Для установления основ срыва адаптационных механизмов в организме матери к развивающейся беременности необходимы углубленные сведения по происходящим патофизиологическим процессам на клеточном и молекулярном уровнях [6; 7]. В последнее время все больше внимания уделяется изучению морфофункционального состояния форменных элементов крови при различных патологических состояниях, что объясняется способностью клеток крови адекватно отражать общий статус организма, позволяя судить о выраженности мембранодестабилизирующих процессов в клеточных структурах организма, а также значимостью нарушений их функциональной активности в патогенезе основного патологического состояния, в частности гестоза [3].
При экстремальных состояниях и ряде заболеваний, в том числе и гестозе, активируется процесс липопереокисления, являющийся одним из главных механизмов повреждения мембран [1]. Однако до настоящего времени изменения липидного метаболизма при гестозе изучены недостаточно, что и явилось целью исследования.
Материалы и методы исследования. Методом случайной выборки были отобраны 56 беременных, которых распределили по группам. Выделена группа сравнения в количестве 13 здоровых беременных с физиологическим течением беременности. Величины изученных показателей, полученные в этой группе, были использованы в качестве отправной точки сравнения как физиологически нормальные значения. В состав исследуемой группы вошли 43 беременные с гестозом, разделенные на три подгруппы, соответственно степени тяжести гестоза, проходившие лечение в отделениях патологии беременности МУЗ «Городской родильный дом № 2» г. Саранска.
Первую подгруппу составили 17 беременных с гестозом легкой степени тяжести (по шкале Г.М. Савельевой, 2001). Вторая подгруппа состояла из 14 пациенток, у которых была диагностирована средняя степень тяжести заболевания. В последнюю, третью подгруппу, вошли 12 беременных женщин с гестозом тяжелой степени.
В работе были использованы общеклинические, лабораторно-биохимические методы исследования. Функциональное состояние эритроцитов оценивали по сорбционной способности эритроцитов (Тогайбаев А.А. и др., 1988), их деформабельности (Федорова З.Д., 1986), жесткости эритроцитарных мембран (Моисеевой О.М. и др., 1990). Липиды из эритроцитов экстрагировали хлороформметаноловой смесью (Хиггинс Дж.А., 1990), фракционировали методом тонкослойной хроматографии. Содержание малонового диальдегида (МДА) выявляли в реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК), диеновых конъюгатов определяли спектрофотометрическим методом при длине волны 232-233 нм (Ганстон Ф.Д., 1986). Активность супероксиддисмутазы (СОД) определяли по способности фермента тормозить аэробное восстановление нитросинего тетразолия до формазана, каталазы - спектрофотометрическим методом, основанным на способности перекисей образовывать с молибдатом аммония стойкий окрашенный комплекс (Королюк М.А., 1988) Активность фосфолипазы А2 оценивали по каталитической деятельности фермента титрометрическим методом. Полученные цифровые данные обрабатывали методом вариационной статистики с использованием критерия Стьюдента, корреляционную связь оценивали по критерию r.
Результаты и их обсуждение. Анализ клинической характеристики показал, что гестоз чаще развивался у женщин активного репродуктивного возраста. Развитие гестоза сопровождалось гемоконцентрацией, проявлявшейся увеличением показателей гемоглобина, эритроцитов и гематокрита. В наших исследованиях содержание эритроцитов достоверно увеличивалось в I подгруппе на 18,9% (p<0,05), во II подгруппе - на 26,8% (p<0,05) и в III подгруппе - на 35,4% (p<0,05). Уровень гемоглобина был достоверно повышен при гестозе тяжелой степени на 13,1% (p<0,05). В этой группе зарегистрирован значительный рост гематокрита, значение которого было выше физиологической нормы на 26,4% (p<0,05).
Изучение процессов ПОЛ и состояния липолитических и антиоксидантных ферментов в плазме крови и эритроцитах при позднем токсикозе беременности показало следующее (табл. 1). В плазме крови уровень ДК превышал нормальные значения на 29,2-104,2% (р<0,05), МДА - на 32,0-111,2% (р<0,05), Fe-МДА - на 21,0-53,7% (р<0,05) соответственно тяжести гестоза. В эритроцитах концентрация ДК превышала нормальные значения на 29,4-82,4% (р<0,05), МДА - на 94,3-128,3% (р<0,05), Fe-МДА - на 18,3-59,5% (р<0,05). Достоверное увеличение ДК и Fe-МДА прослеживалось уже у беременных первой подгруппы. Активность супероксиддисмутазы в плазме крови и эритроцитах зарегистрирована сниженной у беременных всех трех подгрупп: в плазме крови - на 16,6-35,6% (р<0,05), а в эритроцитах - на 20,4-34,3% (р<0,05).
Таблица 1 - Содержание продуктов ПОЛ и активность фосфолипазы А2 в эритроцитах беременных при гестозе (М±m)
|
Показатель |
Здоровые беременные |
Гестоз |
||
|
I подгруппа |
II подгруппа |
III подгруппа |
||
|
ДК, усл. ед./мг липидов |
0,17±0,009 |
0,22±0,017* |
0,26±0,019* |
0,31±0,026* |
|
МДА, нмоль/г белка |
2,3±0,15 |
2,74±0,21 |
4,47±0,33* |
5,25±0,42* |
|
Fe2 - МДА, нмоль/г белка |
5,26±0,31 |
6,22±0,34* |
7,28±0,44* |
8,39±0,57* |
|
Фосфолипаза А2 (мкмоль/с/г белка) |
0,38±0,019 |
0,98±0,081* |
1,36±0,12* |
1,69±0,14* |
|
Каталаза (мгН2О2/мин/г белка) |
0,015±0,0008 |
0,014±0,0008 |
0,012±0,0007* |
0,009±0,0007* |
|
СОД, усл. ед/мг белка |
11,64±0,69 |
9,27±0,66* |
8,03±0,59* |
7,65±0,47* |
* - достоверность различия по отношению к группе сравнения при p<0,05.
Активность фосфолипазы А2 в плазме крови была повышена в 3-6 раз (р<0,05), в эритроцитах - в 2,5-3,4 раза (р<0,05) у всех подгрупп беременных (рис. 1).
Рис. 1. Активность ФЛА2 и антиоксидантных ферментов в эритроцитах при гестозе (исходные значения приняты за 100%); * - достоверность отличия по отношению к норме при p<0,05.
При проведении исследований было выявлено, что при гестозе легкой степени деформабельность и неспецифическая проницаемость эритроцитов практически не изменялись. У беременных второй и третьей подгрупп пластичность клеток была снижена на 26,6 и 48,6% (р<0,05), а проницаемость эритромембран повышена на 42,4 и 62,0% (р<0,05) соответственно (табл. 2).
Таблица 2 - Показатели функционального состояния эритроцитов беременных при гестозе (М±m)
|
Показатель |
Здоровые беременные |
Гестоз |
||
|
I подгруппа |
II подгруппа |
III подгруппа |
||
|
Индекс деформабельности, усл. ед. |
0,79±0,038 |
0,68±0,051 |
0,58±0,042* |
0,42±0,034* |
|
Неспецифическая проницаемость,% |
34,7±1,74 |
38,6±2,63 |
49,4±2,82* |
56,2±3,17* |
* - достоверность различия по отношению к норме при p<0,05.
При анализе липидограмм нами в исследованиях выявлено повышение концентрации лизоформ фосфолипидов и свободных жирных кислот в исследуемых тканях и снижение уровня фосфатидилхолина. У беременных при гестозе легкой степени наиболее выраженные сдвиги липидного метаболизма прослеживались в плазме крови. В мембранах эритроцитов беременных первой подгруппы увеличивалась концентрация СЖК на 25,6% (р<0,05), ЭХС - на 47,9% (р<0,05), ЛФЛ - в 4,7 раза (р<0,05).
При исследовании липидного метаболизма в плазме крови и эритроцитах женщин, составляющих вторую и третью подгруппы, были выявлены более существенные сдвиги. Так, во второй подгруппе отмечено снижение уровня суммарных фосфолипидов на 13,7% (р<0,05). Относительно данных группы сравнения регистрировалось повышение удельного веса свободных жирных кислот на 51,3% (р<0,05), триацилглицеролов - на 50,6% (р<0,05) и эфиров холестерола - на 79,5% (р<0,05). Концентрация холестерола снижалась незначительно.
При гестозе тяжелой степени выраженным сдвигам относительно нормы был подвержен весь фракционный состав липидов, в том числе и состав фосфолипидного бислоя мембран эритроцитов (рис. 2).
Рис. 2. Изменения состава некоторых фосфолипидов в эритроцитах при гестозе (исходные значения приняты за 100%); * - достоверность отличия по отношению к группе сравнения при p<0,05.
Нарушения структурно-функциональной целостности клеточных мембран эритроцитов не могли не отразиться на маточно-плацентарном кровообращении, особенно у беременных третьей подгруппы.
Безусловно, указанные отклонения гомеостатических констант явились немаловажным фактором, ухудшающим как течение беременности, так и результаты родоразрешения. У 23,3% беременных было проведено родовозбуждение при доношенном сроке беременности вследствие неэффективности терапии, в 25,6% родоразрешение было досрочным. Процент кесарева сечения составил 37,2%. Таким образом, роды в срок через естественные родовые пути произошли только у 37,2% пациенток.
Таким образом, проведя анализ полученных данных у беременных основной группы и группы сравнения, можно сделать следующее заключение. Одной из причин прогрессирования патологического процесса и возникновения выраженных расстройств гомеостаза при гестозе является разбалансировка липидного метаболизма в плазме крови и эритроцитах. Изменения состава фосфолипидного бислоя мембран последних расцениваются как мембранодестабилизирующие процессы. Их развитие обусловлено бесконтрольным течением свободнорадикальных реакций, приводящих к инициации перекисного окисления липидов клеточных мембран и активизации липолитических ферментов (в наших исследованиях на примере фосфолипазы А2). Данные изменения протекают на фоне депрессии антиоксидантных ферментных систем. Степень изменений липидного метаболизма в исследованных структурах, как проявления мембранодестабилизирующих явлений, зависит от тяжести гестоза (r=0,653-0,981). Указанные патологические процессы вкупе усугубляют состояние организма беременных при позднем токсикозе и создают благоприятный фон для дальнейшего прогрессирования патологического процесса, что значительно отягощает предродовой период и роды.
Полученные в работе результаты позволяют установить важную роль нарушений липидного метаболизма в патогенезе гестоза, что может быть основой для расширения диагностической и лечебной базы при этой тяжелейшей патологии беременных.
Рецензенты:
Марусов А.П., д.м.н., профессор кафедры акушерства и гинекологии медицинского института ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева», г. Саранск.
Ралыш И.В., д.м.н., профессор кафедры нормальной физиологии, ФГБОУ ВПО «РУДН», г. Москва.