Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

Введение

Патоморфология образования грыж обусловлена дегенеративными процессами, происходящими в тканях брюшной стенки, среди которых отмечают атрофию соединительной и мышечной тканей, неполноценность соединительной ткани вследствие коллагеновой недостаточности [6; 7]. Необходимость поиска новых материалов для герниопластики продиктована несовершенством существующих материалов, вызывающих в ранние сроки рецидив, а также множество осложнений, следующих из-за травматизации тканей находящимся имплантатом [6]. Применение ксеноперикарда в реконструктивной хирургии грыж дало хорошие клинические результаты [3; 5]. Однако морфологические процессы, происходящие в тканях при имплантации ксеноперикарда, на сегодняшний день изучены недостаточно.

Цель работы – изучить морфологию клеточной реакции тканей брюшной полости на имплантацию различных вариантов эпоксиобработанного ксеноперикарда в ранние сроки.

Материал и методы

Изучены гистологические препараты, полученные при имплантации эпоксиобработанного ксеноперикарда без насыщения и с насыщением хлоргексидином и гепарином в брюшной полости 60 белых крыс линии Vistar. Размеры имплантатов из эпоксиобработанного ксеноперикарда имели стандартную толщину 0,5 мм. Экспериментальный гистологический материал для каждого варианта насыщения эпоксиобработанного ксеноперикарда забирался в сроки 7 суток, 1 месяц. Операции проведены на кафедре госпитальной хирургии, гистологические препараты изготовлены на кафедре гистологии, цитологии и эмбриологии КемГМА. Для фиксации и окраски использовали инновационный фиксатор-краситель (патент на изобретение № 2408887). Методом световой микроскопии изучено 480 препаратов. Морфометрическую обработку полученных результатов проводили с использованием программы Bio Vision Professional, цветные фотографии гистологических препаратов обработаны с помощью программы Adobe Photoshop CS3. Использован световой микроскоп МС 300 Micros Austria с цифровой камерой CAM V400. Для исследования показателей лизиса и регенерации использованы цифровые показатели камеры (цпк). Статистическую обработку данных проводили с использованием программ Microsoft Office Excel 2003 и Statistica 6.1, описание количественных признаков представлено в формате: медиана (Ме) и интерквартильный размах (25-й; 75-й процентили), при сравнении трех независимых выборок применяли ранговый дисперсионный анализ Краскела-Уоллеса (H). Анализ динамики проводили, используя критерий Вилкоксона. При проверке нулевых гипотез критическое значение уровня статистической значимости принималось равным 0,05.

Результаты исследования

В ранние сроки (7 суток) при имплантации эпоксиобработанного ксеноперикарда без насыщения в брюшную полость отмечено отсутствие признаков воспаления. Имплантат имеет обычную окраску. Клетки, которые находились в области нахождения имплантата, представлены клетками макрофагального ряда, которые осуществляли начальный лизис имплантата (табл. 1). Сращение с органами брюшной полости не наблюдалось. Отмечено образование тонкой соединительнотканной капсулы вокруг имплантата. Образование небольшого количества новых кровеносных сосудов можно расценить как начальный признак регенерации.

Таблица 1 – Показатели клеточной реакции при имплантации вариантов эпоксиобработанного ксеноперикарда в ранние сроки

Через 7 суток при имплантации ксеноперикарда с насыщением хлоргексидином наблюдается фибринозное воспаление. В зоне имплантации отмечен нейтрофильный лейкоцитоз. Начинается лизис имплантата, толщина которого уменьшилась по сравнению с другими группами (табл. 2). Появляются КИТ, количество которых в два раза превышает количество при имплантации обычного ксеноперикарда. Количество макрофагов и количество эпителиоидных клеток аналогично обычному ксеноперикарду. В зоне имплантации появляется много грануляционной ткани, новая соединительная ткань и кровеносные сосуды (рис. 1). Сращение с органами брюшной полости отсутствует.

Рис. 1. Инфильтрированный ксеноперикард с насыщением хлоргексидином (2) в БП через 7 суток, снаружи располагается новая РВНСТ (1), грануляционная ткань (3) (о. композиция № 1, патент № 2408887, ув. 10×10).

Таблица 2 – Лизис вариантов эпоксиобработанного ксеноперикарда в брюшной полости в ранние сроки, (ув. 10×10)

Через 7 суток в зоне нахождения ксеноперикарда с насыщением гепарином воспаление, инфильтрация отсутствуют, однако количество тучных клеток, характеризующих аллергическую направленность реакции организма, больше, чем в других группах. ТК находятся в составе толстой соединительнотканной капсулы вокруг ксеноперикарда. Регенерация здесь отсутствует, однако отмечается наличие небольшого количества активных фибробластов. Отмечается начальный лизис имплантата КИТ и МФ, количество которых преобладает среди всех групп.

Через 1 месяц после имплантации ксеноперикарда без насыщения признаков воспаления не обнаружено, снаружи его окружает соединительнотканная капсула (рис. 2). Отмечается значительный лизис ксеноперикарда ЭК и КИТ, количество которых больше, чем в предыдущем сроке. Количество МФ уменьшается за счет дифференцировки в ЭК и КИТ. Регенерация проявляется в образовании грануляционной ткани, увеличении количества новых кровеносных сосудов. Появляются грануляционная ткань и новая РВНСТ. Количество активных фибробластов больше, чем в предыдущем сроке, в два раза.

Рис. 2. Скопление КИТ, ЭК и МФ (1) на боковой поверхности ксеноперикарда без насыщения (2) в БП через 1 месяц, снаружи видна образовавшаяся вокруг имплантата соединительнотканная капсула (3) (о. композиция № 1, патент № 2408887, ув. 10×10).

Через 1 месяц после имплантации ксеноперикарда с насыщением хлоргексидином воспаление уже отсутствует. Толщина капсулы вокруг имплантата увеличилась. Активнее происходит лизис имплантата и репарация собственных тканей по сравнению с другими экспериментальными группами. Толщина имплантата наименьшая, окраска становится бледная. Лизис осуществляется только ЭК и КИТ, а МФ уже отсутствуют. Грануляционная ткань созревает, и толщина новой РВНСТ достоверно возрастает по сравнению с предыдущим сроком и превышает эти показатели в других экспериментальных группах (табл. 3). Количество ТК по-прежнему остается высоким, однако теперь их наличие расценивается как количество резидентов новой соединительной ткани.

Через 1 месяц отмечается обширная инфильтрация в зоне имплантации ксеноперикарда с насыщением гепарином (рис. 3). Клетками, преобладающими в инфильтрате, являются КИТ, ЭК и ТК. Однако количество ЭК сократилось, а МФ полностью отсутствуют.

Таблица 3 – Оценка регенерации при имплантации вариантов эпоксиобработанного ксеноперикарда в брюшную полость в разные сроки, (ув. 10×10)

Рис. 3. Обширная инфильтрация КИТ (1), ЭК (2), ТК (3) ксеноперикарда с насыщением гепарином в БП через 1 месяц (о. композиция № 1, патент № 2408887, ув. 40×10).

Количество ТК сократилось, однако превышает количество в других группах. Появляется грануляционная ткань, новая соединительная ткань отсутствует. Происходит сращение с сальником. Снаружи имплантат окружен соединительнотканной капсулой.

Обсуждение результатов

В ранние сроки эпоксиобработанный ксеноперикард без насыщения и с насыщением гепарином не вызывает воспалительных изменений со стороны тканей реципиента, что обусловлено сведением к минимуму антигенных свойств [2]. Эпоксиобработанный ксеноперикард без насыщения и особенно с насыщением хлоргексидином способствует стимуляции ранней репарации собственных тканей. Сосудистая реакция с клеточной пролиферацией в области имплантации ксеноткани направлена на возмещение лизированных структур донорского материала [4]. Минимальные воспалительные проявления при имплантации ксеноперикарда с насыщением хлоргексидином сменяются наиболее быстрым и интенсивным образованием новой соединительной ткани. Ксеноперикард в брюшной полости не вызывает спаечного процесса [5], что подтверждается отсутствием сращения с органами брюшной полости через 7 суток во всех экспериментальных группах, и при имплантации эпоксиобработанного ксеноперикарда без насыщения через 1 месяц. Однако при имплантации ксеноперикарда с насыщением гепарином не происходит быстро и в достаточной степени неоколлагеногенеза и ангиогенеза. Вероятно, это связано с его фармакологическими свойствами: антикоагулянтным, антипролиферативным и антисклеротическим действием [1]. Наибольшее количество тучных клеток при имплантации ксеноперикарда с насыщением гепарином обусловлено его аллергическим действием [8].

Выводы

1. Для неосложненных, первично оперируемых грыж брюшной полости подходит ксеноперикард без насыщения, не вызывающий значительных морфологических изменений, лизис которого происходит с постепенной репарацией собственных тканей.
2. Для рецидивирующих грыж брюшной полости наиболее подходит ксеноперикард с насыщением хлоргексидином, стимулирующий репарацию быстрее и в большей степени.
3. Ксеноперикард с насыщением гепарином для герниопластики не подходит ввиду отсутствия репаративных процессов с нарастанием аллергического клеточного компонента организма реципиента.

Рецензенты:

Богданов Вячеслав Романович, д. биол. наук, профессор кафедры биологии с основами генетики и паразитологии, ГБОУ ВПО «Кем ГМА» Минздрава России, г. Кемерово.

Бураго Юрий Иванович, д.м.н., профессор, заведующий кафедрой судебной медицины ГБОУ ВПО «Кем ГМА» Минздрава России, г. Кемерово.