийуретических пептидов (NT-proBNP и BNP ниже 125 и 35 пг/мл соотв.) у нелеченых пациентов позволяет исключить ХСН [8]. Тем не менее у 30% лиц с ХСНсФВ содержание BNP в крови находится в референтном интервале нормы. По этой причине не все специалисты считают правильным использовать этот показатель как абсолютный критерий ХСН [9].

В связи с тем что ренин-ангиотензин-альдостероновая система позиционирована как основное звено патогенеза ХСН, среди более 16 генов-кандидатов, связанных с ССЗ, интерес исследователей сосредоточен на гене ангиотензиногена (AGT) [10], в котором найдено более 30 однонуклеотидных полиморфизмов [11]. Среди них в настоящее время наиболее часто используют полиморфизмы М235Т и Т174М, частота которых варьирует в различных популяциях [10].

Анализ полиморфизма генов липидного обмена, а именно: ген липопротеинлипазы – HindIII; полиморфизма аполипопротеина Е – HhaI; белка-переносчика эфиров холестерина – TaqIB и ангиотензинпревращающего фермента – полиморфизм I/D у больных с ИБС, – позволил рассматривать эти гены как маркеры высокого риска ХСН, способные сформировать фенотип ХСН в отдаленном будущем [12].

Найдено более 30 индуцибельных генов, побуждаемых стимулами к гипертрофии миокарда, среди них: гены трансформирующего рост фактора-β1, натрийуретического пептида, инсулиноподобного фактора роста-1, белков саркомеров и др. Напротив, экспрессия около 10 генов блокируется стимулами к гипертрофии, а именно: гены ряда белков кальциевых каналов, рецепторов ангиотензина II, эндотелин I, фосфоламбана, кардиотрофина‑1 и др., связанных с G‑протеином [13]. Учитывая многообразие этиологических воздействий, допустимо предположить, что специфическая терапия, предложенная только для одной̆ из форм ХСН, не будет эффективна для других форм ХСН, мало отличающихся паттерном клинических симптомов, но с различной этиологией и патогенезом. Поэтому раскрытие генетических факторов, участвующих в формировании и прогрессировании ХСН, может оказать значительное влияние на понимание патофизиологических процессов, приводящих к ее формированию. Современные генные технологии формируют новые технологии прогнозирования течения ХСН, лечения и оценки эффективности терапии.

Целью нашей работы являлось изучение сочетания генетических показателей предрасположенности к ССЗ у лиц с ХСН с сохраненной фракцией выброса.

Материал и методы исследования. Всего обследовано 50 пациентов с ХСН и 50 лиц без симптомов патологии сердечно-сосудистой системы. Средний возраст пациентов с ХСН составил 68,0±6,7, у контрольной группы (35,6 ±8,3) года.

Критерии отбора пациентов. Пациенты с ХСН с низкой, пограничной и сохраненной ФВЛЖ отобраны по совокупности критериев:

1) классический комплекс субъективных и объективных признаков ХСН;

2) ФВЛЖ ≥ 50%, 40-50% и ≤ 40%;

3) увеличение плазменной концентрации мозгового натрийуретического пептида (МНП) более 35пг/мл и/или его N-концевого предшественника (NT-proBNP) более 125 пг/мл;

4)выявление какого-либо дополнительного критерия ХСН: гипертрофии левого желудочка и/или дилатации левого предсердия, и/или диастолической дисфункции.

Определяемые генные полиморфизмы. Исследовали однонуклеотидные полиморфизмы генов (SNP – single nucleotide polymorphism). Для определения полиморфизмов, ассоциированных с развитием тромбофилии (8 полиморфизмов генов F13A1, F2, F5, F7, FGB-фибриноген, PAI-1, ITGA2-a2 интегрин, ITGB3-b интегрин) и гипертензии (9 полиморфизмов генов АDD1, AGT, AGTR1, AGTR2, CYP11B2, GNB3, NOS3), использовали наборы фирмы ООО «ДНК-технология» (Россия, регистрационное удостоверение № ФСР 2010/08414).

Для определения полиморфизмов генов, ассоциированных с патологией углеводного и липидного обменов – ADRB2, FDRB3, FABP2, PPARG, PPARG1, PPARG2, APOA1, APOE, APOC3, PON1, LPL, LIPS, – и системы цитохромов Р450, осуществляющих метаболизм лекарственных препаратов, ассоциированных с ССЗ, использовали наборы фирмы «Литех» (Россия, регистрационное удостоверение № ФСР 2012/13165). Выделение ДНК проводили по методике, описанной в инструкции, приложенной к набору фирмы «ДНК-технология» или к набору для выделения ДНК фирмы «Литех». Чистоту и концентрацию выделенной ДНК верифицировали на спектрофотометре Nanodrop2000C (Thermoscientific, США, номер по Госреестру 56026-13). ДНК амплифицировали на приборе «ДТ-прайм 5» (ООО «ДНК-технология», Россия, номер по Госреестру 76722).

Статистический анализ. Для сравнения количественных переменных использовали критерий Краскела-Уоллиса [14]. Группы сравнивали попарно с помощью критерия Манна-Уитни (https://medstatistic.ru/calculators/calcmann.html). Категориальные переменные оценивали по критерию Пирсона [15] с подбором степеней свободы. Результаты статистического анализа считали значимыми при р<0,05. Соответствие частот в группах генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга оценивали по критерию χ2 [16]. При обнаружении различий частот генотипов изучаемых генов, для оценки связи вычисляли отношения шансов (ОШ [17]) и их 95% доверительный интервал (ДИ). Значимыми считали различия при р<0,05, при условии, что значения 95% ДИ не пересекали 1. Значение ОШ в интервале 0-1 соответствует снижению риска, ОШ более 1 – увеличению риска, ОШ равное 1 – отсутствию эффекта.

Результаты исследования и их обсуждение. Генетические показатели в группе больных с ХСН. В таблице 1 представлены результаты анализа полиморфизмов генов, связанных с гиперкоагуляцией у больных с различными формами ХСН.

Таблица 1

Полиморфизмы генов, связанных с развитием гиперкоагуляции у больных с ХСН

Название

гена,

полиморфизм

Исследуемые

группы

 

Частота распределения генотипов (%), вариантов «риска»:

р

ОШ

(ДИ)

гомозиготный без аллеля «риска»

гетерозиготный

гомозиготный

S гомо- и

гетерозиготных

F13

103 G>T

rs 5985

Контрольная группа, n=50

84,0

15,0

1,0

16,0

 

p<0,04*

ОШ=1,5

 

Больные с ХСН, n=48

6,2 (3)

37,5 (18)

56,3 (27)

93,8

ITGB3

1565 T>C

rs 5918

Контрольная группа, n=50

80,0

20,0

0

20,0

p=0,01

ОШ=1,5

Больные с ХСН, n=52

0

36,5(19)

63,5(33)

100

PAI-1

-675 5G>4G

rs 1799889

Контрольная группа, n=50

92,0

8,0

0

8,0

 

p<0,01*

ОШ=1,8

 

Больные с ХСН, n=48

20,8(10)

50,0 (24)

29,2 (14)

79,2

MTHFR

-677 C>T

rs1801133

Контрольная группа, n=50

93,0

6,0

1,0

7,0

p<0,01*

ОШ=14

(1,4-15,4)

Больные с ХСН, n=27

25,9 (7)

66,7 (18)

7,4 (2)

74,1

MTRR

-66 A>G

rs1801394

Контрольная группа, n=36

97,0

3,0

0

3,0

p=0,01

ОШ=21

(2,1-19,0 )

Больные

5,6 (2)

66,7 (24)

27,8 (10)

94,5

Примечание: здесь и далее * группы различаются статистически значимо; ОШ подсчитаны для вариантов генов, связанных с развитием гиперкоагуляции, со статистически значимыми различиями.

В настоящем исследовании наблюдается десятикратное превышение аллелей риска в группе больных с ХСН в сравнении с контрольной группой, что во много раз увеличивает вероятность тромбозов. Необходимо отметить, что в таблице приведены результаты полиморфизмов генов, отличающиеся от контрольной группы. Соответственно, в таблицу не вошли гены F2, F5, F7, ITGA2-a2 интегрин. Анализ данных таблицы 1 позволяет сделать вывод, что суммарное количество гетеро- и гомозиготных вариантов полиморфизма гена предшественника трансглутаминазы F13 (фактор свертывания крови XIII), содержащих аллель «риска», в группе больных с ХСН в 5,8 раза превышает их число в контрольной группе. Количество полиморфных генотипов, несущих аллели риска гена ITGB3, превышает более чем в 4 раза их число в контрольной группе, что повышает риск развития тромбоэмболии. Количество полиморфных вариантов, содержащих аллели «риска» гена PAI-1, почти в десять раз превышает их количество в контрольной группе. Частоты полиморфизмов гена MTHFR для гетеро- и гомозиготного варианта риска превышает их количество в контрольной группе в 11 и 7,4 раза. Наблюдения за изменениями частоты полиморфизмов, содержащих аллели «риска» гена MTRR, выявили еще более значительные различия (в 31,5 раза) между результатами в группе больных с ХСН и контролем. Среди множества патогенетических механизмов, индуцирующих развитие артериальной гипертонии, ведущими являются те, что опосредуют свое влияние через ренин-ангиотензиновую систему (РАС). Ген AGT кодирует белок ангиотензиноген, в настоящей работе исследовали полиморфизм 704 Т>C этого гена. Обнаружено, что наличие в генотипе аллеля С приводит к неблагоприятному прогнозу. Следует отметить, что присутствие в генотипе пациентов аллелей С почти в 5 раз превышало их количество в группе сравнения (табл. 2).

Таблица 2

Полиморфизмы генов, связанные с развитием гипертензии у больных с хронической сердечной недостаточностью

Название

гена,

полиморфизм

Исследуемые группы

Частота распределения генотипов (%), вариантов «риска»:

р

ОШ

(ДИ)

гомозиготный без аллеля «риска»

гетерозиготный

гомозиготный

S гомо- и

гетерозиготных

AGT

704 T>C

rs 699

Контрольная группа, n=100

87,0

11,0

2,0

13,0

p<0,001*

2,3

(2,10-3,56)

Больные с ХСН, n=45

24,4(11)

57,8(26)

17,8(8)

75,6

AGTR1

1166 A>C

rs 5186

Контрольная группа, n=50

70,0

26,0

4,0

30,0

p=0,59

Больные с ХСН, n=44

61,4(27)

34,1(15)

4,5 (2)

38,6

GNB3

825 C>T

rs 5443

Контрольная группа, n=50

64,0

31,0

5,0

36,0

p=0,12

Больные с ХСН, n=42

50,0 (21)

42,9 (18)

7,1 (3))

50,0

NOS3

786 T>C

rs 2070744

Контрольная группа, n=50

4

31,0

65

96

р=0,0014*

2,6

(0,35-1,56)

Больные с ХСН, N=42

9,5 (4)

35,7 (15)

54,8 (23)

90,5

NOS3

894 G>T

rs 1799983

Контрольная группа, n=50

66,0

31,0

3,0

34,0

p=0,006*

Больные с ХСН, n=45

4,4 (2)

26,7 (12)

68,9 (31)

95,6

Различия встречаемости полиморфизма гена AGTR1 1166 A>C в генотипе обследуемых с ХСН и группе сравнения статистически не значимы. Другой ген, относящийся к системе регуляции артериальной гипертензии, это GNB3 (825 С>T), экспрессия которого меняется в зависимости от наличия Т в генотипе пациента. Число пациентов с аллелем «риска» Т на 38% больше, чем в контрольной группе.

В настоящем исследовании сравнивали показатели полиморфных генов синтазы окиси азота NOS3, содержащих аллели «риска» С (786С>T), в группе с ХСН с контрольной группой – различия оказались статистически не значимы. При сопоставлении с группой сравнения числа лиц с полиморфными генами «риска» в настоящем исследовании (894G>T) обнаружено трехкратное превышение числа пациентов с ХСН, содержащих аллель Т, почти половину этой величины составила группа пациентов с генотипом, содержащим гомозиготный вариант, усиливающий описанные выше негативные процессы.

В таблице 3 представлены финальные данные исследования полиморфизма генов, связанных с дисфункцией липидного и углеводного обмена у больных с ХСН.

Таблица 3

Полиморфизмы генов, связанных с дисфункцией липидного и углеводного обмена у больных с хронической сердечной недостаточностью

Название гена,

полиморфизм

 

Исследуемые группы

Частота распределения генотипов (%), вариантов «риска»:

р

ОШ

(ДИ)

гомозиготный без аллеля «риска»

гетерозиготный

гомозиготный

S гомо- и

гетерозиготных

FTO

23525

A>T

rs9939609

Контрольная группа, n=50

49

р=0,02*

Больные с ХСН, n=37

35,1 (13)

40,5 (15)

24,4 (9)

69,9

PPARGC1A

rs8192678

Контрольная группа, n=50

63,0

р=0,13

Больные с ХСН, n=50

32 (16)

44 (22)

24 (12)

68,0

PON1

Gln192Arg

rs 662

Контрольная группа, n=50

68,2

31,8

0

31,8

p<0,02*

1,1

(0,27-1,73)

Группа риска ВСС, n=50

44,0

35,6

20,4

56,0

ADRB2

C>G

Контрольная группа, n=5

84,0

14,0

2,0

16,0

p=0,01*

Больные с ХСН, n=24

25,0 (6)

54,2 (13)

20,8 (24)

75,0

ADRB2

A>G

Контрольная группа, n=50

30,0

11,0

41,0

0,89

Больные с ХСН, n=28

10,7 (3)

57,1 (16)

32,2 (9)

89,3

Увеличение числа пациентов с маркерными полиморфизмами гена FTO превышает контрольный уровень в 1,3 раза, что может быть обусловлено высоким распределением этого варианта гена в популяции в целом. Ген PPARGC1A локализуется на 4 хромосоме (4p15.1). В настоящем исследовании не выявлено увеличения полиморфизмов «риска» гена PPARGC1 в группе пациентов с ХСН по сравнению с показателями в контрольной группе, что, по-видимому, связано с очень высоким уровнем этих аллелей в контрольной популяции, наблюдавшейся в данном исследовании. В группе пациентов с ХСН число пациентов с аллелем «риска» гена параоксоназы (PON1) в 1,8 раза превышает их число в контрольной группе, что может быть одной из ряда многочисленных причин развития ХСН. В группе пациентов с ХСН в нашем исследовании полиморфизма гена ADRB2 C>G количество пациентов, генотип которых содержит аллель «риска» G, в 4,7 раза превышает их число в контрольной группе.

В таблице 4 представлены данные, полученные при изучении генов семейства цитохромов р450. У больных с ХСН, изученных в данном исследовании, не было выявлено каких-либо существенных отличий значений для генов Сур от таковых в контрольной группе. Следует отметить, что контроль (распределение в европейской популяции) для этих генов взят из литературы, за исключением гена Сур2С19. Интересно, что суммарное число гетеро- и гомозиготных аллелей именно этого гена ниже в группе больных с ХСН, чем в контрольной, почти в 1,7 раза. Количество пациентов с геном СYP3A5(G>A) (варианты генотипа АА и AG) статистически достоверно превышает их число в контрольной группе (табл. 4). Важно отметить, что число гомозиготных форм этого гена (АА) составляет 22,8% (из 31,4%).

Таблица 4

Полиморфизмы генов, ассоциированных с нарушением функций системы цитохромов Р450

Название гена,

полиморфизм

Исследуемая группа

Частота распределения генотипов (%), вариантов «риска»:

Р

 

гомозиготный без аллеля «риска»

гетерозиготный

гомозиготный

S гомо- и

гетерозиготных

СYP3A5

6986

G>A

rs776746

Контрольная группа, n=50

89,1

10,9

0

10,9

 

 

р=0,02*

Больные с ХСН, n=35

68,6 (24)

8,6 (3)

22,8 (8)

31,4

CYP3A4

392

A>G

Rs2740574

Контрольная группа, n=50

92,1

7,9

0

7,9

 

 

р=0,13

Больные с ХСН, n=34

85,3 (29)

14,7 (5)

0

14,7

CYP2C19

G>A

rs4244285

Контрольная группа, n=50

99,2

0,8

0

0,8

 

p<0,05*

 

 

Больные с ХСН, n=50

81,9 (24)

15,0 (3)

3,1

18,1

CYP11B2

344

C>T

rs1799998

Контрольная группа, n=50

43,0

41,0

15,4

56,4

p<0,05*

 

Больные с ХСН, n= 44

29,5 (13)

36,4 (16)

34,1 (15)

70,5

Генетические маркеры у больных с ХСН с нормальной и сниженной фракцией выброса. Из анализа результатов при распределении по группам (со сниженной, нормальной и пограничной фракциями выброса), представленных в таблице 5, следует, что различия наблюдаются между четырьмя из изученных в настоящей работе генов: MTHFR (677C> T) rs 1801133, MTRR (66A> G), AGT (700 T>C) rs 699, FTO (A>T) (rs939609), что может быть использовано в дальнейшей работе по диагностике и лечению пациентов с ХСН.

Таблица 5

Распределение пациентов в группе ХСН с различной фракцией выброса по полиморфизмам исследованных генов

Название гена,

полиморфизм

Исследуемые группы

больных с ХСН

Частота распределения генотипов (%), вариантов «риска»:

гомозиготный без аллеля «риска»

гетерозиготный

гомозиготный

S гомо- и

гетерозиготных

F13

rs 5985

Контрольная группа, n=50

50,0 (2)

50,0 (2)

0

50

Фракция

выброса

сниженная

0

50,0 (5)

50,0 (5)

100

нормальная

7,1 (1)

28,6 (4)

64,3 (9)

92,9

пограничная

18,2 (2)

27,3 (3)

54,5 (6)

81,8

PAI-1

rs 1799889

Контрольная группа, n=50

50,0 (2)

50,0 (2)

0

50

Фракция

выброса

сниженная

0

75,0 (7)

25,0 (3)

100

нормальная

33,3 (4)

47,7 (5)

25,0 (3)

72,7

пограничная

27,3 (3)

45,4 (5)

27,3 (3)

72,7

MTHFR

677

C>T

rs 1801133

Контрольная группа, n=50

 

(2)

 

 

Фракция

выброса

сниженная

 

(1)

(1)

 

нормальная

33,3 (4)

53,8 (7)

8,3 (1)

62,1

пограничная

42,8(3)

57,2 (4)

0

57,2

MTRR

66

A>G

rs1801394

Контрольная группа, n=50

(1)

(1)

 

 

Фракция

выброса

сниженная

 

(1)

(1)

 

нормальная

8,3 (1)

33,3 (4)

58,3 (7)

91,7

пограничная

14,3 (1)

57,1 (4)

28,6 (2)

85,7

AGT

700

rs 699

T>C

Контрольная группа, n=50

0

50,0 (2)

50,0 (2)

100

Фракция

выброса

сниженная

20,0 (2)

60,0 (6)

20,0 (2)

80,0

нормальная

35,7 (5)

42,9 (6)

21,4 (3)

64,3

пограничная

30,0 (3)

40,0 (4)

30,0 (3)

70

NOS3

786

rs 2070744

T>C

Контрольная группа, n=50

25,0 (1)

50,0 (2)

25,0 (1)

75,0

Фракция

выброса

сниженная

30,0 (3)

60,0 (6)

10,0 (1)

70,0

нормальная

50,0 (7)

35,7 (5)

14,3 (2)

50,0

пограничная

80,0 (8)

20,0 (2)

0

20,0

PPARGCA1

rs 8192678

G>A

Контрольная группа, n=50

25,0 (1)

75,0 (3)

0,0

75,0

Фракция

выброса

сниженная

57,1 (4)

14,3 (1)

28,6 (2)

42,9

нормальная

54,6 (6)

18,2 (2)

27,3 (3)

45,5

пограничная

37,5 (3)

25,0 (2)

37,5 (3)

62,5

FTO

rs 9939609

A>T

Контрольная группа, n=50

50,0 (2)

25,0 (1)

25,0 (1)

50,0

Фракция

выброса

сниженная

25,0 (2)

37,5 (3)

37,5 (3)

75,0

нормальная

54,6 (6)

27,3 (3)

18,2 (2)

45,5

пограничная

14,3 (1)

71,4 (5)

14,3 (1)

85,7

CYP11B2

344

rs 1799998

C>T

Контрольная группа, n=50

0

50,0 (2)

50,0 (2)

100

Фракция

выброса

сниженная

30,0 (3)

60,0 (6)

10,0 (1)

70,0

нормальная

50,0 (7)

7,1 (1)

42,9 (6)

50,0

пограничная

30,0 (3)

30,0 (3)

40,0 (4)

70,0

Выявленные полиморфизмы у обследованной группы больных с ХСН с низкой фракцией выброса хорошо подразделяются на две группы: полиморфизмы, частота которых в данной группе пациентов не отличается от популяционной, и полиморфизмы, частота которых отлична. Последняя группа может быть подразделена на две подгруппы: полиморфизмы с частотой выше популяционных и полиморфизмы с частотой ниже популяционных. Гены можно подразделить на три подгруппы. Первые две подгруппы связаны с ожирением, а также инсулинорезистентностью и сахарным диабетом тип II (СД II).

Экономическую и социальную значимость данного исследования можно рассматривать в аспекте предупреждения ХСН у пациентов с начальными признаками ССЗ и неблагоприятной наследственностью. Нами выявлен ряд полиморфных генов: MTHFR (677C>T) rs 1801133, MTRR (66A>G), AGT (700 T>C) rs 699, FTO (A>T)rs939609, – встречающихся значительно чаще, чем в группе сравнения, и поэтому они могут быть использованы как маркеры заболевания. Значимость выявленных генов в развитии ХСН можно оценить, учитывая их роль в патогенезе повреждения миокарда. Так, продукт гена MTHFR метилентетрагидрофолатредуктаза непосредственно участвует в превращении гомоцистеина в метионин. При высоком уровнегомоцистеинаувеличивается риск раннего развития заболеваний сердечно-сосудистойсистемы. Угомозигот MTHFR (rs1801133) отмечается термолабильность мутантного гена и снижение активности метилентетрагидрофолатредуктазы до 35% от среднего значения. Выявленные маркерные мутациив гене MTRR определяют риск развития гипергомоцистеинемии и ассоциированных с ней ССЗ. Маркерные точечные мутации в гене MTRR определяют риск развития гипергомоцистеинемии и связанных с ней заболеваний сердечно-сосудистого континуума. Сочетание в одном геноме полиморфизмов генов MTHFR, MTRR, AGT увеличивает риск инсультов [18]. Частота С-аллеля гена AGT уменьшается с возрастом, по-видимому, в связи с сокращением продолжительности жизни носителей этого аллеля. Cверхэкспрессия гена FTO в эксперименте снижала апоптоз клеток миокарда, а нокдаун этого гена, напротив, увеличивал повреждение миокарда [19].

Таким образом, у пациентов с ХСН, в отличие от контрольной группы, выявлено статистически значимое увеличение количества маркерных полиморфизмов генов, связанных с:

1) развитием гиперкоагуляции:

F13 (rs 5985), ITGB3 (rs 5918), PAI-1 (rs 1799889), MTHFR (rs1801133), MTRR (rs1801394);

2) развитием гипертензии:

AGT (rs 699), GNB3 (rs 5443), NOS3 (rs 1799983);

3) нарушением липидного и углеводного обмена: FTO (rs9939609), PON1 (rs 662), ADRB2 (C>G);

4) нарушением метаболизма:

СYP3A5(G>A), СYP3A5(G>A), CYP11B2 (344C>T);

5) частота полиморфизма гена FTO в группе пациентов с ХСН в 1,65 раза превышает частоту в контрольной группе, что может значительно увеличить риск избыточного веса;

6) при анализе результатов, полученных у больных с ХСН с различной фракцией выброса, статистически значимые различия частот получены для следующих полиморфизмов генов:

MTHFR (677C>T) rs 1801133, MTRR (66A>G), AGT (700 T>C) rs 699, FTO (A>T) rs939609.

Работа выполнена в рамках НИР «Маркер» по теме №VMA.03.12.01.1920/0028.